Κύτταρα COS-1: Σε μελέτες γονιδιακής έκφρασης

Η κυτταρική σειρά COS-1 είναι ένα κύτταρο που μοιάζει με ινοβλάστες και προέρχεται από νεφρικό ιστό πιθήκου και χρησιμοποιείται συχνά από τους ερευνητές για τη διερεύνηση του ιού των πιθήκων, SV40. Αυτά τα κύτταρα διαμολύνεται εύκολα και χρησιμοποιούνται συχνά για τη δημιουργία ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών για διάφορα πειράματα βιοχημικής, μοριακής και κυτταρικής βιολογίας.

Αυτό το άρθρο θα παρέχει αναλυτικές λεπτομέρειες σχετικά με την κυτταρική σειρά COS-1, καλύπτοντας όλες τις βασικές πληροφορίες που χρειάζεστε. Συγκεκριμένα, θα αποκτήσετε γνώσεις σχετικά με τα εξής:

Κυτταρική σειρά COS-1: Γενικές πληροφορίες: Προέλευση και γενικές πληροφορίες.
Πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων COS-1
Ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων COS-1
Κύτταρα COS-1:
Πόροι για την κυτταρική σειρά COS-1, συμπεριλαμβανομένων πρωτοκόλλων, βίντεο και άλλων
Καλλιέργεια κυττάρων COS-1

1.κυτταρική σειρά COS-1: Προέλευση και γενικές πληροφορίες.

Πριν από την έναρξη οποιασδήποτε εργασίας με μια κυτταρική σειρά, είναι απαραίτητο να έχετε μια θεμελιώδη κατανόηση της ίδιας της κυτταρικής σειράς. Αυτό περιλαμβάνει πληροφορίες όπως η προέλευση των κυττάρων, ο τρόπος απομόνωσής τους και τα χαρακτηριστικά τους. Σε αυτή την ενότητα, θα εμβαθύνουμε στα βασικά στοιχεία των κυττάρων COS-1.

Τι είναι η κυτταρική σειρά COS-1

Η κυτταρική σειρά COS-1 περιλαμβάνει κύτταρα που μοιάζουν με ινοβλάστες και τα οποία ο J.W.F. Cowell και οι συνεργάτες του δημιούργησαν για πρώτη φορά το 1981. Τα κύτταρα αυτά δημιουργήθηκαν μετασχηματίζοντας μια πράσινη επιθηλιακή κυτταρική σειρά πιθήκων γνωστή ως CV-1 με μια μεταλλαγμένη μορφή του ιού SV40 των πιθήκων. Στη συνέχεια, η καθιερωμένη κυτταρική σειρά COS-1 χαρακτηρίστηκε διεξοδικά ώστε να αποκατασταθεί η περιοχή του γονιδιώματος του SV40 που είχε προηγουμένως διαγραφεί από την προέλευση της αντιγραφής. Τα κύτταρα αυτά εκφράζουν μεγάλα Τ αντιγόνα και άλλες πρωτεΐνες που είναι απαραίτητες για τη σωστή αντιγραφή κυκλικών γονιδιωμάτων, όπως τα πλασμίδια.

Chlorocebus aethiops (Αφρικανική πράσινη μαϊμού)

Τα κύτταρα COS-1 έχουν μορφολογία που μοιάζει με ινοβλάστες και προσκολλώνται σε επιφάνειες, εξαπλώνονται ως μονοστοιβάδα. Προς το παρόν δεν υπάρχουν γνωστές γενετικές παραλλαγές της κυτταρικής σειράς COS-1. Ωστόσο, μια συγγενής κυτταρική σειρά COS-7 προέρχεται επίσης από κύτταρα CV-1 και εμφανίζει παρόμοια χαρακτηριστικά.

2.πλεονεκτήματα και μειονεκτήματα των κυττάρων COS-1

Η κυτταρική σειρά COS-1 έχει μοναδικά πλεονεκτήματα και περιορισμούς, τα οποία θα συζητήσουμε παρακάτω.

