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Zellkulturmedium

Zellkulturen erfordern eine sorgfältige Kontrolle der Umweltbedingungen für ein erfolgreiches Wachstum und die Erhaltung der Zellen. Ein umfassender Ansatz beinhaltet die Gewährleistung von Sterilität, Nährstoffversorgung, pH-Stabilität und Temperaturkontrolle.

Sterile Bedingungen und Nährstoffversorgung

Um Verunreinigungen zu vermeiden und die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten, ist eine sterile Umgebung von entscheidender Bedeutung. Dies wird in der Regel durch aseptische Techniken und spezielle Geräte wie Laminar-Flow-Hauben erreicht. Die Nährstoffversorgung erfolgt über Kulturmedien, die eine Mischung aus wesentlichen Bestandteilen enthalten, darunter:

  • Anorganische Salze: Wichtig für die Aufrechterhaltung des osmotischen Gleichgewichts und die Bereitstellung der für die zellulären Aktivitäten erforderlichen Ionen.
  • Kohlenhydrate: Dienen als Energiequellen; Glukose ist der am häufigsten verwendete Zucker.
  • Aminosäuren: Die Bausteine der Proteine; einige sind essenziell und können von den Zellen nicht synthetisiert werden.
  • Vitamine: Dienen als Kofaktoren für enzymatische Reaktionen; B-Vitamine sind für den Zellstoffwechsel unerlässlich.
  • Fettsäuren und Lipide: Wesentliche Bestandteile für die Integrität und Funktion der Zellmembran.
  • Proteine und Peptide: In serumfreien Medien ersetzen sie die Wachstumsfaktoren und Bindungsproteine, die normalerweise durch das Serum geliefert werden.
  • Serum: Wird häufig als Quelle für Wachstumsfaktoren verwendet, obwohl serumfreie Alternativen immer beliebter werden, um die Variabilität und das Kontaminationsrisiko zu verringern.
  • pH- und Temperaturstabilität: Für ein optimales Wachstum benötigen Zellen in der Regel einen pH-Bereich von 7,2-7,4. Dieser wird durch Puffersysteme reguliert, die entweder auf CO2/Bikarbonat basieren oder chemisch durch Mittel wie HEPES erreicht werden. Die Temperatur wird bei 37°C gehalten, um physiologische Bedingungen zu imitieren.

Medienvarianten und Optimierung

Im Laufe der Jahre wurden verschiedene Basalmedien entwickelt, die auf bestimmte Zelltypen abgestimmt sind:

  • Ausgewogene Salzlösungen: Sie bilden die Grundlage für komplexere Medienformulierungen.
  • Basale Medien, wie Minimum Essential Medium (MEM), werden für Primärkulturen und diploide Zellen verwendet.
  • Komplexe Medien: Wie RPMI 1640 sind sie für ein breiteres Spektrum von Säugetierzellen geeignet.
  • Serumfreie Medien: Sie sind auf spezifische Anwendungen zugeschnitten und verringern das Risiko einer Kontamination durch von Tieren stammende Komponenten.

Medienzubereitung und Qualitätskontrolle

Medien können intern aus wesentlichen Bestandteilen hergestellt oder als fertige Lösungen gekauft werden. Bei der Qualitätskontrolle muss sichergestellt werden, dass keine Verunreinigungen vorhanden sind und die Inhaltsstoffe in der richtigen Konzentration vorliegen. Für die Rekonstitution pulverförmiger Medien wird hochwertiges Wasser benötigt, und die zubereiteten Medien müssen sterilisiert werden, in der Regel durch Filtration.

Verwendung von Serum und Sicherheitshinweise

Die Verwendung von Serum, insbesondere von fötalem Rinderserum (FBS), ist wegen seines hohen Gehalts an Wachstumsfaktoren üblich. Aufgrund der Besorgnis über Krankheiten wie BSE werden jedoch strenge Test- und Beschaffungsprotokolle eingehalten, um die Sicherheit zu gewährleisten.

Regulatorische Richtlinien und Trends

Es gibt Richtlinien für die Verwendung von Materialien tierischen Ursprungs in Kulturen, die die Bedeutung von Beschaffung und Tests betonen. Der Trend, solche Materialien nach Möglichkeit zu vermeiden, spiegelt sich in der Entwicklung von serumfreien und tierfreien Medienalternativen wider.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Zellkulturmedien eine grundlegende Rolle für das Wachstum und die Erhaltung von Zellen in vitro spielen. Jede Komponente wird sorgfältig ausgewählt und optimiert, um die in vivo-Umgebung nachzuahmen und sicherzustellen, dass die Zellen Wachstums-, Überlebens- und Funktionsbedingungen vorfinden.

DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat
DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) ist ein äußerst vielseitiges und weit verbreitetes Basismedium, das für das Wachstum einer Vielzahl von Säugetierzellen in der biologischen Forschung entwickelt wurde. Es dient als ideales Medium für die Kultivierung von primären Fibroblasten, Neuronen, Gliazellen, HUVECs, glatten Muskelzellen sowie beliebten Zelllinien wie HeLa, 293, Cos-7 und PC-12.
Was DMEM von anderen Medien unterscheidet, ist seine einzigartige Zusammensetzung. Es enthält eine beeindruckende Vervierfachung der Aminosäure
- und Vitaminkonzentration im Vergleich zum ursprünglichen Eagle's Minimal Essential Medium. Ursprünglich mit niedrigem Glukosegehalt (1 g/L) und Natriumpyruvat entwickelt, wird DMEM häufig mit höherem Glukosegehalt verwendet, entweder mit oder ohne Natriumpyruvat. DMEM enthält keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren, so dass eine Ergänzung erforderlich ist. Um ein optimales Wachstum zu erreichen, wird DMEM häufig mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt. Außerdem enthält DMEM ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (3,7 g/L), das zur Aufrechterhaltung eines physiologischen pH-Werts eine 5-10%ige CO2-Umgebung erfordert.
Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ist ein hoch angesehenes Medium für die Zell
- und Gewebekultur, das den Wachstumsanforderungen verschiedener adhärenter Zellphänotypen gerecht wird. Es übertrifft das ursprüngliche Eagle's Medium, das in den 1950er Jahren für die Kultivierung von Hühnerzellen entwickelt wurde, durch eine verbesserte ergänzende Formulierung, die als Dulbecco's Modifikation bekannt ist. Diese Modifikation erhöht den Gehalt an ausgewählten Aminosäuren und Vitaminen im Vergleich zum Originalmedium um das bis zu Vierfache.
Im Bereich der Zellkultur spielt DMEM eine wichtige Rolle als Wachstumsmedium für verschiedene Zelltypen, darunter Primärzellen, Stammzellen und transformierte Zellen. Forscher setzen die modifizierte Version von DMEM auch für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen ein, z. B. in der Arzneimittelforschung, im Tissue Engineering und bei der Untersuchung von Zellsignalwegen.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab dem Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid, wasserfrei
200,00



Eisen(III)-nitrat x 9H2O
0,10



Magnesiumsulfat, wasserfrei
97,66



Kaliumchlorid
400,00



Natriumchlorid
6.400,00



Natriumdihydrogenphosphatwasserfrei
108,69


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
4.500,00



Natriumpyruvat
110,00



Rotes Phenol
15,00



NaHCO3
1.500,00


Aminosäuren
L-Arginin x HCl
84,00



L-Cystin x 2HCl
62,58



L-Glutamin
584,00



Glycin
30,00



L-Histidin x HCl xH2O
42,00



L-Isoleucin
104,80



L-Leucin
104,80



L-Lysin x HCl
146,20



L-Methionin
30,00



L-Phenylalanin
66,00



L-Serin
42,00



L-Threonin
95,20



L-Tryptophan
16,00



L-Tyrosin x Na
103,79



L-Valin
93,60


Vitamine
D-Calciumpantothenat
4,00



Cholinchlorid
4,00



Folsäure
4,00



myo-Inositol
7,00



Nicotinamid
4,00



Pyridoxin x HCl
4,00



Riboflavin
0,40



Thiamin x HCl
4,00

25,00 €*
RPMI 1640, w: 4,5 g/L Glucose, w: 2 mM L-Glutamin, w: 10 mM HEPES, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: 1,5 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, auch bekannt als RPMI-Medium, ist ein äußerst vielseitiges Zellkulturmedium, das in der biologischen Forschung zur Kultivierung verschiedener Säugetierzellen verwendet wird. Dieses Medium wurde 1966 von George E. Moore, Robert E. Gerner und H. Addison Franklin am renommierten Roswell Park Comprehensive Cancer Center entwickelt und hat seinen Namen von seinem Ursprung am Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Ursprünglich für das Wachstum menschlicher Leukämiezellen in Suspensions
- und Monolayer-Kulturen konzipiert, hat sich RPMI 1640 Medium durch Modifikationen von Forschern und kommerziellen Anbietern weiterentwickelt und ist heute für eine Vielzahl von Säugetierzellen geeignet. Es ist außergewöhnlich kompatibel mit Zelllinien wie HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, Astrozyten und Karzinomen.
RPMI 1640 Medium hebt sich von anderen Zellkulturmedien durch seine einzigartige Zusammensetzung ab. Es enthält eine erhebliche Menge an Phosphat, Aminosäuren und Vitaminen. Insbesondere enthält es Biotin, Vitamin B12 und PABA, die in Eagle's Minimal Essential Medium oder Dulbecco's Modified Eagle Medium nicht vorhanden sind. Darüber hinaus weist RPMI 1640 Medium deutlich erhöhte Konzentrationen der Vitamine Inositol und Cholin auf. Es enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher ist in der Regel eine Ergänzung mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, um optimale Bedingungen für das Zellwachstum zu schaffen.
Das Puffersystem von RPMI 1640 Medium basiert auf Natriumbicarbonat (2,0 g/L) und erfordert eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch angemessenen pH-Wert zu erhalten. Die Zugabe des Reduktionsmittels Glutathion unterscheidet dieses Medium weiter von anderen.
Dieses RPMI 1640-Medium enthält 4,5 Gramm Glukose pro Liter.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Kalziumnitrat x 4H2O
100,00



