Hep3B-Zellen: Forschung und Erkenntnisse zum Leberzellkarzinom
HEP3B ist eine immortalisierte, aus menschlichen Hepatozyten gewonnene Karzinomzelllinie. Sie findet breite Anwendung in der Forschung zu Hepatotoxizität und Arzneimittelmetabolismus. Die Transfektionseffizienz von HEP3B ist beträchtlich; daher werden diese Zellen häufig zur Untersuchung der Entstehung, des Fortschreitens und der therapeutischen Interventionen bei Leberkrebs eingesetzt. Dieser Artikel enthält alle notwendigen Informationen über die HEP3B-Zelllinie, um Sie bei der Arbeit damit zu unterstützen. Er umfasst im Wesentlichen:
- Wachstumsmedium
- Zur Kultivierung von HEP3B-Zellen wird EMEM-Medium verwendet, das 10 % FBS, 2,2 g/l NaHCO₃, 2 mM L-Glutamin und Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) enthält.
- Verdopplungszeit
- Die Verdopplungszeit von HEP3B-Zellen beträgt etwa 36 Stunden.
- Wachstumsart
- Diese Hepatomzelllinie ist adhärent.
- Sicherheitsstufe
- BSL-1
- Erhältlich bei
- Cytion — HEP3B bestellen
- Allgemeine Merkmale und Herkunft der HEP3B-Zellen
- Informationen zur Kultivierung der HEP3B-Zelllinie
- HEP3B-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
- Anwendungen von HEP3B-Zellen in der Forschung
- Publikationen zur HEP3B-Zelllinie
- Ressourcen zur HEP3B-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Allgemeine Eigenschaften und Herkunft von HEP3B-Zellen
- Informationen zur Kultivierung der HEP3B-Zelllinie
- HEP3B-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
- Anwendungen von HEP3B-Zellen in der Forschung
- 5. Veröffentlichungen zur HEP3B-Zelllinie
- Ressourcen zur HEP3B-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Häufig gestellte Fragen
Allgemeine Merkmale und Herkunft von HEP3B-Zellen
Die wichtigsten Informationen, die Sie über eine Zelllinie benötigen, sind deren Herkunft und allgemeine Eigenschaften. Dies kann Ihnen bei der Entscheidung über deren Einsatz in Ihrer Forschung helfen und Ihnen den Umgang damit erleichtern. Dieser Abschnitt des Artikels behandelt alle wesentlichen Informationen über die Herkunft und Eigenschaften von HEP3B. Hier erfahren Sie: Was sind HEP3B-Zelllinien? Woher stammen HEP3B-Zellen? Wie sieht die Morphologie von HEP3B-Zellen aus?
- HEP3B, eine kontinuierliche menschliche Hepatomzelllinie, stammt aus dem Lebergewebe eines 8-jährigen afrikanischen Jungen mit Leberzellkarzinom (HCC). Sie wurde 1979 von Aden und Kollegen im Labor von Barbara B. Knowles am Wistar Institute in Philadelphia, USA, etabliert [1].
- HEP3B-Zellen weisen eine Integration des Hepatitis-B-Virus (HBV)-Genoms in ihr Chromosom auf.
- Diese Hepatozytenkarzinomzellen weisen eine epitheliale Morphologie auf.
- Die HEP3B-Zellen haben eine modale Chromosomenzahl von 60. Im Gegensatz zu HepG2 weisen sie keine Neuanordnung von Chromosom 1 auf.
Was ist der Unterschied zwischen HepG2 und Hep3B?
HepG2 und HEP3B unterscheiden sich in der Anzahl der Chromosomen pro Zelle. HEP3B enthält 60 Chromosomen, während HepG2-Zellen durchschnittlich 55 Chromosomen aufweisen. Darüber hinaus ist HepG2 nicht tumorigen und Hepatitis-B-negativ, während HEP3B tumorigen und HBV-positiv ist.
Informationen zur Kultivierung der HEP3B-Zelllinie
Kenntnisse über die Kultivierungsinformationen einer Zelllinie können Ihnen die Arbeit erleichtern. Dieser Abschnitt behandelt alle wichtigen Punkte zur Kultivierung der HEP3B-HBV-Zelllinie, darunter: Wie lang ist die Verdopplungszeit von HEP3B-Zellen? Wie lauten die HEP3B-Kultivierungsbedingungen? Wie kultiviert man HEP3B-HCC-Zellen?
Wichtige Punkte zur Kultivierung von HEP3B-Zellen
Verdopplungszeit:
Die Verdopplungszeit von HEP3B-Zellen beträgt etwa 36 Stunden.
Adhärent oder in Suspension:
Diese Hepatom-Zelllinie ist adhärent.
Teilungsverhältnis:
HEP3B-Zellen werden im Verhältnis 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Adhärente HEP3B-Zellen werden mit 1× PBS gespült und anschließend mit der Accutase-Dissoziationslösung inkubiert. Nach 8 bis 10 Minuten wird frisches Medium hinzugefügt und die Zellen werden zentrifugiert. Die geernteten Zellen werden anschließend vorsichtig resuspendiert und in Flaschen mit Kulturmedium im empfohlenen Teilungsverhältnis überführt.
