NCI-H460-Zellen - Einblicke in die Lungenkrebsforschung mit NCI-H460
NCI-H460 sind humane, nicht-kleinzellige Lungenkrebszellen, die häufig in der Lungenkarzinom- und Toxikologieforschung verwendet werden. Diese Zelllinie ist ein wertvolles Instrument zur Untersuchung verschiedener krebsbiologischer Aspekte wie Tumorentwicklung, Wachstum und Arzneimittelresistenz. Darüber hinaus sind NCI-H460-Zellen ein geeignetes Modell für die Entwicklung von Reagenzien zur Krebsbekämpfung.
NCI-H460-Zellen: Ursprung und allgemeine Merkmale
Die Herkunft und die allgemeinen Merkmale einer Zelllinie tragen wesentlich zu ihren Forschungsanwendungen bei. In diesem Abschnitt des Artikels erfahren Sie mehr über den Ursprung und die wichtigsten Merkmale der NCI-H460 Lungenkrebszellen. Sie werden wissen: Was sind NCI-H460-Zellen? Was ist der Typ der NCI-H460-Zelllinie? Was ist die Morphologie von NCI-H460?
- Die NCI-H460-Zelllinie stammt aus dem Pleuraerguss eines europäischen Mannes mit großzelligem Lungenkrebs. Sie wurde 1982 von A.F. Gazdar und Kollegen etabliert.
- Die NCI-H460-Lungenkrebszellen besitzen eine epitheliale Morphologie.
- NCI-H460 ist eine tumorigene Zelllinie mit einem hypotriploiden Karyotyp. Die modale Chromosomenzahl für diese Zellen beträgt 57. NCI-H460-Zellen besitzen auch 58 modale Chromosomenzahlen in vergleichbarer Häufigkeit.
- Diese Lungenkrebszellen haben viele NCI-NCI-H460-Mutationen wie nicht-kleinzellige Lungentumore, z. B. die NCI-H460-KRAS-Mutation, die an Zellproliferation, Wachstum, Invasion und Metastasierung beteiligt sind.
Informationen zur Kultivierung von NCI-H460-Zellen
Für die richtige Handhabung und Pflege der NCI-H460-Zelllinie sollten Sie die folgenden wichtigen Punkte kennen. Sie informieren Sie über die NCI-H460-Verdopplungszeit, das NCI-H460-Kulturmedium und grundlegende Zellkulturverfahren für NCI-H460-Lungenkrebszellen.
Wichtige Punkte für die Kultivierung von NCI-H460-Zellen
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Verdopplungszeit: |
Die Verdopplungszeit von NCI-H460 beträgt etwa 33 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
Die NCI-H460-Lungenkrebszellen sind adhärent. |
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Subkultivierungsverhältnis: |
Das empfohlene Teilungsverhältnis für die NCI-H460-Zelllinie ist 1:2 und 1:4. Nach Entfernung des alten Mediums werden die adhärenten Zellen mit 1 x Phosphatpuffersalzlösung gespült. Anschließend werden die Zellen 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur mit der Accutase-Passagierlösung inkubiert. Die dissoziierten Zellen werden in einem Kulturmedium resuspendiert und zentrifugiert. Die geernteten Zellen werden erneut resuspendiert und zur Kultivierung in eine neue Flasche gegeben. |
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Wachstumsmedium: |
RPMI 1640 wird als NCI-H460-Nährmedium verwendet. Es ist mit 10 % fötalem Rinderserum, 2,1 mM stabilem Glutamin und 2,0 g/L NaHCO3 angereichert. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden. |
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Wachstumsbedingungen: |
NCI-H460-Kulturen werden bei einer Temperatur von 37 °C in einem befeuchteten Inkubator mit einer kontinuierlichen Zufuhr von 5 % CO2 gehalten. |
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Lagerung: |
NCI-H460-Lungenkrebszellen können in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder bei einer Temperatur von unter -150°C in einem elektrischen Ultratiefkühlschrank langfristig gelagert werden. |
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Einfrierverfahren und Medium: |
Zum Einfrieren und Lagern von NCI-H460-Zellen wird CM-1- oder CM-ACF-Medium verwendet. Es wird ein langsames Einfrierverfahren empfohlen, um die maximale Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten. |
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Auftauprozess: |
Eingefrorene NCI-H460-Zellen werden in einem vorgewärmten Wasserbad (bei einer Temperatur von 37 °C) 40 bis 60 Sekunden lang aufgetaut, bis ein kleiner Eisklumpen übrig ist. Die aufgetauten Zellen werden mit frischem Medium versetzt und zentrifugiert, um die gefrorenen Medienbestandteile zu entfernen. Das gesammelte Zellpellet wird wieder resuspendiert, und die Zellen werden in neue Kolben mit Wachstumsmedien verteilt. Es kann fast 24 Stunden dauern, bis sich NCI-H460-Zellen an der Oberfläche des Kolbens festsetzen. |
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Biosicherheitsstufe: |
NCI-H460-Lungenkrebszellen werden in Labors der Biosicherheitsstufe 1 gehandhabt und gepflegt. |
Vorteile und Nachteile von NCI-H460-Zellen
NCI-H460 ist eine in der Lungenkrebsforschung weit verbreitete Zelllinie. In diesem Abschnitt werden die allgemeinen Vor- und Nachteile von NCI-H460-Lungenkrebszellen behandelt.
