Κυτταρική σειρά KG-1
Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς KG-1
Η προέλευση και τα γενικά χαρακτηριστικά μιας κυτταρικής σειράς βοηθούν έναν ερευνητή να αποφασίσει για τη χρήση της στην εργασία του. Μπορείτε να διερευνήσετε αυτές τις πληροφορίες πριν αρχίσετε να εργάζεστε με αυτήν. Αυτή η ενότητα του άρθρου αφορά αποκλειστικά την προέλευση και τα χαρακτηριστικά των μακροφάγων KG-1. Εδώ, θα μάθετε: Τι είναι τα κύτταρα KG-1; Τι είναι η κυτταρική σειρά KG-1a; Ποια είναι η προέλευση της κυτταρικής σειράς KG-1; Ποια είναι η μορφολογία της KG-1;
- Η KG-1 είναι μια κυτταρική σειρά τύπου λεμφοβλάστη που προέρχεται από αναρρόφηση μυελού των οστών ενός λευκού άνδρα (59 ετών) με οξεία μυελογενή λευχαιμία. Δημιουργήθηκε από τους Koeffler και Golde το 1978. Αυτά τα κύτταρα βρίσκονται κυρίως στο στάδιο ωρίμανσης των προμυελοκυττάρων ή των μυελοβλαστών [1].
- Τα κύτταρα KG-1 παρουσιάζουν μορφολογία τύπου λεμφοβλάστη.
- Ο καρυότυπος της κυτταρικής σειράς KG-1 παρουσιάζει έναν ψευδοδιπλοειδή τυπικό αριθμό χρωμοσωμάτων.
KG-1 και KG-1a
Το KG-1a είναι μια υποσειρά των γονικών κυττάρων KG-1. Αναπτύχθηκε μετά από 35 περάσματα της κυτταρικής σειράς KG-1. Είναι λιγότερο διαφοροποιημένο σε σύγκριση με την κυτταρική σειρά KG-1. Επιπλέον, αυτή η υποσειρά είναι κυτταροχημικά, μορφολογικά και λειτουργικά λιγότερο ώριμη σε σύγκριση με τη μητρική κυτταρική σειρά (KG-1).
Πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς KG-1
Αυτή η ενότητα του άρθρου θα καλύψει όλες τις απαραίτητες πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια κυττάρων KG-1 που μπορεί να διευκολύνουν την εργασία σας. Εδώ θα μάθετε: Ποιος είναι ο χρόνος διπλασιασμού της κυτταρικής σειράς KG-1; Ποιες είναι οι συνθήκες καλλιέργειας των μακροφάγων KG-1; Πώς καλλιεργούνται τα κύτταρα KG-1;
Βασικά σημεία για την καλλιέργεια κυττάρων KG-1
Χρόνος διπλασιασμού:
Ο χρόνος διπλασιασμού της σειράς KG-1 είναι περίπου 45 ώρες. Ωστόσο, μπορεί να διαφέρει ανάλογα με τις συνθήκες καλλιέργειας.
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα:
Τα κύτταρα KG-1 αναπτύσσονται σε εναιώρημα.
Πυκνότητα κυττάρων:
Η βέλτιστη κυτταρική πυκνότητα για την κυτταρική σειρά KG-1 είναι από 1 έως 3 x 105 κύτταρα/ml. Για την υποκαλλιέργεια, το κυτταρικό εναιώρημα μεταφέρεται σε αποστειρωμένο σωληνάριο και φυγοκεντρείται. Στη συνέχεια, στα συλλεχθέντα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο καλλιέργειας και ανασυσσωματώνονται προσεκτικά. Στη συνέχεια, τα κύτταρα μεταφέρονται σε νέες φιάλες και καλλιεργούνται σε βέλτιστη κυτταρική πυκνότητα. Τα κύτταρα μπορούν να διαχωριστούν όταν φτάσουν σε μέγιστη κυτταρική πυκνότητα 1 - 2 x 10⁶ κύτταρα/ml.
Μέσο ανάπτυξης:
IMDM (Τροποποιημένο Όρο Dulbecco του Iscove) που περιέχει 10% FBS, 4,5 g/L γλυκόζη, 4 mM L-γλουταμίνη, 1,0 mM πυρουβικό νάτριο και 3,0 g/L NaHCO₃ χρησιμοποιείται για την καλλιέργεια των κυττάρων KG-1. Το μέσο καλλιέργειας πρέπει να αντικαθίσταται μετά από τρεις ημέρες.
