B16-Zellen - Grundlegender Leitfaden zu B16-Melanomzellen in der onkologischen Forschung

B16 ist die Hautkrebs-Zelllinie (Melanom) von Mäusen. Diese Zelllinie ist ein wirksames In-vitro-Modell für die Untersuchung menschlicher Hautkrebse. Sie wird häufig verwendet, um die Bildung von soliden Tumoren und die Metastasierung von Krebszellen zu untersuchen.

Dieser Artikel soll Ihnen helfen, die Grundlagen der B16-Melanom-Zelllinie zu verstehen. Er geht insbesondere auf Folgendes ein:

1.allgemeine Merkmale und Ursprung der B16-Zelllinie

In diesem Abschnitt des Artikels werden die charakteristischen Merkmale der B16-Melanom-Zelllinie behandelt. Sie werden die Antworten auf die folgenden häufig gestellten Fragen erfahren. Zum Beispiel: Was ist die B16-Krebszelllinie? Woher stammen die B16-Zellen? Welche Größe haben die B16-Zellen?

Die B16-Zelllinie wurde 1954 entwickelt. Diese Zellen wurden von C57BL/6J-Mäusen gewonnen, die in den Jackson Laboratories in Maine spontan einen Tumor in der Haut bekamen.
Es handelt sich um melaninproduzierende Epithelzellen, die die Fähigkeit haben, in Milz, Leber und Lunge zu metastasieren.
Die B16-Melanomzellen wachsen in Monolayern und weisen eine epithelähnliche und spindelförmige Zellmorphologie auf.
Die Größe der B16-Zelllinie beträgt etwa 15,4 μm.
Es gibt verschiedene Subklone von B16-Zellen, darunter B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 und B16F10. Diese Sublinien unterscheiden sich von den ursprünglichen B16-Zellen und weisen einige spezifische Merkmale auf. So unterscheiden sie sich beispielsweise in der Morphologie, der Zellgröße und anderen Eigenschaften. B16F10 hat ein hohes Lungenmetastasierungsvermögen, und B164A5 ist die aggressivste Hautkrebszelllinie im Vergleich zu B16F10, B16-GMCSF und B16FLT3 [1].

3D-Animation einer Nahaufnahme eines wachsenden Hautkrebses, z. B. eines malignen Melanoms, der das umliegende Gewebe entzündet.

2.informationen zur Kultivierung der B16-Zelllinie

Bevor Sie eine Zelllinie erhalten oder kultivieren, suchen Sie vielleicht nach wichtigen Informationen über Verdopplungszeit, Zelltyp, Wachstumsmedien, Kultivierungsbedingungen usw. In diesem Abschnitt finden Sie alle notwendigen Informationen zur Kultivierung von B16-Zellen.

Wichtige Punkte für die Kultivierung von B16-Zellen

Populationsverdopplungszeit:	Die mittlere Populationsverdopplungszeit für B16-Zellen wird auf 24 Stunden geschätzt.
Adhärent oder in Suspension:	B16-Zellen sind adhärent und wachsen in Monolayern.
Aussaat-Dichte:	Es wird empfohlen, B16-Zellen mit einer Zelldichte von 1 bis 2 x¹⁰⁴ ^Zellen/cm2 auszusäen. Anhaftende B16-Zellen werden mit 1 x PBS gespült und mit Accutase-Lösung von der Oberfläche abgelöst. Die Zellen werden zentrifugiert, und das Zellpellet wird im Wachstumsmedium resuspendiert. Später werden diese Zellen zum Wachstum in einen neuen Kolben gegeben.
Wachstumsmedium:	B16-Zellen werden in EMEM-Medium (Eagle's Minimum Essential Medium) mit 10 % fötalem Rinderserum (FBS) kultiviert. Das Wachstumsmedium sollte 2-3 Mal pro Woche erneuert werden.
Wachstumsbedingungen:	Die B16-Zelllinie wird in einem befeuchteten Inkubator mit 5 %_CO2-Zufuhr und einer Temperatur von 37 °C gezüchtet.
Lagerung:	Diese Zellen werden bei einer Temperatur unter -150 °C oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu schützen.
Einfrierverfahren und Medium:	Zum Einfrieren von B16-Zellen wird CM-1- oder CM-ACF-Einfriermedium verwendet, wobei ein langsames Einfrierverfahren angewendet wird.
Auftauprozess:	Die eingefrorenen B16-Zellen werden bei 37 °C in einem Wasserbad aufgetaut, das ein antimikrobielles Mittel enthält. Die aufgetauten Zellen können direkt kultiviert werden, indem man sie in Flaschen mit Wachstumsmedium gibt. Außerdem können diese Zellen zentrifugiert werden, um die Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen, und dann in neuem Medium kultiviert werden.
Biosicherheitsstufe:	Die B16-Zelllinie sollte in einem Labor der Biosicherheitsstufe 1 gehandhabt oder gepflegt werden.