Magnesiumsulfat wasserfrei
48,83



Kaliumchlorid
400,00



Natriumchlorid
5450,00



di-Natriumhydrogenphosphat
800,49


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
4500,00



Glutathion (red.)
1,00



HEPES
2383,00



Phenol rot
5,00



Natriumpyruvat
110,00


Aminosäuren
L-Arginin x HCl
241,86



L-Asparagin x H2O
56,82



L-Asparaginsäure
20,00



L-Cystin x 2HCl
65,19



L-Glutamin
300,00



L-Glutaminsäure
20,00



Glycin
10,00



L-Histidin x HCl x H2O
20,27



L-Hydroxyprolin
20,00



L-Isoleucin
50,00



L-Leucin
50,00



L-Lysin x HCl
40,00



L-Methionin
15,00



L-Phenylalanin
15,00



L-Prolin
20,00



L-Serin
30,00



L-Threonin
20,00



L-Tryptophan
5,00



L-Tyrosin x 2Na
28,83



L-Valin
20,00


Vitamine
p-Aminobenzoesäure
1,00



D-(+)-Biotin
0,20



D-Calciumpantothenat
0,25



Cholinchlorid
3,00



Folsäure
1,00



myo-Inositol
35,00



Nicotinamid
1,00



Pyridoxin x HCl
1,00



Riboflavin
0,20



Thiamin x HCl
1,00



Vitamin B12
0,01



NaHCO3
1500,00

25,00 €*
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 1,5 g/L NaHCO3, w: EBSS, w: 1 mM Natriumpyruvat, w: NEAA
Eines der am häufigsten verwendeten synthetischen Zellkulturmedien ist das Minimum Essential Medium Eagle (MEM). Dieses von Harry Eagle entwickelte Medium wurde erstmals 1959 eingeführt und ist seitdem eine beliebte Wahl für verschiedene Zelltypen, die in Monolayern und adhärenten Zelllinien gezüchtet werden.
Dieses EMEM-Medium besteht aus 2 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, EBSS, 1 mM Natriumpyruvat und NEAA.
Was ist in EMEM enthalten?
EMEM ist eine modifizierte Version von Eagle's Minimum Essential Medium und enthält Earle's Balanced Salt Solution, nicht essentielle Aminosäuren, L-Glutamin, Natriumpyruvat und Natriumbicarbonat. Es ist wichtig zu beachten, dass dieser reduzierte Gehalt an Natriumbicarbonat (NaHCO3, 1,5 g/L) für die Verwendung bei 5 % CO2 in der Luft vorgesehen ist. Um seine Wirksamkeit zu erhalten, wird empfohlen, das Medium bei 2 °C bis 8 °C im Dunkeln zu lagern, wenn es nicht verwendet wird.
Wozu wird EMEM verwendet?
Eagle's minimal essential medium (EMEM) ist ein Zellkulturmedium, das Zellen in Gewebekulturen erhalten kann. Das Medium enthält höhere Konzentrationen von Aminosäuren, was eine genauere Annäherung an die Proteinzusammensetzung kultivierter Säugetierzellen ermöglicht. EMEM kann zur Kultivierung verschiedener Zellen verwendet werden, darunter Fibroblasten, menschliche Leberkrebszellen (HepG2) und Astrozytenzellen aus fötalen Gehirnvorläuferzellen (PDA). Es wird in der Regel in Gegenwart von fötalem Rinderserum (FBS), Kalbs
- oder Pferdeserum verwendet.
Wie unterscheidet sich EMEM von anderen Zellkulturmedien?
EMEM und Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) haben zwar einige Gemeinsamkeiten, unterscheiden sich aber auch. Beide Medien sind proteinarm und enthalten die Aminosäuren, Salze, Glukose und Vitamine, die erforderlich sind, um eine Zelle mit Energie zu versorgen und sie in der Gewebekultur zu erhalten. Die DMEM-Formulierung ist jedoch so modifiziert, dass sie bis zu viermal mehr Vitamine und Aminosäuren und zwei
- bis viermal mehr Glukose enthält als EMEM. Es sei darauf hingewiesen, dass sich EMEM auch von der ursprünglichen MEM-Formulierung unterscheidet.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab dem Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2H2O
264,92