Συνθήκες ανάπτυξης:
Η κυτταρική σειρά KG1 AML καλλιεργείται σε υγραντικό επωαστήρα σε θερμοκρασία 37°C και με παροχή 5% CO2.
Αποθήκευση:
Τα κατεψυγμένα κύτταρα διατηρούνται στη φάση ατμών υγρού αζώτου ή σε θερμοκρασία κάτω των -150 °C σε ηλεκτρικό καταψύκτη εξαιρετικά χαμηλής θερμοκρασίας, προκειμένου να προστατευθεί η βιωσιμότητα των κυττάρων.
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο:
Το CM-1 ή το CM-ACF είναι κατάλληλο για την κατάψυξη των κυττάρων KG-1. Τα κύτταρα καταψύχονται χρησιμοποιώντας μια διαδικασία αργής κατάψυξης για την προστασία τους από τυχόν θερμικό σοκ. Αυτή η μέθοδος επιτρέπει μια σταδιακή πτώση της θερμοκρασίας κατά 1 °C ανά λεπτό.
Διαδικασία απόψυξης:
Τα κύτταρα αποψύχονται σε προθερμασμένο υδατόλουτρο στους 37 °C έως ότου απομείνει ένας μικρός σβώλος πάγου. Στα αποψυγμένα κύτταρα προστίθεται φρέσκο μέσο και φυγοκεντρίζονται για την απομάκρυνση των συστατικών του μέσου κατάψυξης. Το ίζημα των κυττάρων ανασυσσωματώνεται προσεκτικά και μεταφέρεται σε νέες φιάλες που περιέχουν μέσο ανάπτυξης.
Επίπεδο βιοασφάλειας:
Το εργαστήριο βιοασφάλειας επιπέδου 1 είναι απαραίτητο για τη διατήρηση των κυτταρικών καλλιεργειών KG-1.
Δημοσίευση: 2023 | Τελευταία αναθεώρηση: Μάιος 2026
- Κυτταρική σειρά KG-1: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
- Εφαρμογές των κυττάρων KG-1 στην έρευνα
- Δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα KG-1
- Πληροφορίες καλλιέργειας σχετικά με τη κυτταρική σειρά KG-1
- Γενικά χαρακτηριστικά και προέλευση της κυτταρικής σειράς KG-1
- 6. Πόροι για τη κυτταρική σειρά KG-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
- Συχνές ερωτήσεις
Κυτταρική σειρά KG-1: Πλεονεκτήματα και περιορισμοί
Όπως και άλλες κυτταρικές σειρές, η κυτταρική σειρά KG-1 της μυελοειδούς λευχαιμίας παρουσιάζει επίσης πολλά πλεονεκτήματα και περιορισμούς. Σε αυτή την ενότητα, θα εξετάσουμε μερικά από τα πιο σημαντικά, τα οποία μπορεί να είναι καθοριστικά για την απόφαση σχετικά με τη χρήση της στην έρευνά σας.
Πλεονεκτήματα
Τα κύρια πλεονεκτήματα των κυττάρων KG-1 είναι:
-
Ευκολία καλλιέργειας
Τα κύτταρα KG-1 καλλιεργούνται εύκολα σε ερευνητικά εργαστήρια, καθώς οι απαιτήσεις για την καλλιέργειά τους είναι απλές. Οι εύκολες συνθήκες συντήρησης και ανάπτυξής τους τα καθιστούν προσιτά σε ένα ευρύ φάσμα ερευνητών που διαθέτουν βασικές εγκαταστάσεις κυτταρικής καλλιέργειας.
-
Μοντέλο οξείας μυελογενούς λευχαιμίας (AML)
Προερχόμενη από έναν άνδρα ασθενή με οξεία μυελογενή λευχαιμία (AML), η κυτταρική σειρά KG-1 AML αποτελεί ένα πολύτιμο εργαλείο για τη μελέτη της βιολογίας της AML και τη διεξαγωγή έρευνας σχετικά με πιθανές θεραπείες, προσφέροντας πληροφορίες για τους υποκείμενους μηχανισμούς της νόσου και τις στρατηγικές θεραπείας.