Πλεονεκτήματα

Δυνατότητα διαμόλυνσης: Η κυτταρική σειρά COS-1 διαμολύνεται εύκολα με διάφορες μεθόδους, συμπεριλαμβανομένων φυσικών και χημικών προσεγγίσεων.
Παραγωγή Lentiviruses: Η κυτταρική σειρά COS-1 είναι κατάλληλος ξενιστής συσκευασίας για την παραγωγή υψηλής ποιότητας ανασυνδυασμένων σωματιδίων λεντιϊών χωρίς πρόσθετα στάδια καθαρισμού. Τα κύτταρα αυτά προσκολλώνται σταθερά σε πλαστικές επιφάνειες, γεγονός που αποτρέπει τη μόλυνση των υπερκειμένων διαμόλυνσης που περιέχουν ιικά σωματίδια [1].
Γονιδιακή έκφραση: Η κυτταρική σειρά COS-1 χρησιμοποιείται ευρέως για μελέτες ανάλυσης παροδικής και σταθερής έκφρασης, παράγοντας πολλές ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες μέσω διαμόλυνσης με κυκλικά πλασμίδια που περιέχουν την προέλευση αντιγραφής SV40 [2].

Περιορισμοί

Μη ανθρώπινη κυτταρική σειρά: Καθώς τα κύτταρα COS-1 προέρχονται από πρωτεύοντα θηλαστικά που δεν ανήκουν στον άνθρωπο, οι ανασυνδυασμένες πρωτεΐνες που παράγονται από αυτή την κυτταρική σειρά είναι κατάλληλες μόνο για εργαστηριακά πειράματα και δεν συνιστώνται για ανθρώπινη χρήση.

3.ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων COS-1

Μια από τις πιο κρίσιμες εκτιμήσεις όταν συζητείται μια κυτταρική σειρά είναι οι ερευνητικές εφαρμογές της. Η παρούσα ενότητα θα διερευνήσει τις σημαντικότερες ερευνητικές εφαρμογές των κυττάρων COS-1.

Παραγωγή ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών: Η κυτταρική σειρά COS-1 χρησιμοποιείται ευρέως για την παραγωγή ανασυνδυασμένων πρωτεϊνών μέσω παροδικής ή σταθερής διαμόλυνσης κυκλικών φορέων που περιέχουν την προέλευση αντιγραφής SV40. Σε μια πρόσφατη μελέτη, βιολόγοι χρησιμοποίησαν την κυτταρική σειρά COS-1 για την παραγωγή χοριακής γοναδοτροπίνης ιπποειδών, μιας ανασυνδυασμένης αναπαραγωγικής ορμόνης για αναπαραγωγικές εφαρμογές [3]. Παρομοίως, σε άλλη μελέτη χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα COS-1 για την παραγωγή ενός ανασυνδυασμένου μονοκλωνικού αντισώματος κοτόπουλου κατά ενός συγκεκριμένου τύπου ιού της γρίπης [4].
Παραγωγή σωματιδίων που μοιάζουν με ιό: Τα κύτταρα COS-1 χρησιμεύουν ως ξενιστές συσκευασίας για την παραγωγή λεντιϊών υψηλής ποιότητας και μπορούν να χρησιμοποιηθούν για τη δημιουργία ιικών εμβολίων. Σε μια μελέτη χρησιμοποιήθηκε η κυτταρική σειρά COS-1 για την παραγωγή μη μολυσματικών αλλά εξαιρετικά ανοσογόνων σωματιδίων που μοιάζουν με τον ιό του δάγκειου πυρετού, τα οποία είναι αποτελεσματικά υποψήφια εμβόλια [5].