Wachstumsmedium:
Zur Kultivierung von HEP3B-Zellen wird EMEM-Medium verwendet, das 10 % FBS, 2,2 g/l NaHCO₃, 2 mM L-Glutamin und Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) enthält.
Wachstumsbedingungen:
HEP3B-Zellen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C mit einer kontinuierlichen CO₂-Zufuhr von 5 % kultiviert.
Lagerung:
Gefrorene HEP3B-Zellen werden bei einer Temperatur unter -150 °C in einem elektrischen Gefrierschrank oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert.
Einfrierverfahren und Medium:
Das für HEP3B-Zellen empfohlene Einfriermedium ist CM-1 oder CM-ACF. Die Zellen werden mittels eines langsamen Einfrierverfahrens eingefroren, bei dem die Temperatur nur um 1 °C pro Minute sinkt, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten.
Auftauprozess:
Gefrorene Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem auf 37 °C voreingestellten Wasserbad aufgetaut. Anschließend werden diese Zellen in das frische Wachstumsmedium gegeben und zentrifugiert, um Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Die gewonnenen Zellen werden resuspendiert und zur Kultivierung in neue Flaschen gegeben.
Biosicherheitsstufe:
Für die HEP3B-Zellkultur ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich.
HEP3B-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
HEP3B ist eine weit verbreitete Zelllinie für das hepatozelluläre Karzinom. In diesem Abschnitt werden einige wichtige Vorteile und Einschränkungen dieser Hepatomzellen beleuchtet.
Vorteile
Die Hauptvorteile von HEP3B-Zellen sind:
Einfache Kultivierung
HEP3B-Zellen stellen keine hohen Anforderungen an die Zellkultur, wodurch sie in einem Forschungslabor einfach zu handhaben und zu pflegen sind. Dies vereinfacht die Versuchsabläufe.
Hohe Transfektionseffizienz
HEP3B-Zellen weisen eine bemerkenswerte Transfektionseffizienz auf, weshalb sie in der Genmanipulation und in Studien zur Genexpression weit verbreitet sind.
Tumorigenität
HEP3B ist eine tumorigenische Hepatozellkarzinom-Zelllinie, die bei Injektion in eine immunsupprimierte Maus Tumore bilden kann. Dies unterstützt die Untersuchung des Fortschreitens und der Entwicklung von Krebs unter Verwendung von HEP3B-Xenotransplantatmodellen.
HEP3B-P53-Status
HEP3B-Zellen weisen eine P53-Genmutation auf, die der bei Leberzellkarzinomen (HCC) und anderen Krebsarten ähnelt, wodurch sie für die Untersuchung der Auswirkungen von P53-Mutationen auf das Krebswachstum, die Entwicklung und das Fortschreiten von Krebs relevant sind.
Einschränkungen
Die mit der HEP3B-Zelllinie verbundene Einschränkung ist:
In-vitro-Zellmodell
Die HEP3B-Zelllinie dient als In-vitro-Modell für hepatozelluläre Karzinomzellen (HCC). Sie spiegelt jedoch möglicherweise nicht vollständig die Komplexität des HCC wider, wie sie in lebenden Organismen vorliegt. Folglich können sich die experimentellen Ergebnisse in vitro von denen unterscheiden, die in vivo beobachtet werden.
Anwendungen von HEP3B-Zellen in der Forschung
Die HEP3B-Zelllinie bietet zahlreiche Anwendungsmöglichkeiten in der biomedizinischen Forschung. Zu den wichtigsten Forschungsanwendungen der HEP3B-Zellen gehören:
- Krebsbiologie: HEP3B ist eine menschliche hepatozelluläre Karzinom-Zelllinie. Sie ist ein unschätzbares Zellmodell zur Untersuchung der zellulären und molekularen Mechanismen, die der Entstehung und dem Fortschreiten des HCC zugrunde liegen. Forscher nutzen diese Zellen, um genetische Mutationen, zelluläre Prozesse und zelluläre Signalwege im Zusammenhang mit Leberkrebs zu untersuchen. So wurde beispielsweise in einer Studie mit HEP3B-Zellen festgestellt, dass microRNA-223-3p die Komponenten des NLRP3-Inflammasoms reguliert, die Proliferation hemmt und die Apoptose von HEP3B-Hepatokarzinomzellen verstärkt [2].
- Wirkstoffscreening und -entwicklung: Die HEP3B-Zelllinie wird auch zum Testen, Screenen und Entwickeln neuartiger Therapeutika gegen Leberkarzinome verwendet. Darüber hinaus dient sie zur Bewertung der Toxizität und Wirksamkeit verschiedener Krebsmedikamente und -behandlungen. Forscher nutzten diese Hepatomzellen auch zur Untersuchung des Arzneimittelstoffwechsels. Unter Verwendung von HEP3B-Zellen bewerteten Forscher das zytotoxische Potenzial eines Pflanzenextrakts aus Cotinus coggygria auf HEP3B-Hepatozytenkarzinomzellen [3].