Magnesium-Sulfat
97,67



Kaliumchlorid
400,00



Natriumchlorid
6,800.00



Natriumdihydrogenphosphat x H2O
140,00


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose
1,000.00



Phenolrot
10,00



Natriumpyruvat
110,00



NaHCO3
1,500.00


Aminosäuren
L-Alanin
8,90



L-Arginin x HCl
126,00



L-Asparagin x H2O
13,20



L-Asparaginsäure
13,30



L-Cystin
24,00



L-Glutamin
292,30



L-Glutaminsäure
14,70



Glycin
7,50



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucin
52,00



L-Leucin
52,00



L-Lysin x HCl
72,50



L-Methionin
15,00



L-Phenylalanin
32,00



L-Prolin
11,50



L-Serin
10,50



L-Threonin
48,00



L-Tryptophan
10,00



L-Tyrosin
36,00



L-Valin
46,00


Vitamine
D-Calciumpantothenat
1,00



Cholinchlorid
1,00



Folsäure
1,00



myo-Inositol
2,00



Nicotinamid
1,00



Pyridoxal x HCl
1,00



Riboflavin
0,10



Thiamin x HCl
1,00

25,00 €*
Ham's F12 Medium, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,176 g/L NaHCO3
Ham's F-12 Medium, auch bekannt als Ham's F-12 Nutrient Mix, ist ein weit verbreitetes Basalmedium, das speziell für die Zellkultur entwickelt wurde. Es wurde ausgiebig für die serumfreie Ausplattierung von Zellen des chinesischen Hamster-Eierstocks (CHO), Lungenzellen und Maus-L-Zellen verwendet. Außerdem ist Ham's F-12 das Medium der Wahl für einen klonalen Toxizitätsassay (CTA).
Einer seiner bemerkenswerten Vorteile ist die Fähigkeit, das Zellwachstum zu unterstützen, ohne dass eine Supplementierung mit Serum erforderlich ist. Dadurch werden potenzielle Interferenzen durch Serumkomponenten vermieden und konsistente und zuverlässige Versuchsergebnisse gewährleistet. Durch die Bereitstellung einer serumfreien Kulturumgebung bietet Ham's F-12 Medium den Forschern eine größere Kontrolle über ihre Untersuchungen.
Ein weiteres wichtiges Merkmal von Ham's F-12 Medium ist seine Eignung für die Ausplattierung einzelner Zellen. Dies macht es zu einer hervorragenden Wahl für eine Vielzahl von Zelllinien, einschließlich CHO-Zellen, Lungenzellen und Maus-L-Zellen. Die optimierte Nährstoffzusammensetzung des Mediums erleichtert die effiziente Anheftung und das Wachstum einzelner Zellen und ermöglicht die Etablierung homogener Zellkulturen mit verbesserter Reproduzierbarkeit.
Darüber hinaus hat sich Ham's F-12 Medium als das bevorzugte Medium für den Clonal Toxicity Assay (CTA) durchgesetzt. Dieser Assay spielt eine entscheidende Rolle bei der Bewertung der zytotoxischen Wirkung von Substanzen auf Zellen. Durch die Verwendung von Ham's F-12 Medium im CTA können Forscher die Auswirkungen verschiedener Substanzen oder Behandlungen auf einzelne Zellen genau bewerten und so wertvolle Erkenntnisse über toxikologische Profile gewinnen.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab dem Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2H2O
44,00



Kupfer(II)-sulfat x 5H2O
0,00



Eisen(II)-sulfat x 7H2O
0,83



Magnesiumchlorid x 6H2O
122,00



Kaliumchlorid
223,65



Natriumchlorid
7599,00



di-Natriumhydrogenphosphatwasserfrei
142,04



Zinksulfat x 7H2O
0,86


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
1801,60



Hypoxanthin
4,08



Linolsäure
0,08



DL-α-Liponsäure
0,21



Rotes Phenol
1,20



Putrescin x 2HCl
0,16



Natriumpyruvat
110,00



Thymidin
0,73



NaHCO3
1176,00


Aminosäuren
L-Alanin
8,91



L-Arginin x HCl
210,70



L-Asparagin x H2O
15,01



L-Asparaginsäure
13,31



L-Cystein x HCl x H2O
35,12



L-Alanyl-L-Glutamin
217,30



L-Glutaminsäure
14,71



Glycin
7,51



L-Histidin x HCl x H2O
20,96



L-Isoleucin
3,94



L-Leucin
13,12



L-Lysin x HCl
36,54



L-Methionin
4,48



L-Phenylalanin
4,96



L-Prolin
34,53



L-Serin
10,51



L-Threonin
11,91



L-Tryptophan
2,04



L-Tyrosin
5,44



L-Valin
11,71


Vitamine
D(+)-Biotin
0,01



D-Calciumpantothenat
0,24



Cholinchlorid
13,96



Folsäure
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamid
0,04



Pyridoxin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Thiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

25,00 €*
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 1,6 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham's F12 ist ein weithin anerkanntes und häufig verwendetes Basismedium in der Zellkultur für die biologische Forschung. Es dient als grundlegende Nährstoffquelle für das Wachstum verschiedener Säugetierzelllinien, insbesondere wenn es mit Fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt wird.

Diese einzigartige Formulierung kombiniert Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) und Ham's F-12 (Ham's Nutrient Mixture F-12) in einem präzisen 1:1-Verhältnis. Durch den Zusatz von L-Glutamin wird die Zusammensetzung weiter verbessert.

