DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3
DMEM:Ham’s F-12 ist ein weithin anerkanntes und häufig verwendetes Basalmedium in der Zellkultur für die biologische Forschung. Es dient als grundlegende Nährstoffquelle für das Wachstum verschiedener Säugetierzelllinien, insbesondere wenn es mit fötalem Rinderserum (FBS) ergänzt wird.
Diese einzigartige Formulierung kombiniert Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM) und Ham’s F-12 (Ham’s Nutrient Mixture F-12) im exakten Verhältnis 1:1. Die Zugabe von L-Glutamin verbessert die Zusammensetzung zusätzlich.
DMEM, abgeleitet von Eagles Minimal Essential Medium (EMEM), bietet im Vergleich zu seinem Vorgänger eine erhöhte Konzentration an Aminosäuren und Vitaminen. Im Gegensatz dazu basiert Hams F-12 auf dem Ham’s F-10-Medium und liefert eine ergänzende Reihe essenzieller Bestandteile.
Um ein optimales Zellwachstum zu unterstützen, ist es gängige Praxis, DMEM:Ham’s F-12 mit FBS in einer typischen Konzentration von 5–10 % zu ergänzen. Diese Zugabe ist notwendig, da dem Medium Wachstumshormone, Lipide und Proteine fehlen, die für die Zellentwicklung entscheidend sind.
DMEM:Ham’s F12 enthält ein pH-Puffersystem und wird häufig mit Phenolrot, einem pH-Indikator, versetzt. Kultivierte Zellen in DMEM:Ham’s F12 oder jedem anderen Medium, das das Bicarbonat-Puffersystem nutzt, benötigen eine kontrollierte CO₂-Umgebung von 5–10 %, um angemessene pH-Werte aufrechtzuerhalten.
Qualitätskontrolle
- Steril gefiltert
Lagerung und Haltbarkeit
- Bei +2 °C bis +8 °C lichtgeschützt lagern.
- Nach dem Öffnen bei 4 °C lagern und innerhalb von 6–8 Wochen verbrauchen.
Versandbedingungen
- Raumtemperatur
Lagerung
- Im Dunkeln bei +2 °C bis +8 °C gekühlt lagern. Ein Gefrieren und häufiges Erwärmen auf +37 °C sind zu vermeiden, da dies die Produktqualität beeinträchtigt.
- Erhitzen Sie das Medium nicht über 37 °C hinaus und verwenden Sie keine unkontrollierten Wärmequellen wie Mikrowellen.
- Soll nur ein Teil des Mediums verwendet werden, entnehmen Sie die benötigte Menge und erwärmen Sie diese vor der Verwendung auf Raumtemperatur.
Zusammensetzung
| Kategorie | Bestandteile | Konzentration (mg/l) |
| Aminosäuren | Glycin | 18,75 |
| L-Alanin | 4,45 | |
| L-Arginin-HCl | 147,50 | |
| L-Asparagin-H₂O | 7,50 | |
| L-Asparaginsäure | 6,65 | |
| L-Cystein-HCl-H₂O | 17,56 | |
| L-Cystin-2-HCl | 31,29 | |
| L-Glutaminsäure | 7,35 | |
| L-Glutamin | 365,00 | |
| L-Histidin-HCl-H₂O | 31,48 | |
| L-Isoleucin | 54,47 | |
| L-Leucin | 59,05 | |
| L-Lysin-HCl | 91,25 | |
| L-Methionin | 17,24 | |
| L-Phenylalanin | 35,48 | |
| L-Prolin | 17,25 | |
| L-Serin | 26,25 | |
| L-Threonin | 53,45 | |
| L-Tryptophan | 9,02 | |
| L-Tyrosin-2-Na-2-H₂O | 55,79 | |
| L-Valin | 52,85 | |
| Vitamine | D-Biotin | 0,0035 |
| Cholinchlorid | 8,98 | |
| D-Calciumpantothenat | 2,24 | |
| Folsäure | 2,66 | |
| Myo-Inositol | 12,60 | |
| Nicotinamid | 2,02 | |
| Pyridoxin-HCl | 0,031 | |
| Pyridoxal-HCl | 2,00 | |
| Riboflavin | 0,219 | |
| Thiamin-HCl | 2,17 | |
| Vitamin B12 | 0,68 | |
| Anorganische Salze | CaCl₂·2 H₂O | 154,50 |
| CuSO₄·5 H₂O | 0,0013 | |
| Fe(NO₃)₃·9H₂O | 0,05 | |
| FeSO₄·7 H₂O | 0,417 | |
| KCl | 311,80 | |
| MgCl₂·6H₂O | 61,20 | |
| MgSO₄·7 H₂O | 100,00 | |
| NaCl | 6996,00 | |
| NaHCO₃ | 1200,00 | |
| Na₂HPO₄ | 71,02 | |
| NaH₂PO₄·2 H₂O | 70,87 | |
| ZnSO₄·7 H₂O | 0,432 | |
| Sonstige Bestandteile | D-Glucose | 3151,00 |
| Hypoxanthin | 2,40 | |
| HEPES | 3574,50 | |
| Linolsäure | 0,042 | |
| Liponsäure | 0,105 | |
| Phenolrot-Natriumsalz | 8,63 | |
| Putrescin-2-HCl | 0,081 | |
| Natriumpyruvat | 55,00 | |
| Thymidin | 0,365 |