- Virusinfektionen: HEP3B ist eine Hepatitis-B-Virus-positive Zelllinie; daher wird sie zur Untersuchung von Virusinfektionen eingesetzt, die zur Entstehung von Leberkrebs führen können, d. h. HBV und HCV. Dies kann zu einem besseren Verständnis von Virusinfektionen beitragen und die Entwicklung potenzieller antiviraler Therapien fördern. So untersuchte beispielsweise eine Studie HEP3B-Hepatozyten-Krebszellen und untersuchte die Bedeutung der Ubiquitinierung für die Vermehrung des Hepatitis-C-Virus. Die Ergebnisse deuteten darauf hin, dass die Ubiquitin-spezifische Protease 15 (USP15) an der Vermehrung von HCV beteiligt ist, indem sie hepatozytenspezifische Funktionen reguliert, darunter die Bildung von Lipidtröpfchen und die HCV-RNA-Translation [4].
5. Veröffentlichungen zur HEP3B-Zelllinie
Dieser Abschnitt des Artikels behandelt einige interessante Forschungsarbeiten zu HEP3B-Zellen.
Diese Veröffentlichung in Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) legte nahe, dass durch Luteolin induzierter Stress im endoplasmatischen Retikulum in P53-defizienten HEP3B-Zellen auf P53-unabhängige Weise eine antitumorale Wirkung entfalten könnte.
Mögliche Bekämpfung von Hep3B-Leberkrebszellen durch aus Avicennia marina isoliertes Lupeol
Diese Studie in „Archiv der Pharmazie“ (2021) schlug das pentacyclische Triterpenoid Lupeol als potenziellen Wirkstoff gegen HEP3B-Zellen vor.
Dieser Artikel wurde in Molecular Medicine Reports (2017) veröffentlicht. Die Studienergebnisse zeigen, dass der Ethanolextrakt aus Cnidium monnieri (L.) Cusson durch die Regulierung des p53- und des Akt/GSK-3β-Signalwegs Zelltod (Apoptose) und einen Zellzyklusstillstand in den Hepatokarzinomzellen HepG2 und HEP3B induziert.
Diese in „Biomolecules and Therapeutics“ (2020) veröffentlichte Studie legte nahe, dass Auranofin eine synergistische Wirkung zeigt und die durch Sulforaphan vermittelte Apoptose von HEP3B-Zellen über die Aktivierung des PI3K/AKT-Signalwegs fördert.
Dieser Forschungsartikel in BioFactors (2023) legt nahe, dass Circular RNA-0072309 durch die Bindung an miRNA-665 eine antitumorale Wirkung in HEP3B-Zellen des Leberzellkarzinoms ausübt.
Ressourcen zur HEP3B-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Im Folgenden finden Sie einige Ressourcen zu HEP3B-Zellen:
- HEP3B-Transfektion: In diesem Video wird das Transfektionsprotokoll für HEP3B-Zellen erläutert.
- HEP3B-Transfektionseffizienz: Über diesen Link erfahren Sie mehr über die Zusammensetzung des HEP3B-DMEM-Mediums, die Zellpassagierung und das Transfektionsprotokoll für HEP3B-Zellen. Darüber hinaus enthält er Informationen zur Optimierung des HEP3B-Lipofectamine-3000-Reagenzes in Ihrem Transfektionsprotokoll.
Der folgende Link enthält das HEP3B-Zellkulturprotokoll:
- HEP3B-Kulturbedingungen: Über diesen Link erfahren Sie mehr über das Protokoll zur Handhabung und Pflege von Huh7- und HEP3B-Kulturen.
- HEP3B-Zellen: Diese Website bietet zahlreiche Informationen zu HEP3B-Zellen, einschließlich HEP3B-Medien, dem Protokoll für die Zellteilung, das Auftauen sowie den Umgang mit proliferativen und kryokonservierten Kulturen.
Referenzen
- Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Herkunft und Eigenschaften von Leberzellkarzinom-Zelllinien. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): S. 1040.
- Wan, L., et al., miRNA-223-3p reguliert NLRP3, um die Apoptose zu fördern und die Proliferation von Hep3B-Zellen zu hemmen. Experimental and therapeutic medicine, 2018. 15(3): S. 2429–2435.
- Danjolli-Hashani, D. und S. Selen-Isbilir, Zytotoxische Wirkung von Cotinus-coggygria-Extrakt auf die Hep3B-Krebszelllinie. Natural Product Research, 2022: S. 1–4.
- Kusakabe, S. et al., USP15 ist an der Vermehrung des Hepatitis-C-Virus durch die Regulierung der viralen RNA-Translation und der Bildung von Lipidtröpfchen beteiligt. Journal of Virology, 2019. 93(6): S. 10.1128/jvi.01708-18.