Semikonfluente Schicht von B16-Melanomzellen unter 10- und 20-facher Vergrößerung.

3. b16-Zelllinie: Vorteile und Nachteile

Wie andere Zelllinien besitzt auch die B16-Zelllinie eine einzigartige Mischung aus Vor- und Nachteilen. Einige wichtige Vor- und Nachteile dieser Melanomzelllinie sind in diesem Abschnitt aufgeführt.

Vorteile

B16 ist das erste wirksame murine Instrument, das aufgrund seiner Vorteile in der Metastasenforschung weit verbreitet ist. Einige Vorteile dieser Hautkrebs-Zelllinie sind:

Leicht zu züchten	Die B16-Zelllinie ist in Forschungslabors leicht zu züchten. Sie wird häufig zur Untersuchung der Biologie von Krebszellen, von Signalwegen und vielem mehr verwendet.
Schnell wachsend	Die B16-Melanomzelllinie weist eine hohe Proliferationsrate auf und eignet sich daher für die Untersuchung von Zellteilungs- und Wachstumsprozessen.
Tumorigenität	B16 ist eine tumorigene Zelllinie mit tumorähnlichen Eigenschaften wie Invasion, Migration und Proliferation. Sie eignet sich für die Untersuchung der Tumorbildung, des Fortschreitens und der Metastasierung.

Nachteile

Die mit der B16-Zelllinie verbundenen Nachteile sind:

Mangelnde Relevanz für den Menschen	Da es sich bei der B16-Zelllinie um eine Mausmelanom-Zelllinie handelt, repräsentiert sie möglicherweise nicht die Biologie des menschlichen Hautkrebses, was die Übertragbarkeit der Forschungsergebnisse einschränkt.
Heterogenität	B16-Zellen sind heterogen und weisen innerhalb derselben Kultur unterschiedliche genetische und phänotypische Eigenschaften auf. Dies kann die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit der Ergebnisse beeinträchtigen.

4. anwendungen von B16-Zellen

Die B16-Zelllinie wird in großem Umfang in Forschungsstudien verwendet. Einige vielversprechende Anwendungen dieser Zelllinie sind:

Tumorbiologie: Diese murine Hautkrebszelllinie ist tumorigen und wird häufig zum Verständnis der Tumorbiologie verwendet. Mehrere Studien wurden durchgeführt, um die zellulären Mechanismen zu erforschen, die dem Wachstum, der Vermehrung und der Metastasierung von Tumorzellen zugrunde liegen, wobei B16-Zellen verwendet wurden. In einer im Jahr 2020 durchgeführten Forschungsstudie wurde anhand von B16-Zellen die Rolle der langen nicht-kodierenden RNA, LncRNA MEG3, bei der Entstehung, dem Wachstum und der Metastasierung von Melanomen untersucht. Dabei wurde festgestellt, dass die nichtcodierende RNA die miRNA-21/E-Cadherin-Achse moduliert, um diese zellulären Ereignisse zu stimulieren [2]. In ähnlicher Weise wurde die mögliche Rolle der Notch1-Signalisierung bei der tumorbedingten Immunsuppression anhand von B16-Zellen untersucht [3].
Entdeckung von Medikamenten: B16-Zellen werden zur Validierung und Prüfung der potenziellen therapeutischen Wirkung von Arzneimittelkandidaten verwendet. In einer Studie wurde die Anti-Tumor-Wirkung von Neogamboginsäure, einer natürlichen Verbindung, mit einer B16-Zelllinie untersucht. Die Ergebnisse der Studie zeigten, dass diese Verbindung den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg moduliert und so den Tod der Krebszellen verursacht [4]. Eine andere Studie untersuchte die Anti-Melanom-Wirkung von Ginsenosid Rg3, einem Saponin, anhand der B16-Zelllinie. Die Untersuchung ergab, dass diese natürliche Verbindung eine Anti-Tumor-Wirkung hat, indem sie die ERK- und Akt-Signalwege herunterreguliert [5].

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Produktnummer: 305154

5.forschungspublikationen mit B16-Zellen

Hier finden Sie einige wichtige Forschungspublikationen, die sich mit der B16-Melanomzelllinie befassen.

