Zur Homepage gehen

B16-Zellen – Ein grundlegender Leitfaden zu B16-Melanomzellen in der onkologischen Forschung

B16 ist eine aus Mäusen stammende Zelllinie für Hautkrebs (Melanom). Diese Zelllinie ist ein effektives In-vitro-Modell zur Untersuchung von Hautkrebs beim Menschen. Sie wird häufig zur Erforschung der Bildung solider Tumoren und der Metastasierung von Krebszellen eingesetzt.

📋 B16-Zelllinie – Wissenswertes
Wachstumsmedium
B16-Zellen werden in EMEM-Medium (Eagle’s Minimum Essential Medium) kultiviert, das 10 % fötales Rinderserum (FBS) enthält. Das Wachstumsmedium sollte 2–3 Mal pro Woche erneuert werden.
Verdopplungszeit
Die mittlere Verdopplungszeit der B16-Zellpopulation wird auf 24 Stunden geschätzt.
Wachstumsart
B16-Zellen sind adhärent und wachsen in Monolayern.
Sicherheitsstufe
BSL-1
Erhältlich bei
Cytion – B16 bestellen

Dieser Artikel soll Ihnen helfen, die Grundlagen der B16-Melanomzelllinie zu verstehen. Konkret werden folgende Themen behandelt:

Allgemeine Merkmale und Herkunft der B16-Zelllinie

Dieser Abschnitt des Artikels behandelt die charakteristischen Merkmale der B16-Melanomzelllinie. Sie erhalten Antworten auf die folgenden häufig gestellten Fragen. Zum Beispiel: Was ist die B16-Krebszelllinie? Woher stammen B16-Zellen? Wie groß sind B16-Zellen?

  • Die B16-Zelllinie wurde 1954 etabliert. Diese Zellen stammen von C57BL/6J-Mäusen, bei denen in den Jackson Laboratories in Maine spontan ein Hauttumor auftrat.
  • Es handelt sich um melaninproduzierende Epithelzellen, die die Fähigkeit besitzen, in Milz, Leber und Lunge zu metastasieren.
  • Die Melanom-B16-Zellen wachsen als Monoschichten und weisen eine epithelähnliche und spindelförmige Zellmorphologie auf.
  • Die Größe der B16-Zelllinie beträgt etwa 15,4 μm.
  • Es gibt verschiedene Subklone von B16-Zellen, darunter B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 und B16F10. Diese Sublinien unterscheiden sich von den ursprünglichen B16-Zellen und weisen einige spezifische Merkmale auf. So weisen sie beispielsweise Unterschiede in der Morphologie, der Zellgröße und anderen Eigenschaften auf. B16F10 verfügt über eine hohe Fähigkeit zur Lungenmetastasierung, und B164A5 ist im Vergleich zu B16F10, B16-GMCSF und B16FLT3 die aggressivste Hautkrebszelllinie [1].

3D-Animation einer Nahaufnahme eines sich ausbreitenden Hautkrebses, beispielsweise eines malignen Melanoms, das das umliegende Gewebe entzündet.

Informationen zur Kultivierung der B16-Zelllinie

Bevor Sie eine Zelllinie pflegen oder kultivieren, benötigen Sie möglicherweise wichtige Informationen zu Verdopplungszeit, Zelltyp, Wachstumsmedien, Kulturbedingungen usw. Dieser Abschnitt enthält alle notwendigen Informationen zur Kultivierung von B16-Zellen.

Wichtige Punkte zur Kultivierung von B16-Zellen

Populationsverdopplungszeit:

Die mittlere Verdopplungszeit der Population für B16-Zellen wird auf 24 Stunden geschätzt.

Adhärent oder in Suspension:

B16-Zellen sind adhärent und wachsen in Monolayern.

Aussaatdichte:

Es wird empfohlen, B16-Zellen mit einer Zelldichte von 1 bis 2 × 10 Zellen/cm² auszusäen. Anghaftete B16-Zellen werden mit 1× PBS gespült und mit Accutase-Lösung von der Oberfläche gelöst. Die Zellen werden zentrifugiert und das Zellpellet im Wachstumsmedium resuspendiert. Anschließend werden diese Zellen zur Kultivierung in eine neue Flasche überführt.