DMEM, das von Eagle's Minimal Essential Medium (EMEM) abgeleitet ist, bietet im Vergleich zu seinem Vorgänger eine erhöhte Konzentration an Aminosäuren und Vitaminen. Im Gegensatz dazu basiert Ham's F-12 auf dem Medium Ham's F-10 und bietet eine ergänzende Reihe von essentiellen Komponenten.

Um ein optimales Zellwachstum zu unterstützen, ist es üblich, DMEM:Ham's F12 mit FBS in einer typischen Konzentration von 5-10 % zu ergänzen. Dieser Zusatz ist notwendig, da dem Medium Wachstumshormone, Lipide und Proteine fehlen, die für die zelluläre Entwicklung entscheidend sind.

DMEM:Ham's F12 enthält ein pH-Puffersystem und wird häufig mit Phenolrot, einem pH-Indikator, ergänzt. In DMEM:Ham's F12 kultivierte Zellen oder andere Medien, die das Bicarbonat-Puffersystem verwenden, benötigen eine kontrollierte CO2-Umgebung von 5-10 %, um einen angemessenen pH-Wert aufrechtzuerhalten. Phenolrot ermöglicht die Überwachung von pH-Änderungen von 6,2 (gelb) bis 8,2 (rot).
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Sowohl das Einfrieren als auch das Erwärmen auf bis zu +37°C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab dem Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2H2O
154,45



Eisen(III)-nitrat x 9H2O
0,05



Eisen(II)-sulfat x 7H2O
0,42



Kaliumchlorid
311,83



Kupfer(II)-sulfat x 5H2O
0.001



Magnesiumchlorid, wasserfrei
28,57



Magnesiumsulfat
48,85



Natriumchlorid
6,999.50



Natriumdihydrogenphosphat, wasserfrei
54,35



di-Natriumhydrogenphosphat
70,98



Zinksulfat x 7H2O
0,43


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
3,151.00



HEPES
3,574.50



Hypoxanthin
2,04



Linolsäure
0,04



DL-68-Liponsäure
0.103



Natriumpyruvat
110,00



Phenolrot
8,10



Putrescin x 2HCl
0.081



Thymidin
0,36


Aminosäuren
L-Alanin
4,45



L-Arginin x HCl
147,35



L-Asparagin x H2O
7,50



L-Asparaginsäure
6,65



L-Cystin x 2HCl
31,29



L-Cystein x HCl x H2O
17,56



L-Glutamin
365,00



L-Glutaminsäure
7,35



Glycin
18,75



L-Histidin x HCl x H2O
31,48



L-Isoleucin
54,37



L-Leucin
58,96



L-Lysin x HCl
91,37



L-Methionin
17,24



L-Phenylalanin
35,48



L-Prolin
17,27



L-Serin
26,25



L-Threonin
53,55



L-Tryptophan
9,02



L-Tyrosin x 2Na x 2H2O
55,81



L-Valin
52,66


Vitamine
D-(+)-Biotin
0,004



D-Calciumpantothenat
2,12



Cholinchlorid
8,98



Folsäure
2,66



myo-Inositol
12,51



Nicotinamid
2,02



Pyridoxin x HCl
2,03



Riboflavin
0,22



Thiamin x HCl
2,17



Vitamin B12
0,68



NaHCO3
1,200.00

25,00 €*
Ham's F12K Medium, w: 2,0 mM L-Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,5 g/L NaHCO3
Wir stellen das Ham's F-12K (Kaighn's) Medium vor, eine spezielle Modifikation des Ham's F-12 Mediums, die für die besonderen Anforderungen der biologischen Forschung entwickelt wurde. Dieses fortschrittliche Medium bietet eindeutige Vorteile und verbessert die Kultivierung von primären menschlichen Hepatozyten sowie von Ratten
- und Hühnerleberzellen, insbesondere unter serumreduzierten Bedingungen.

Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ist sorgfältig formuliert, um die Zellkulturbedingungen zu optimieren. Es zeichnet sich durch eine angereicherte Zusammensetzung aus, die einen erhöhten Gehalt an essenziellen Komponenten wie Aminosäuren und Natriumpyruvat sowie zusätzliche Elemente wie Putrescin, Thymidin, Hypoxanthin und Zink enthält. Diese Zusätze ermöglichen es den Forschern, das Medium mit einem Minimum an Serum oder definierten Komponenten für bestimmte Zelltypen zu ergänzen und so präzise Versuchsbedingungen zu schaffen.

Insbesondere enthält Ham's F-12K (Kaighn's) Medium keine Proteine oder Wachstumsfaktoren. Daher ist häufig eine Ergänzung mit Wachstumsfaktoren und fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, so dass die Forscher das Medium an die Anforderungen ihrer spezifischen Zelllinien anpassen können. Um eine optimale Leistung zu erzielen, muss die FBS-Konzentration für jede Zelllinie sorgfältig optimiert werden, um optimales Wachstum und Funktionalität zu gewährleisten.

