Hep3B-Zellen: Forschung und Entdeckung des hepatozellulären Karzinoms
HEP3B ist eine immortalisierte, vom Menschen stammende Hepatozyten-Karzinom-Zelllinie. Sie wird häufig in der Hepatotoxizitäts- und Arzneimittelstoffwechselforschung eingesetzt. Die Transfektionseffizienz von HEP3B ist beträchtlich; daher werden diese Zellen häufig zur Untersuchung der Entwicklung und des Fortschreitens von Leberkrebs sowie für therapeutische Maßnahmen eingesetzt. Dieser Artikel enthält alle notwendigen Informationen über die HEP3B-Zelllinie, um Sie bei Ihrer Arbeit mit ihr zu unterstützen. Er umfasst vor allem Folgendes:
- Allgemeine Merkmale und Herkunft der HEP3B-Zellen
- Informationen zur Kultivierung der HEP3B-Zelllinie
- HEP3B-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen
- Anwendungen von HEP3B-Zellen in der Forschung
- Veröffentlichungen zur HEP3B-Zelllinie
- Ressourcen für die HEP3B-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
1.allgemeine Eigenschaften und Herkunft von HEP3B-Zellen
Die wichtigsten Informationen, die Sie über eine Zelllinie benötigen, sind ihre Herkunft und ihre allgemeinen Merkmale. Sie können Ihnen helfen, über ihre Verwendung in Ihrer Forschung zu entscheiden und mit ihr umzugehen. In diesem Artikelabschnitt finden Sie alle wichtigen Informationen über die Herkunft und die Eigenschaften von HEP3B. Hier erfahren Sie mehr: Was sind Hep 3B-Zelllinien? Was ist der Ursprung von Hep3B-Zellen? Wie ist die Morphologie der HEP3B-Zellen?
- HEP3B, eine kontinuierliche menschliche Hepatomzelllinie, stammt aus dem Lebergewebe eines 8-jährigen afrikanischen Jungen mit hepatozellulärem Karzinom (HCC). Sie wurde 1979 von Aden und Kollegen im Labor von Barbara B. Knowles am Wistar Institute in Philadelphia, USA, entwickelt [1].
- HEP3B-Zellen weisen eine Integration des Hepatitis-B-Virus (HBV)-Genoms in ihr Chromosom auf.
- Diese Hepatozyten-Karzinomzellen weisen eine epitheliale Morphologie auf.
- Die HEP3B-Zellen haben eine modale Chromosomenzahl von 60. Im Gegensatz zu HepG2 besitzen sie kein rearrangiertes Chromosom 1.
Was ist der Unterschied zwischen HepG2 und Hep3B?
HepG2 und HEP3B unterscheiden sich durch die Anzahl der Chromosomen pro Zelle. HEP3B enthält 60 Chromosomen, während HepG2-Zellen im Durchschnitt 55 Chromosomen haben. Außerdem ist HepG2 nicht-tumorigen und Hepatitis-B-negativ, während HEP3B tumorigen und HBV-positiv ist.
2.informationen zur Kultivierung der HEP3B-Zelllinie
Die Kenntnis der Informationen zur Kultivierung einer Zelllinie kann Ihnen den Umgang mit ihr erleichtern. In diesem Abschnitt finden Sie alle wichtigen Informationen zur Kultivierung der HEP3B-HBV-Zelllinie, darunter: Wie lange ist die Verdopplungszeit von Hep3B-Zellen? Was sind die HEP3B-Kulturbedingungen? Wie kultiviert man HEP3B HCC-Zellen?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von HEP3B-Zellen
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Verdopplungszeit: |
Die Verdopplungszeit von HEP3B-Zellen beträgt etwa 36 Stunden. |
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Adhärent oder in Suspension: |
Diese Hepatomzelllinie ist adhärent. |
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Teilungsverhältnis: |
HEP3B-Zellen werden in einem Verhältnis von 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Adhärente HEP3B-Zellen werden mit 1 x PBS gespült und dann mit der Accutase-Dissoziationslösung inkubiert. Nach 8 bis 10 Minuten wird frisches Medium zugegeben, und die Zellen werden zentrifugiert. Die geernteten Zellen werden dann vorsichtig resuspendiert und im empfohlenen Teilungsverhältnis in Flaschen mit Kulturmedien gefüllt. |
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Wachstumsmedium: |
Für die Kultur von HEP3B-Zellen wird EMEM-Medium mit 10 % FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin und Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) verwendet. |
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Wachstumsbedingungen: |
HEP3B-Zellen werden in einem befeuchteten 37°C-Inkubator mit einer kontinuierlichen 5%igen CO2-Zufuhr kultiviert. |
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Lagerung: |
Gefrorene HEP3B-Zellen werden bei einer Temperatur unter -150°C in einem elektrischen Gefrierschrank oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert. |
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Einfrierprozess und Medium: |
Das für HEP3B-Zellen empfohlene Einfriermedium ist CM-1 oder CM-ACF. Die Zellen werden mit einem langsamen Gefrierverfahren eingefroren, das nur einen Temperaturabfall von 1 °C pro Minute zulässt, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu schützen. |
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Auftauprozess: |
Die eingefrorenen Zellen werden in einem auf 37 °C voreingestellten Wasserbad für 40 bis 60 Sekunden aufgetaut. Anschließend werden diese Zellen in das frische Wachstumsmedium gegeben und zentrifugiert, um die gefrierenden Medienbestandteile zu entfernen. Die gesammelten Zellen werden resuspendiert und zum Wachsen in neue Flaschen gegeben. |
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Biosicherheitsstufe: |
Für die Kultivierung von HEP3B-Zellen ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich. |
3.hEP3B-Zelllinie: Vorteile und Beschränkungen
HEP3B ist eine weit verbreitete Zelllinie des hepatozellulären Karzinoms. Dieser Abschnitt befasst sich mit einigen wichtigen Vorteilen und Einschränkungen dieser Hepatomzellen.