430,00 €*

Περιεχόμενο: 1.5 milliliter

Τιμές χωρίς φόρους συν έξοδα αποστολής

cryovial

Αριθμός προϊόντος: 305005

4.κύτταρα COS-1: Δημοσιεύσεις

Ορισμένες αξιοσημείωτες δημοσιεύσεις για τα κύτταρα COS-1 είναι: COS-1 cells:

Παραγωγή και καθαρισμός σωματιδίων που μοιάζουν με τον ιό του δάγκειου πυρετού από κύτταρα COS-1: Η δημοσίευση αυτή στο Bio-Protocol εξηγεί τη χρήση των κυττάρων COS-1 για την παραγωγή υψηλής ανοσογονικότητας σωματιδίων που μοιάζουν με τον ιό του δάγκειου πυρετού.
Ανάλυση έκφρασης ανασυνδυασμένης χοριακής γοναδοτροπίνης του ιπποειδούς σε τρία συστήματα ξενιστών - E. coli BL21C, λύσμα κυττάρων εντόμων Sf και κύτταρα θηλαστικών COS-1: Σε αυτή τη μελέτη, οι ερευνητές συνέκριναν την παραγωγή και τη μετα-μεταφραστική τροποποίηση μιας ανασυνδυασμένης αναπαραγωγικής ορμόνης π.χ. της χοριακής γοναδοτροπίνης του ιπποειδούς σε διαφορετικά συστήματα έκφρασης, συμπεριλαμβανομένων των κυττάρων θηλαστικών COS-1.
Διερεύνηση σωματιδίων που μοιάζουν με φλαβιϊκά σωματίδια που μεταδίδονται από τσιμπούρια ως σύστημα μεταφοράς για γονιδιακή θεραπεία: Η μελέτη αυτή χρησιμοποίησε κύτταρα COS-1 για την παραγωγή σωματιδίων που μοιάζουν με σωματίδια του ιού της εγκεφαλίτιδας που μεταδίδεται από τσιμπούρια (TBEV). Τα σωματίδια αυτά προτείνονται ως άκατος μεταφοράς των απαιτούμενων αντιγράφων (δηλαδή θεραπευτικών γονιδίων).
Παραγωγή ανασυνδυασμένου μονοκλωνικού αντισώματος από κοτόπουλο έναντι της νευραμινιδάσης του ιού της γρίπης των πτηνών H9N2: Στο άρθρο αυτό που δημοσιεύθηκε στο περιοδικό AMB Express χρησιμοποιήθηκαν κύτταρα COS-1 για την παραγωγή ανασυνδυασμένων κοτοποιημένων μονοκλωνικών αντισωμάτων έναντι της νευραμινιδάσης του ιού της γρίπης των πτηνών τύπου H9N2.
Διαλυτοποίηση χωρίς απορρυπαντικά ανθρώπινων διαύλων Kv που εκφράζονται σε κύτταρα θηλαστικών: Στην παρούσα μελέτη, η σειρά κυττάρων θηλαστικών COS-1 χρησιμοποιήθηκε για την έκφραση ανθρώπινων διαύλων Kv για τη διεξαγωγή ορισμένων πειραμάτων διαλυτοποίησης.

Κύτταρα COS-1 σε υψηλή και χαμηλή πληρότητα

5.πηγές για την κυτταρική σειρά COS-1, συμπεριλαμβανομένων πρωτοκόλλων, βίντεο και άλλα

Πρωτόκολλα καλλιέργειας κυττάρων

Καλλιέργεια κυττάρων COS-1: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει πολύτιμες πληροφορίες σχετικά με τη διάσπαση, την κατάψυξη και την απόψυξη των κυττάρων COS-1.
Κύτταρα COS-1: Αυτός ο σύνδεσμος περιέχει βασικές πληροφορίες σχετικά με την κυτταρική σειρά COS-1.

Πρωτόκολλα διαμόλυνσης

Ακολουθούν ορισμένες πηγές που περιγράφουν τη μέθοδο διαμόλυνσης για τα κύτταρα COS-1.

Μεταβατική διαμόλυνση των κυττάρων COS-1: Αυτό το έγγραφο αποτελείται από ένα πρωτόκολλο για την παροδική διαμόλυνση της κυτταρικής σειράς COS-1.

Βίντεο σχετικά με την κυτταρική σειρά COS-1

Οι ακόλουθες πηγές βίντεο μπορούν να βοηθήσουν στην απόκτηση γενικών πληροφοριών σχετικά με την καλλιέργεια, τη συντήρηση και τη διαμόλυνση των κυττάρων COS-1.