Um den physiologischen pH-Wert aufrechtzuerhalten, verwendet das Ham's F-12K (Kaighn's) Medium ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (2,5 g/L), das während der Kultivierung eine kontrollierte 5-10%ige CO2-Umgebung erfordert. Dadurch wird sichergestellt, dass der pH-Wert des Mediums innerhalb des idealen Bereichs für das Wachstum und die Lebensfähigkeit der Zellen bleibt
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Sowohl das Einfrieren als auch das Erwärmen auf bis zu +37°C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37°C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Mit Ausnahme des Basismediums ist jedes Medium 8 Wochen ab Herstellungsdatum haltbar.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2H2O
135,24



Kupfer(II)-sulfat x 5H2O
0,00



Eisen(II)-sulfat x 7H2O
0,83



Magnesiumchlorid x 6H2O
105,72



Magnesiumsulfat x 7H2O
394,49



Kaliumchlorid
283,29



Kaliumdihydrogenphosphat
58,52



Natriumchlorid
7597,20



di-Natriumhydrogenphosphatwasserfrei
115,02



Zinksulfat x 7H2O
0,14


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
1260,00



Hypoxanthin
4,08



DL-α-Liponsäure
0,21



Rotes Phenol
3,00



Putrescin x 2HCl
0,32



Natriumpyruvat
220,00



NaHCO3
2500,00



Thymidin
0,73


Aminosäuren
L-Alanin
17,82



L-Arginin x HCl
421,40



L-Asparagin x H2O
30,02



L-Asparaginsäure
26,62



L-Cystein x HCl x H2O
70,24



L-Glutamin
292,20



L-Glutaminsäure
29,42



Glycin
15,01



L-Histidin x HCl x H2O
41,92



L-Isoleucin
7,87



L-Leucin
26,24



L-Lysin x HCl
73,04



L-Methionin
8,95



L-Phenylalanin
9,91



L-Prolin
69,06



L-Serin
21,02



L-Threonin
23,82



L-Tryptophan
4,08



L-Tyrosin
10,87



L-Valin
23,42


Vitamine
D(+)-Biotin
0,07



D-Calciumpantothenat
0,48



Cholinchlorid
13,96



Folsäure
1,32



myo-Inositol
18,02



Nicotinamid
0,04



Pyridoxin x HCl
0,06



Riboflavin
0,04



Thiamin x HCl
0,34



Vitamin B12
1,36

80,00 €*
McCoys 5A Medium (modifiziert), w: 3,0 g/L Glucose, w: stabiles Glutamin, w: 2,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3
McCoy's 5A Medium ist ein sehr empfehlenswertes und spezialisiertes Medium, das entwickelt wurde, um das Wachstum und die Replikation von Viren in primären Zellkulturen zu erleichtern. Es hat für seine außergewöhnlichen Leistungen in verschiedenen biologischen Forschungsanwendungen große Anerkennung gefunden.
Eine herausragende Anwendung von McCoy's 5A Medium ist die Kultivierung menschlicher Kolon-Karzinom-Zelllinien. Insbesondere wurde es bei der Untersuchung des Leucin-reichen Repeat-enthaltenden G-Protein-gekoppelten Rezeptors (LGR5) und seiner Rolle bei der Metastasierung von Dickdarmkrebs eingesetzt. Dieses Medium hat sich bei der Kultivierung verschiedener Kolonkarzinom-Zelllinien wie HCT116, RKO, FET, CBS, HCT116b und TENN bewährt und ermöglicht es den Forschern, die der Metastasierung von Kolonkarzinomen zugrunde liegenden Mechanismen genauer zu erforschen.
Neben seiner Anwendung in der Krebsforschung hat sich McCoy's 5A Medium auch bei der Untersuchung von Osteoblasten als unverzichtbar erwiesen. Forscher, die die Ionenreaktivität von kalziumarmem Hydroxylapatit in Standard-Zellkulturmedien untersuchen, haben dieses Medium zur Kultivierung von Osteoblasten verwendet. Diese Anwendung hat zu einem besseren Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Osteoblasten und kalziumarmem Hydroxylapatit geführt und zu Fortschritten auf dem Gebiet der Knochenforschung beigetragen.
McCoy's 5A Medium wurde sorgfältig formuliert, indem die im Basalmedium Eagle enthaltenen Aminosäuren modifiziert wurden, um Lebertumorzellen optimal zu unterstützen. Dank dieser angereicherten Formulierung eignet sich das Medium für eine Vielzahl etablierter Zelllinien sowie für Primärzellen, was seine Vielseitigkeit und Anwendbarkeit in verschiedenen Forschungsbereichen weiter erhöht.
Darüber hinaus geht die biochemische und physiologische Wirkung von McCoy's 5A Medium über Lebertumorzellen hinaus. Es wurde erfolgreich zur Unterstützung des Wachstums in Primärkulturen von Knochenmark, Haut, Zahnfleisch, Niere, Omentum, Nebenniere, Lunge, Milz, Rattenembryo und anderen Zelltypen eingesetzt. Diese breite Palette von Anwendungen beweist den großen Nutzen von McCoy's 5A Medium bei der Unterstützung des Wachstums und der Erhaltung verschiedener Zelltypen für umfassende biologische Forschung.
Formulierung
Dieses McCoy's 5A Medium (modifiziert) enthält 3,0 g/L Glucose, stabiles Glutamin, 2,0 mM Natriumpyruvat und 2,2 g/L NaHCO3.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.
Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2H2O
132,46