Vorteile
Die Vorteile der nicht-kleinzelligen Lungenkrebs-Zelllinie NCI-H460 sind:
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Ursprung des Tumors
Die NCI-H460-Zelllinie wurde von einem Patienten mit großzelligem Lungenkarzinom gewonnen und repräsentiert diesen speziellen Lungenkrebstyp. Sie werden als Modell zur Untersuchung der Biologie von Lungenkrebs und zur Entwicklung neuer und wirksamer Behandlungen verwendet. NCI-H460-Zellen haben ein tumorerzeugendes Potenzial und können in immundefiziente Mäuse injiziert werden, um In-vivo-Tumormodelle für die Untersuchung des Tumorwachstums, der Tumorentwicklung und der Wirksamkeit potenzieller Arzneimittel zu schaffen.
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Hohe Proliferationsraten
NCI-H460 weist höhere Wachstumsraten auf als andere Zelllinien für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs, z. B. A549. Dieser Vorteil erhöht ihre Verfügbarkeit und hilft Forschern bei der Durchführung reproduzierbarer und zeitkritischer Experimente.
Nachteile
Die Nachteile von NCI-H460 Lungenkrebszellen sind:
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Homogenität
NCI-H460-Zellen sind homogen, da sie aus einem einzigen Patiententumor gewonnen wurden. Daher fehlt ihnen im Allgemeinen die Komplexität und Heterogenität, die bei Patiententumoren zu beobachten ist.
Forschungsanwendungen von NCI-H460-Zellen
Die NCI-H460-Lungenkrebszellen werden in großem Umfang für Studien zum Lungenkarzinom verwendet. Im Folgenden werden einige der wichtigsten Forschungsanwendungen von NCI-H460-Zellen aufgeführt:
- Lungenkrebsforschung: NCI-H460-Zellen sind ein unschätzbares Modell für die Untersuchung von Zell- und Molekularmechanismen, die an der Entwicklung, dem Wachstum und der Metastasierung von Tumoren beteiligt sind. Darüber hinaus werden sie zur Untersuchung von wichtigen Signalwegen, molekularen Zielen und verschiedenen genetischen Mutationen verwendet, die mit dem Fortschreiten von Lungenkrebs in Verbindung stehen. Es wurden mehrere Studien mit NCI-H460-Zellen durchgeführt, um diese Faktoren effektiv zu untersuchen. Eine 2019 durchgeführte Studie schlug vor, dass überexprimiertes nukleäres ubiquitäres Kasein und Cyclin-abhängiges Kinasesubstrat (NUCKS) über die Regulierung des PI3K/AKT-Signalwegs am Tumorzellwachstum beteiligt sind [1]. In ähnlicher Weise wurde in einer In-vitro- und In-vivo-Studie mit NCI-H460-Zellen die Rolle des eIF4E-Gens untersucht. Die Ergebnisse zeigten, dass das eIF4E-Gen am Wachstum und an der Angiogenese von Lungenkarzinomen beteiligt ist und gezielt zur Entwicklung vielversprechender Medikamente gegen Lungenkrebs eingesetzt werden kann [2].
- Entdeckung und Entwicklung von Arzneimitteln: NCI-H460, eine menschliche Lungenkrebszelllinie, wird häufig in Studien zur Entdeckung und Entwicklung von Medikamenten eingesetzt. Forscher nutzen diese Zellen, um die Toxizität und Wirksamkeit neuartiger Arzneimittelkandidaten, zielgerichteter Therapien und Behandlungen zu untersuchen, die hauptsächlich auf NCI-H460 KRAS-Mutationen abzielen. In einer von Haoyue Hu und Kollegen im Jahr 2023 durchgeführten Studie wurden NCI-H460-Zellen zur Untersuchung der krebshemmenden Wirkung des Medikaments Anlotinib verwendet. Die Ergebnisse zeigten, dass Anlotinib das Wachstum von Lungenkrebszellen mit KRAS-Mutation durch Hemmung der MEK/ERK-Signalkaskade teilweise beeinträchtigte [3]. Ebenso wurde eine phenolische Verbindung, Carnosinsäure, auf ihre antiproliferative und proapoptotische Wirkung bei NCI-H460-Zellen untersucht [4].