Πέρασμα κυττάρων: Αυτό το βίντεο εξετάζει βασικές πρακτικές καλλιέργειας για κυτταρικές σειρές θηλαστικών.
Κατάψυξη προσκολλημένων κυττάρων: Αυτό το βίντεο περιέχει πληροφορίες για την κατάψυξη προσκολλημένων κυτταρικών σειρών.
Πρωτόκολλο διαμόλυνσης: Αυτό το βίντεο παρουσιάζει μια διαδικασία για τη διαμόλυνση κυττάρων θηλαστικών.

6.καλλιέργεια κυττάρων COS-1

Χαρακτηριστικό	Πληροφορίες
Χρόνος διπλασιασμού	Περίπου 48 ώρες
Προσκολλημένα ή σε εναιώρημα	Προσκολλάται και αναπτύσσεται ως μονοστρωματικό στρώμα στην επιφάνεια της φιάλης καλλιέργειας
Πυκνότητα σποράς	2 έως 4 x 10^4 κύτταρα/cm²- τα προσκολλημένα κύτταρα πλένονται με 1x PBS, υποβάλλονται σε επεξεργασία με Accutase, φυγοκεντρίζονται, ανασυσσωματώνονται και διανέμονται σε νέα φιάλη
Μέσο ανάπτυξης	Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) που περιέχει 10% FBS- το μέσο πρέπει να αντικαθίσταται 2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Συνθήκες ανάπτυξης (θερμοκρασία, CO2)	Απαιτείται υγροποιημένος επωαστήρας με 5% CO2 και θερμοκρασία 37°C
Αποθήκευση	Κάτω από θερμοκρασία -150°C σε φάση ατμών υγρού αζώτου
Διαδικασία κατάψυξης και μέσο	Μέθοδος αργής κατάψυξης με μείωση της θερμοκρασίας μόνο κατά 1 °C με χρήση μέσων CM-1 ή CM-ACF
Διαδικασία απόψυξης	Απόψυξη των κατεψυγμένων κυττάρων με επώαση σε υδατόλουτρο ρυθμισμένο στους 37°C για 40-60 δευτερόλεπτα με ταχεία ανάδευση. Φυγοκεντρήστε τα κύτταρα για να απομακρύνετε το μέσο κατάψυξης, ανασυσσωματώστε το σφαιρίδιο και διανείμετε σε φιάλη καλλιέργειας με φρέσκο μέσο. Η προσκόλληση διαρκεί περίπου 24 ώρες.
Επίπεδο βιοασφάλειας	Συνιστάται το επίπεδο βιοασφάλειας 1 για το χειρισμό των κυττάρων COS-1

Ελπίζουμε ότι αυτό το άρθρο παρείχε αρκετές πληροφορίες που θα σας βοηθήσουν να ξεκινήσετε να εργάζεστε με κύτταρα COS-1. Παρακαλούμε να παραγγείλετε από εμάς εάν θέλετε να χρησιμοποιήσετε αυτή τη σειρά κυττάρων για την ερευνητική σας μελέτη.

Αναφορές

Smith, S.L. and T. Shioda, Advantages of COS-1 monkey kidney epithelial cells as packaging host for small-volume production of high-quality recombinant lentiviruses. Journal of virological methods, 2009. 157(1): p. 47-54.
MacKenzie, C.J. and T. Shioda, COS-1Cells as Packaging Host for Production of Lentiviruses. Current protocols in cell biology, 2011. 50(1): p. 26.7. 1-26.7. 15.
Bhardwaj, A., et al., Expression analysis of recombinant equine chorionic gonadotropin in three host systems: E. coli BL21C, λυμένο κύτταρο εντόμου Sf και κύτταρα θηλαστικών COS-1. Indian Journal of Animal Research, 2021. 55(1): p. 40-45.
Wang, F., et al., Generation of a recombinant chickenized monoclonal antibody against the neuraminidase of H9N2 avian influenza virus. AMB Express, 2020. 10: p. 1-7.
Galula, J.U., G.-J.J. Chang και D.-Y. Chao, Production and Purification of Dengue Virus-like Particles from COS-1 Cells. Bio-protocol, 2019. 9(12): p. e3280-e3280.