Περιορισμοί
Οι περιορισμοί που σχετίζονται με τη κυτταρική σειρά KG1 είναι:
-
Μοντέλο in vitro
Τα κύτταρα KG-1 αποτελούν ένα πολύτιμο μοντέλο in vitro για την έρευνα σχετικά με την AML· ωστόσο, είναι σημαντικό να σημειωθεί ότι ενδέχεται να μην αναπαράγουν πλήρως την πολυπλοκότητα της νόσου in vivo, λειτουργώντας ως ένα απλοποιημένο κυτταρικό μοντέλο που ενδέχεται να μην καλύπτει όλες τις πτυχές της βιολογίας της AML.
Εφαρμογές των κυττάρων KG-1 στην έρευνα
Η σειρά KG-1 προσφέρει αρκετές ελπιδοφόρες εφαρμογές στη βιοϊατρική έρευνα. Μερικές από τις σημαντικές ερευνητικές εφαρμογές των μακροφάγων KG-1 περιλαμβάνουν:
- Έρευνα για τον καρκίνο: Τα κύτταρα KG-1 προήλθαν από έναν ασθενή με οξεία μυελογενή λευχαιμία και, ως εκ τούτου, θεωρούνται ένα πολύτιμο ερευνητικό εργαλείο για τη μελέτη της βιολογίας της AML. Οι ερευνητές χρησιμοποιούν αυτά τα κύτταρα για να μελετήσουν τους κυτταρικούς και μοριακούς μηχανισμούς που καθοδηγούν την ανάπτυξη, την εξάπλωση και την αντοχή στα φάρμακα της οξείας μυελογενούς λευχαιμίας. Αυτό περιλαμβάνει επίσης τον εντοπισμό και την ανακάλυψη νέων βιοδεικτών, γενετικών μεταλλάξεων και οδών σηματοδότησης που σχετίζονται με την οξεία μυελογενή λευχαιμία. Για παράδειγμα, μια μελέτη που διεξήχθη το 2019 διερεύνησε ότι το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA linc00239 διευκολύνει την αντοχή στη δοξορουβικίνη και την κακοήθη συμπεριφορά στα κύτταρα της οξείας μυελογενούς λευχαιμίας, KG-1. Περαιτέρω μελέτη αποκάλυψε ότι το lncRNA ενεργοποιεί τη σηματοδότηση PI3K/Akt/mTOR για να ασκήσει αυτές τις επιδράσεις στα κύτταρα της ΟΜΛ [2].
- Τοξικολογία: Η κυτταρική σειρά KG1 χρησιμοποιείται ευρέως στην τοξικολογική έρευνα. Οι ερευνητές εξετάζουν την τοξικότητα και την αποτελεσματικότητα πιθανών θεραπευτικών παραγόντων, συμπεριλαμβανομένων χημειοθεραπευτικών φαρμάκων και στοχευμένων θεραπειών, σε κύτταρα μυελοειδούς λευχαιμίας KG1, με σκοπό τον εντοπισμό υποσχόμενων υποψήφιων φαρμάκων για μελλοντικές προκλινικές και κλινικές αξιολογήσεις. Έρευνα που διεξήχθη το 2018 ανέλυσε την τοξικότητα των νανο-νιόσωμων που περιέχουν δοξορουβικίνη στη κυτταρική σειρά KG1 της οξείας μυελογενούς λευχαιμίας (AML). Η μελέτη πρότεινε ότι τα νανο-νιόσωμα αποτελούν κατάλληλο φορέα για τη χορήγηση φαρμάκων, καθώς ενισχύουν την αποτελεσματικότητα της θεραπείας [3]. Σε άλλη έρευνα, οι ερευνητές διερεύνησαν τις θεραπευτικές επιδράσεις του τσαγιού τσουκνίδας που παρασκευάστηκε από φύλλα του φυτού Urtica dioica. Η μελέτη αποκάλυψε ότι αυτό το υδατικό εκχύλισμα φύλλων του φυτού ασκεί αντικαρκινικές επιδράσεις σε κύτταρα οξείας μυελογενούς λευχαιμίας, KG-1 και U937 [4].
Δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα KG-1
Αυτή η ενότητα του άρθρου παραθέτει μερικές ενδιαφέρουσες ερευνητικές δημοσιεύσεις σχετικά με τα κύτταρα KG-1.