Vorteile
Die wichtigsten Vorteile von HEP3B-Zellen sind:
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Einfach zu kultivieren |
HEP3B-Zellen stellen keine besonderen Anforderungen an die Zellkultur, so dass sie in einem Forschungslabor leicht zu handhaben und zu pflegen sind. Dies vereinfacht die experimentellen Verfahren. |
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Hohe Transfektionseffizienz |
HEP3B-Zellen zeichnen sich durch eine bemerkenswerte Transfektionseffizienz aus und werden daher häufig für genetische Manipulationen und Studien zur Genexpression verwendet. |
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Tumorigenität |
HEP3B ist eine tumorigene hepatozelluläre Karzinom-Zelllinie, die bei Injektion in eine immungeschwächte Maus Tumore bilden kann. Dies hilft bei der Untersuchung der Krebsprogression und -entwicklung mithilfe von HEP3B-Xenograft-Modellen. |
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HEP3B P53-Status |
HEP3B-Zellen weisen eine P53-Genmutation auf, die dem hepatozellulären Karzinom (HCC) und anderen Krebsarten ähnelt, so dass sie für die Untersuchung der Auswirkungen der P53-Mutation auf das Wachstum, die Entwicklung und das Fortschreiten von Krebs relevant sind. |
Beschränkungen
Die mit der HEP3B-Zelllinie verbundenen Einschränkungen sind:
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In-vitro-Zellmodell |
Die HEP3B-Zelllinie dient als In-vitro-Modell für hepatozelluläre Karzinomzellen (HCC). Sie repräsentiert jedoch möglicherweise nicht vollständig die Komplexität von HCC, wie sie in lebenden Organismen vorkommt. Folglich können die experimentellen Ergebnisse in vitro von den in vivo beobachteten Ergebnissen abweichen. |
4.anwendungen von HEP3B-Zellen in der Forschung
Die HEP3B-Zelllinie bietet mehrere Anwendungsmöglichkeiten in der biomedizinischen Forschung. Einige der wichtigsten Forschungsanwendungen von HEP3B-Zellen sind:
- Krebsbiologie: HEP3B ist eine humane hepatozelluläre Karzinom-Zelllinie. Sie ist ein unschätzbares Zellmodell für die Untersuchung der zellulären und molekularen Mechanismen, die der Entwicklung und dem Fortschreiten von HCC zugrunde liegen. Forscher nutzen diese Zellen, um genetische Mutationen, zelluläre Prozesse und Zellsignalwege im Zusammenhang mit Leberkrebs zu untersuchen. In einer Studie mit HEP3B-Zellen wurde beispielsweise festgestellt, dass microRNA-223-3p die NLRP3-Inflammasom-Komponenten reguliert, die Proliferation hemmt und die Apoptose von HEP3B-Hepatokarzinomzellen fördert [2].
- Wirkstoffscreening und -entwicklung: Die HEP3B-Zelllinie wird auch zum Testen, Screening und zur Entwicklung neuer Therapeutika gegen Leberkarzinome verwendet. Außerdem wird sie zur Bewertung der Toxizität und Wirksamkeit verschiedener Krebsmedikamente und -behandlungen eingesetzt. Die Forscher verwendeten diese Hepatomzellen auch zur Untersuchung des Arzneimittelstoffwechsels. Forscher verwendeten HEP3B-Zellen und bewerteten das zytotoxische Potenzial von Cotinus coggygria-Pflanzenextrakt auf HEP3B-Hepatozytenkarzinomzellen [3].