- Medikamentenresistenz: Die NCI-H460-Zelllinie ist ideal für die Untersuchung des Mechanismus der Arzneimittelresistenz von Lungenkarzinomen. Forscher nutzen diese Zellen zur Entwicklung von Modellen der Arzneimittelresistenz, um die zugrunde liegenden Gene, molekularen Faktoren und Signalwege zu identifizieren. In einer Studie wurden beispielsweise NCI-H460-Zellen entwickelt, die gegen Pemetrexed, ein Multitargeting-Antifolat, resistent sind, um die zugrunde liegenden molekularen Mechanismen der Pemetrexed-Resistenz bei nicht-kleinzelligen Lungenkrebszellen zu untersuchen [5].
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Forschungspublikationen mit NCI-H460-Zellen
Hier finden Sie einige interessante Forschungspublikationen über die NCI-H460 Lungenkarzinom-Zelllinie.
In dieser Studie in Molecules (2023) wird vorgeschlagen, dass ein natürliches α-1,6-Glucan, BBWPW, aus der schwarzen Bohne die Proliferation von NCI-H460-Zellen über die Regulierung des PI3K/AKT/MAPK-Signalwegs hemmt.
In diesem Artikel in Phytomedicine (2019) wurde untersucht, dass Dioscin-6′-O-Acetat, eine neuartige natürliche Verbindung, eine antiproliferative Wirkung auf NCI-H460-Lungenkrebszellen ausübt.
miRNA-425-5p steigert das Lungenkrebswachstum über die PTEN/PI3K/AKT-Signalachse
BMC Pulmonary Medicine (2020) stellt fest, dass die microRNA-425-5p die Tumorigenese von Lungenkarzinomen über den PTEN/PI3K/AKT-Signalweg fördert.
In diesem Artikel in Molecular Medicine Reports (2017) wurden das antitumorale Potenzial und die zugrundeliegenden Mechanismen der Quinalizarin-Verbindung in NCI-H460- und anderen Lungenkrebszellen vorgestellt.
Diese in der Zeitschrift Food and Function (2019) veröffentlichte Forschungsarbeit unterstreicht die potenzielle krebshemmende Wirkung des Extrakts aus Eucalyptus globulus labill. anhand von NCI-H460-Zellen. Die Ergebnisse zeigen, dass der Pflanzenextrakt diese Wirkungen durch Erhöhung der NCI-H460 p53-Expression und Modulation des Zellzyklusprofils zeigt.
Ressourcen für die NCI-H460-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Hier finden Sie einige Online-Ressourcen, die sich mit den NCI-H460-Lungenkrebszellen befassen.
- Transfektion von NCI-H460-Zellen: Dieses Video-Tutorial ist eine Schritt-für-Schritt-Anleitung für die Transfektion von NCI-H460-Zellen mit Plasmid-DNA.
Die folgenden Links enthalten zwingende Informationen zur Zellkultur von H460-Zellen.
- NCI-H460-Zellen: Auf dieser Website finden Sie wichtige Informationen über NCI-H460-Zellmedien, Subkulturen sowie Einfrier- und Auftauverfahren.
- Passage von NCI-H460-Zellen: In diesem Dokument finden Sie Hinweise zur Passage und Subkultivierung der NCI-H460-Zelllinie. Außerdem hilft es Ihnen, das Transfektionsprotokoll für NCI-H460-Zellen zu erlernen.
Erforschung der NCI-H460-Zelllinie: FAQs und Einblicke
Referenzen
- Hu, C., et al., NUCKS fördert die Proliferation, Migration und Invasion von Lungenkrebszellen durch den Pi3k/Akt-Signalweg. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, ein neuartiger eIF4E/eIF4G-Interaktionsinhibitor, hemmt das Wachstum von Lungenkrebszellen und die Angiogenese über den Ras/MNK/ERK/eIF4E-Signalweg. Chemisch-Biologische Wechselwirkungen, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib übt Anti-Krebs-Effekte auf KRAS-mutierte Lungenkrebszellen durch Unterdrückung des MEK/ERK-Signalwegs aus. Cancer Management and Research, 2020: S. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosinsäure zeigt antiproliferative und proapoptotische Wirkungen in tumoralen NCI-H460- und nichttumoralen IMR-90-Lungenzellen. Journal of Toxicology and Environmental Health, Teil A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L., et al., Etablierung und Charakterisierung von Pemetrexed-resistenten NCI-H460/PMT-Zellen. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (Früher: Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.