LncRNA MEG3 fördert Wachstum, Metastasierung und Bildung von Melanomen durch Modulation der miR-21/E-Cadherin-Achse

In dieser Veröffentlichung in der Zeitschrift Cancer Cell International (2020) wird vorgeschlagen, dass die lange nichtkodierende RNA MEG3 die Bildung, das Wachstum und die Metastasierung von B16-Melanomzellen durch Modulation der miRNA-21/E-Cadherin-Achse fördert.

Ein neuartiges Psoralen-Derivat - MPFC - fördert die Melanogenese durch Aktivierung der p38 MAPK- und PKA-Signalwege in B16-Zellen

Diese Arbeit wurde 2018 im International Journal of Molecular Medicine veröffentlicht. In dieser Studie wurden die melanogene Wirkung und die Mechanismen eines Psoralen-Derivats - 4-Methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g]chromen-2-on (MPFC) - in B16-Zellen untersucht. Die Studie legt nahe, dass dieses Derivat die Melanogenese durch Stimulierung der PKA- und p38-MAPK-Zellsignalisierung fördert.

Notch1-Signalisierung in Melanomzellen förderte die tumorinduzierte Immunsuppression durch Hochregulierung von TGF-β1

Diese Forschungsarbeit wurde 2018 im Journal of Experimental & Clinical Cancer Research veröffentlicht. Die Ergebnisse der Studie deuten darauf hin, dass die Aktivierung der Notch1-Signalisierung in B16-Zellen die antitumorale Immunität durch eine Hochregulierung des TGF-β1-Gens verhindern kann.

Neogamboginsäure induziert die Apoptose von B16-Melanomzellen über den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg

Diese Studie wurde von Chunlan Wu und seinen Kollegen im Jahr 2020 durchgeführt und in der Zeitschrift Acta Biochimica Polonica veröffentlicht. Darin wird festgestellt, dass Neogamboginsäure, eine natürliche Verbindung, den Tod von B16-Melanomzellen durch Modulation der PI3K/Akt/mTOR-Signalkaskade bewirken kann.

Ein Iridium(III)-Komplex als wirksames Krebsmittel induziert Apoptose und Autophagie in B16-Zellen durch Hemmung des AKT/mTOR-Signalwegs

Diese Forschungsarbeit wurde 2018 im European Journal of Medicinal Chemistry veröffentlicht. In dieser Studie untersuchten die Forscher die Anti-Krebs-Aktivität einer Verbindung, eines Iridium(III)-Komplexes, an B16-Melanomzellen.

Ailanthon induziert Zellzyklus-Stillstand und Apoptose in Melanomzellen B16 und A375

Diese Studie legt nahe, dass der pflanzliche Bioaktivstoff Ailanthon ein krebsbekämpfendes Potenzial besitzt, da er Apoptose und Zellzyklusstillstand in B16- und A375-Melanomzellen auslösen kann. Diese Arbeit wurde 2019 in Biomolecules veröffentlicht.

6. ressourcen für die B16-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

Es gibt nur wenige Ressourcen zur B16-Zelllinie, die ihre Kultivierungs- und Transfektionsprotokolle erklären.

Kultivierung von Melanomzellen: Dieses Video enthält wertvolle Tipps für die Kultivierung von Melanomzelllinien.
Subkultivierung einer Zelllinie: Dieses Video erklärt ein allgemeines Subkultivierungsprotokoll für eine Zelllinie.
Transfektion der B16F10-Zelllinie: Dieses Video erklärt das Transfektionsprotokoll für eine Unterlinie von B16-Melanomzellen. Es kann Ihnen helfen, das Transfektionsprotokoll für B16-Zellen zu optimieren.

Im Folgenden finden Sie einige Zellkulturprotokolle für B16-Zellen.

Kultivierung von B16-Zellen: Diese Website enthält alle notwendigen Informationen zur Kultivierung von B16-Zellen, einschließlich Wachstumsmedien, Subkultivierung, Auftauen und Einfrieren von Zellen.

Referenzen

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J skin. International Journal of Experimental Pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 fördert Melanomwachstum, Metastasierung und Bildung durch Modulation der miR-21/E-Cadherin-Achse. Cancer Cell International, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1 signaling in melanoma cells promoted tumor-induced immunosuppression via upregulation of TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al. Neogamboginsäure induziert die Apoptose von B16-Melanomzellen über den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumoraktivität von Ginsenosid Rg3 bei Melanomen durch Herunterregulieren der ERK- und Akt-Signalwege. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.