Η εργασία αυτή δημοσιεύθηκε στο Journal of Cellular Physiology (2019). Η μελέτη πρότεινε ότι η κουερσετίνη ευαισθητοποιεί τη κυτταρική σειρά KG1 της οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας έναντι του συνδέτη που προκαλεί απόπτωση σχετιζόμενου με τον TNF (TRAIL) και μπορεί να ενισχύσει την επίδραση της κυτταροτοξικότητας που προκαλείται από το TRAIL στα κύτταρα.
Αυτό το άρθρο στο «Tropical Journal of Pharmaceutical Research» (2022) πρότεινε ότι η υπορύθμιση του μεταγραφικού παράγοντα 8 τύπου krüppel (KLF8) καταστέλλει τον πολλαπλασιασμό των κυττάρων της οξείας μυελογενούς λευχαιμίας (AML) και τη γλυκόλυση, προωθώντας την απόπτωση μέσω της ρύθμισης της οδού σηματοδότησης AKT/mTOR.
Αυτή η μελέτη που δημοσιεύθηκε στο Cell Journal (Yakhteh) (2020) διερεύνησε τις πιθανές επιδράσεις του τριοξειδίου του αρσενικού και του σοραφενίμπ στα κύτταρα U937 και KG-1.
Η μελέτη αυτή, που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό Medical Oncology (2020), αξιολόγησε την OXPHOS και τη γλυκόλυση ως θεραπευτικούς στόχους στη κυτταρική σειρά της οξείας μυελογενούς λευχαιμίας (AML), KG-1.
Αυτή η δημοσίευση στο περιοδικό «Drug Design, Development, and Therapy» του 2020 πρότεινε ότι οι ενώσεις κουρκουμίνης και θαλιδομίδης ασκούν συνεργιστικά αποπτωτικά αποτελέσματα στα κύτταρα KG-1 μέσω της μείωσης της έκφρασης των STAT3 και Bcl-xL.
6. Πηγές για τη κυτταρική σειρά KG-1: Πρωτόκολλα, βίντεο και άλλα
Ακολουθούν μερικές διαδικτυακές πηγές σχετικά με τα κύτταρα KG-1.
- Υποκαλλιέργεια κυττάρων σε εναιώρημα: Αυτό το βίντεο περιγράφει το πρωτόκολλο για την υποκαλλιέργεια κυτταρικών καλλιεργειών σε εναιώρημα, όπως τα KG-1.
Ο παρακάτω σύνδεσμος περιέχει το πρωτόκολλο καλλιέργειας κυττάρων KG-1:
- Κυτταρική σειρά KG-1: Αυτός ο ιστότοπος περιέχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την καλλιέργεια της κυτταρικής σειράς KG-1. Περιλαμβάνει πληροφορίες σχετικά με τα μέσα καλλιέργειας της κυτταρικής σειράς, καθώς και πρωτόκολλα για την υποκαλλιέργεια και τον χειρισμό κρυοσυντηρημένων και πολλαπλασιαζόμενων καλλιεργειών.
Αναφορές
- Pelliccia, F., V. Ubertini και N. Bosco, Η σημασία της μοριακής κυτταρογενετικής ανάλυσης πριν από τη χρήση κυτταρικών σειρών στην έρευνα: Η περίπτωση της κυτταρικής σειράς λευχαιμίας KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): σ. 237-240.
- Yang, Y., et al., Το μακρύ μη κωδικοποιητικό RNA linc00239 προάγει κακοήθεις συμπεριφορές και χημειοαντοχή έναντι της δοξορουβικίνης, εν μέρει μέσω της ενεργοποίησης της οδού PI3K/Akt/mTOR σε κύτταρα οξείας μυελογενούς λευχαιμίας. Oncology Reports, 2019. 41(4): σ. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Παρασκευή και μελέτη νανο-νιοσωμάτων που περιέχουν δοξορουβικίνη και αξιολόγηση της τοξικότητάς τους στην κυτταρική σειρά KG-1 της οξείας μυελοβλαστικής λευχαιμίας. Payavard Salamat, 2018. 12(4): σ. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Το τσάι τσουκνίδας αναστέλλει την ανάπτυξη κυττάρων οξείας μυελοειδούς λευχαιμίας in vitro προωθώντας την απόπτωση. Nutrients, 2020. 12(9): σ. 2629.