Magnesiumsulfat x 7H2O
200,00



Kaliumchlorid
400,00



Natriumchlorid
6,460.00



Natriumdihydrogenphosphat x H2O
580,00


Sonstige Bestandteile
D(+)-Galaktose wasserfrei
3,000.00



Glutathion (red.)
0,50



Bacto-Pepton
600,00



Phenolrot
10,00


Aminosäuren
L-Alanin
13,36



L-Arginin x HCl
42,10



L-Asparagin x H2O
45,00



L-Asparaginsäure
19,97



L-Cystein
24,24



L-Glutamin stabil
326,61



L-Glutaminsäure
22,10



Glycin
7,50



L-Histidin x HCl x H2O
20,76



L-Hydroxyprolin
19,70



L-Isoleucin
39,36



L-Leucin
39,36



L-Lysin x HCl
36,50



L-Methionin
14,90



L-Phenylalanin
16,50



L-Prolin
17,30



L-Serin
26,30



L-Threonin
17,90



L-Tryptophan
3,10



L-Tyrosin
18,10



L-Valin
17,60


Vitamine
p-Aminobenzoesäure
1,00



Ascorbinsäure
0,50



D(+)-Biotin
0,20



D-Calciumpantothenat
0,20



Cholinchlorid
5,00

30,00 €*
IMDM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 25 mM HEPES, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 3,024 g/L NaHCO3
Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) ist ein komplexes und angereichertes Wachstumsmedium für die Zellkultur. IMDM ist eine Modifikation von DMEM, die Selen enthält und im Vergleich zu DMEM zusätzliche Aminosäuren, Vitamine und anorganische Salze aufweist. Es enthält kein Eisen und erfordert eine Ergänzung mit fötalem Rinderserum (FBS). IMDM verwendet ein Natriumbicarbonat-Puffersystem und benötigt eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um den physiologischen pH-Wert zu erhalten.
IMDM eignet sich gut für schnell proliferierende Zellkulturen mit hoher Dichte, einschließlich Jurkat-, COS-7
- und Makrophagen-Zellen. Die verschiedenen Modifikationen von IMDM, die für eine Reihe von Zellkulturanwendungen zur Verfügung stehen, können mit dem Media Selector Tool gefunden werden. Flüssigmedien liefern wichtige Nährstoffe für alle Zellkulturanwendungen. Jedes unserer hochwertigen Zellkulturmedien wird nach der ursprünglich veröffentlichten Formel oder nach Modifikationen hergestellt, die für eine gleichbleibende Leistung und Stabilität des Kulturmediums erforderlich sind.
IMDM vs. DMEM
IMDM enthält Kaliumnitrat anstelle von Eisen(III)-Nitrat sowie HEPES und Natriumpyruvat. Die zusätzlichen Komponenten in IMDM machen es geeigneter für spezielle Zelltypen und spezifische Anwendungen als DMEM.
IMDM vs. RPMI
IMDM und RPMI haben unterschiedliche Formulierungen, die für die PMA/Ionomycin-Stimulation relevant sein können. Ein wesentlicher Unterschied ist die Ca2+-Konzentration. Während RPMI 0,42 mM Ca2+ enthält, enthält IMDM 1,49 mM.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Gekühlt bei +2°C bis +8°C im Dunkeln aufbewahren. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab dem Herstellungsdatum.
Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Calciumchlorid x 2 H2O
219,00