- Virale Infektionen: HEP3B ist eine Hepatitis-B-Virus-positive Zelllinie; daher wird sie zur Untersuchung von Virusinfektionen eingesetzt, die zur Entwicklung von Leberkrebs führen können, d. h. HBV und HCV. Dies kann dazu beitragen, virale Infektionen besser zu verstehen und potenzielle antivirale Behandlungen zu entwickeln. In einer Studie wurden beispielsweise HEP3B-Hepatozyten-Krebszellen verwendet und die Bedeutung der Ubiquitinierung für die Ausbreitung des Hepatitis-C-Virus untersucht. Die Ergebnisse deuten darauf hin, dass die ubiquitinspezifische Protease 15 (USP15) an der Ausbreitung des HCV beteiligt ist, indem sie hepatozytenspezifische Funktionen wie die Bildung von Lipidtröpfchen und die HCV-RNA-Translation reguliert [4].
5.veröffentlichungen über die HEP3B-Zelllinie
In diesem Abschnitt des Artikels werden einige interessante Forschungspublikationen über HEP3B-Zellen vorgestellt.
In dieser Veröffentlichung in Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) wird vorgeschlagen, dass der durch Luteolinverbindungen ausgelöste Stress des endoplasmatischen Retikulums in P53-null HEP3B-Zellen auf eine P53-unabhängige Weise Anti-Tumoreffekte ausüben kann.
Potenzieller Angriff auf Hep3B-Leberkrebszellen durch das aus Avicennia marina isolierte Lupeol
In dieser Studie, die im Archiv der Pharmazie (2021) veröffentlicht wurde, wird ein pentazyklisches Triterpenoid, Lupeol, als potenzielles Antikrebsmittel gegen HEP3B-Zellen vorgeschlagen.
Dieser Artikel ist in Molecular Medicine Reports (2017) veröffentlicht. Die Ergebnisse der Studie besagen, dass der Ethanolextrakt von Cnidium monnieri (L.) Cusson den Zelltod (Apoptose) und den Zellzyklus-Stillstand in den HepG2- und HEP3B-Zellen durch die Regulierung des p53- und Akt/GSK-3β-Signalweges induziert.
Diese in Biomolecules and Therapeutics (2020) veröffentlichte Forschungsarbeit schlug vor, dass Auranofin eine synergistische Aktivität aufweist und die Sulforaphan-vermittelte Apoptose von HEP3B-Zellen durch Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs fördert.
In diesem Forschungsartikel in BioFactors (2023) wird vorgeschlagen, dass die zirkuläre RNA-0072309 in hepatozellulären Karzinomzellen HEP3B über die miRNA-665 antitumorale Wirkungen entfaltet.
6.ressourcen für die HEP3B-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Im Folgenden finden Sie einige Ressourcen zu HEP3B-Zellen:
- HEP3B-Transfektion: In diesem Video wird das Transfektionsprotokoll für HEP3B-Zellen erläutert.
- HEP3B-Transfektionseffizienz: Dieser Link hilft Ihnen dabei, die Zusammensetzung des HEP3B DMEM-Mediums, die Zellpassage und das Transfektionsprotokoll für HEP3B-Zellen kennenzulernen. Darüber hinaus finden Sie hier Informationen zur Optimierung des HEP3B-Lipofectamine 3000-Reagenzes in Ihrem Transfektionsprotokoll.
Der folgende Link enthält das HEP3B-Zellkulturprotokoll:
- HEP3B-Kulturbedingungen: Dieser Link hilft Ihnen, das Protokoll für die Handhabung und Pflege von Huh7- und HEP3B-Kulturen kennenzulernen.
- HEP3B-Zellen: Diese Website enthält zahlreiche Informationen über HEP3B-Zellen, einschließlich HEP3B-Medien, das Protokoll für die Zellteilung, das Auftauen und die Handhabung von proliferativen und kryokonservierten Kulturen.
Referenzen
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p reguliert NLRP3 zur Förderung der Apoptose und Hemmung der Proliferation von hep3B-Zellen. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
- Danjolli-Hashani, D. und S. Selen-Isbilir, Cytotoxic effect of Cotinus coggygria extract on Hep3B cancer cell line. Natural Product Research, 2022: S. 1-4.
- Kusakabe, S., et al., USP15 beteiligt sich an der Vermehrung des Hepatitis-C-Virus durch Regulierung der viralen RNA-Translation und der Lipidtröpfchenbildung. Journal of Virology, 2019. 93(6): p. 10.1128/jvi. 01708-18.