Kaliumchlorid
330,00



Kaliumnitrat
0.076



Magnesiumsulfat, wasserfrei
97,73



Natriumchlorid
4,505.00



Natriumdihydrogenphosphat wasserfrei
109,00



Natriumselenit
0,02


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
4,500.00



HEPES
5,958.00



Natriumpyruvat
110,00



Phenolrot
15,00


Aminosäuren
L-Alanin
25,00



L-Arginin x HCl
84,00



L-Asparagin x H2O
25,00



L-Asparaginsäure
30,00



L-Cystin x 2HCl
91,24



L-Glutamin
584,00



L-Glutaminsäure
75,00



Glycin
30,00



L-Histidin x HCl x H2O
42,00



L-Isoleucin
104,80



L-Leucin
104,80



L-Lysin x HCl
146,20



L-Methionin
30,00



L-Phenylalanin
66,00



L-Prolin
40,00



L-Serin
42,00



L-Threonin
95,20



L-Tryptophan
16,00



L-Tyrosin x 2Na
104,20



L-Valin
93,60


Vitamine
D(+)-Biotin
0.013



D-Calciumpantothenat
4,00



Cholinchlorid
4,00



Folsäure
4,00



myo-Inositol
7,20

25,00 €*
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3
RPMI 1640 Medium, auch bekannt als RPMI-Medium, ist ein äußerst vielseitiges Zellkulturmedium, das in der biologischen Forschung zur Kultivierung verschiedener Säugetierzellen verwendet wird. Dieses Medium wurde 1966 von George E. Moore, Robert E. Gerner und H. Addison Franklin am renommierten Roswell Park Comprehensive Cancer Center entwickelt und hat seinen Namen von seinem Ursprung am Roswell Park Memorial Institute (RPMI).
Ursprünglich für das Wachstum menschlicher Leukämiezellen in Suspensions
- und Monolayer-Kulturen konzipiert, hat sich RPMI 1640 Medium durch Modifikationen von Forschern und kommerziellen Anbietern weiterentwickelt und ist heute für eine Vielzahl von Säugetierzellen geeignet. Es ist außergewöhnlich kompatibel mit Zelllinien wie HeLa, Jurkat, MCF-7, PC12, PBMC, Astrozyten und Karzinomen.
RPMI 1640 Medium hebt sich von anderen Zellkulturmedien durch seine einzigartige Zusammensetzung ab. Es enthält eine erhebliche Menge an Phosphat, Aminosäuren und Vitaminen. Insbesondere enthält es Biotin, Vitamin B12 und PABA, die in Eagle's Minimal Essential Medium oder Dulbecco's Modified Eagle Medium nicht vorhanden sind. Darüber hinaus weist RPMI 1640 Medium deutlich erhöhte Konzentrationen der Vitamine Inositol und Cholin auf. Es enthält jedoch keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren. Daher ist in der Regel eine Ergänzung mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) erforderlich, um optimale Bedingungen für das Zellwachstum zu schaffen.
Das Puffersystem von RPMI 1640 Medium basiert auf Natriumbicarbonat (2,0 g/L) und erfordert eine 5-10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch angemessenen pH-Wert zu erhalten. Durch die Zugabe des Reduktionsmittels Glutathion unterscheidet sich dieses Medium weiter von anderen.
Die einzigartige Zusammensetzung dieser RPMI-Formulierung umfasst 2,1 mM stabiles Glutamin, 2,0 Gramm pro Liter NaHCO3 und Phenolrot.
Qualitätskontrolle

pH = 7,2 +/
- 0,02 bei 20-25°C.
Jede Charge wurde auf Sterilität und Abwesenheit von Mykoplasmen und Bakterien getestet.

Wartung

Kühl aufbewahren bei +2°C bis +8°C im Dunkeln. Einfrieren und Erwärmen bis zu +37° C mindern die Qualität des Produkts.
Erwärmen Sie das Medium nicht auf mehr als 37° C und verwenden Sie keine unkontrollierbaren Wärmequellen (z.B. Mikrowellengeräte).
Wenn nur ein Teil des Mediums verwendet werden soll, nehmen Sie diese Menge aus der Flasche und erwärmen Sie sie bei Raumtemperatur.
Die Haltbarkeit eines jeden Mediums mit Ausnahme des Basismediums beträgt 8 Wochen ab Herstellungsdatum.

Zusammensetzung




Bestandteile
mg/L


Anorganische Salze
Kalziumnitrat x 4H2O
100,00



Magnesiumsulfat wasserfrei
48,83



Kaliumchlorid
400,00



Natriumchlorid
5,950.00



di-Natriumhydrogenphosphat
800,49


Sonstige Bestandteile
D(+)-Glucose wasserfrei
2,000.00



Glutathion (red.)
1,00



Phenol rot
5,00



NaHCO3
2,000.00


Aminosäuren
L-Arginin x HCl
241,86



L-Asparagin x H2O
56,82



L-Asparaginsäure
20,00



L-Cystin x 2HCl
65,19



L-Alanyl-L-Glutamin
447,00



L-Glutaminsäure
20,00



Glycin
10,00



L-Histidin x HCl x H2O
20,27



L-Hydroxyprolin
20,00



L-Isoleucin
50,00



L-Leucin
50,00



L-Lysin x HCl
40,00



L-Methionin
15,00



L-Phenylalanin
15,00



L-Prolin
20,00



L-Serin
30,00



L-Threonin
20,00



L-Tryptophan
5,00



L-Tyrosin x 2Na
28,83



L-Valin
20,00


Vitamine
p-Aminobenzoesäure
1,00



D-(+)-Biotin
0,20



D-Calciumpantothenat
0,25



Cholinchlorid
3,00



Folsäure
1,00



myo-Inositol
35,00



Nicotinamid
1,00



Pyridoxin x HCl
1,00



Riboflavin
0,20



Thiamin x HCl
1,00



Vitamin B12
0.005

25,00 €*

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