Wachstumsmedium:

B16-Zellen werden in EMEM-Medium (Eagle's Minimum Essential Medium) kultiviert, das 10 % fötales Rinderserum (FBS) enthält. Das Wachstumsmedium sollte 2–3 Mal pro Woche erneuert werden.

Wachstumsbedingungen:

Zur Kultivierung der B16-Zelllinie wird ein befeuchteter Inkubator mit einer CO-Zufuhr von 5 % und einer Temperatur von 37 °C verwendet.

Lagerung:

Diese Zellen werden bei einer Temperatur unter -150 °C oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.

Einfrierverfahren und Medium:

Zum Einfrieren der B16-Zellen im Langsamgefrierverfahren wird das Einfriermedium CM-1 oder CM-ACF verwendet.

Auftauprozess:

Gefrorene B16-Zellen werden bei 37 °C in einem Wasserbad, das ein antimikrobielles Mittel enthält, aufgetaut. Aufgetaute Zellen können direkt kultiviert werden, indem sie in Flaschen mit Wachstumsmedium gegeben werden. Außerdem können diese Zellen zentrifugiert werden, um Bestandteile des Einfriermediums zu entfernen, und anschließend in neuem Medium kultiviert werden.

Biosicherheitsstufe:

Die B16-Zelllinie sollte in einem Labor der Biosicherheitsstufe 1 gehandhabt oder gehalten werden.

B16 cells

Teilweise konfluente Zellschicht aus B16-Melanomzellen bei 10-facher und 20-facher Vergrößerung.

B16-Zelllinie: Vor- und Nachteile

Wie andere Zelllinien weist auch B16 eine einzigartige Mischung aus Vor- und Nachteilen auf. Einige wesentliche Vor- und Nachteile dieser Melanom-Zelllinie sind in diesem Abschnitt aufgeführt.

Vorteile

B16 ist das erste wirksame murine Modell, das aufgrund seiner Vorteile in der Metastasenforschung weit verbreitet ist. Einige Vorteile dieser Hautkrebs-Zelllinie sind:

Einfach zu kultivieren

Die B16-Zelllinie lässt sich in Forschungslabors leicht kultivieren. Sie wird häufig zur Untersuchung der Biologie von Krebszellen, von Signalwegen und vielem mehr eingesetzt.

Schnelles Wachstum

Die B16-Melanomzelllinie weist eine hohe Proliferationsrate auf, wodurch sie sich für die Untersuchung von Zellteilung und Wachstumsprozessen eignet.

Tumorigenität

B16 ist eine tumorigenische Zelllinie mit tumorähnlichen Eigenschaften wie Invasion, Migration und Proliferation. Sie ist wertvoll für die Untersuchung von Tumorbildung, -progression und -metastasierung.

 

Nachteile

Die mit der B16-Zelllinie verbundenen Nachteile sind:

Mangelnde Relevanz für den Menschen

Da es sich bei B16 um eine Maus-Melanom-Zelllinie handelt, spiegelt sie die Biologie des menschlichen Hautkrebses möglicherweise nicht genau wider, was die Übertragbarkeit der Forschungsergebnisse einschränkt.

Heterogenität

B16-Zellen sind heterogen und weisen innerhalb derselben Kultur unterschiedliche genetische und phänotypische Eigenschaften auf. Dies kann die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit der Ergebnisse beeinträchtigen.

 

Anwendungen von B16-Zellen

Die B16-Zelllinie wird in Forschungsstudien intensiv genutzt. Einige vielversprechende Anwendungsbereiche dieser Zelllinie sind:

  • Tumorbiologie: Diese murine Hautkrebszelllinie ist tumorigen und wird häufig eingesetzt, um die Tumorbiologie zu verstehen. Es wurden mehrere Studien durchgeführt, um die zellulären Mechanismen hinter dem Wachstum, der Proliferation und der Metastasierung von Tumorzellen unter Verwendung von B16-Zellen zu erforschen. Eine im Jahr 2020 durchgeführte Forschungsstudie nutzte B16-Zellen, um die Rolle der langen nicht-kodierenden RNA, LncRNA MEG3, bei der Entstehung, dem Wachstum und der Metastasierung von Melanomen zu untersuchen. Diese Forschung ergab, dass die nicht-kodierende RNA die miRNA-21/E-Cadherin-Achse moduliert, um diese zellulären Vorgänge zu stimulieren [2]. In ähnlicher Weise wurde eine Studie durchgeführt, um die potenzielle Rolle der Notch1-Signalübertragung bei der tumorinduzierten Immunsuppression unter Verwendung von B16-Zellen zu untersuchen [3].
  • Arzneimittelforschung: B16-Zellen werden verwendet, um die potenziellen therapeutischen Wirkungen von Wirkstoffkandidaten zu validieren und zu testen. Eine Studie untersuchte die Antitumorwirkung von Neogamboginsäure, einer natürlichen Verbindung, unter Verwendung einer B16-Zelllinie. Die Studienergebnisse zeigten, dass diese Verbindung den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg moduliert, um den Tod von Krebszellen zu bewirken [4]. Eine weitere Studie untersuchte die antimelanomische Wirkung von Ginsenosid Rg3, einem Saponin, unter Verwendung der B16-Zelllinie. Die Forschung legte nahe, dass diese natürliche Verbindung durch die Herunterregulierung der ERK- und Akt-Signalwege eine Antitumoraktivität auslöste [5].

 

5. Forschungsveröffentlichungen zur B16-Zelllinie

Hier finden Sie einige wichtige Forschungsveröffentlichungen zur B16-Melanomzelllinie.

LncRNA MEG3 fördert das Wachstum, die Metastasierung und die Bildung von Melanomen durch Modulation der miR-21/E-Cadherin-Achse

Diese Veröffentlichung in der Fachzeitschrift Cancer Cell International (2020) legt nahe, dass die lange nicht-kodierende RNA MEG3 die Bildung, das Wachstum und die Metastasierung von B16-Melanomzellen durch Modulation der miRNA-21/E-Cadherin-Achse verstärkt.

Ein neuartiges Psoralen-Derivat – MPFC – verstärkt die Melanogenese durch Aktivierung der p38-MAPK- und PKA-Signalwege in B16-Zellen

Dieser Artikel wurde 2018 im International Journal of Molecular Medicine veröffentlicht. Diese Studie untersuchte die melanogene Wirkung und die Mechanismen eines Psoralen-Derivats – 4-Methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g]chromen-2-on (MPFC) – in B16-Zellen. Die Studie legte nahe, dass dieses Derivat die Melanogenese durch Stimulierung der PKA- und p38-MAPK-Zellsignalwege fördert.

Notch1-Signalweg in Melanomzellen förderte die tumorinduzierte Immunsuppression durch Hochregulierung von TGF-β1

Diese Forschungsergebnisse wurden 2018 im Journal of Experimental & Clinical Cancer Research veröffentlicht. Die Studienergebnisse legen nahe, dass die Aktivierung der Notch1-Signalübertragung in B16-Zellen die Antitumorimmunität verhindern könnte, indem sie die Expression des TGF-β1-Gens erhöht.

Neogamboginsäure induziert die Apoptose von B16-Melanomzellen über den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg

Diese Studie wurde 2020 von Chunlan Wu und seinen Kollegen durchgeführt und in der Fachzeitschrift Acta Biochimica Polonica veröffentlicht. Die Studie besagt, dass Neogamboginsäure, eine natürliche Verbindung, den Zelltod von B16-Melanomzellen durch Modulation der PI3K/Akt/mTOR-Signalkaskade bewirken kann.

Ein Iridium(III)-Komplex als wirksames Antikrebsmittel induziert Apoptose und Autophagie in B16-Zellen durch Hemmung des AKT/mTOR-Signalwegs

Diese Forschungsarbeit wurde 2018 im European Journal of Medicinal Chemistry veröffentlicht. In dieser Studie untersuchten die Forscher die krebshemmende Wirkung einer Verbindung, eines Iridium(III)-Komplexes, an B16-Melanomzellen.

Ailanthon induziert einen Zellzyklusstillstand und Apoptose in den Melanomzellen B16 und A375

Diese Studie legte nahe, dass der pflanzliche Wirkstoff Ailanthon über krebshemmendes Potenzial verfügt, da er in B16- und A375-Melanomzellen Apoptose und einen Zellzyklusstillstand induzieren kann. Diese Arbeit wurde 2019 in „Biomolecules“ veröffentlicht.

Ressourcen zur B16-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr

Es gibt nur wenige Ressourcen zur B16-Zelllinie, die deren Kultivierungs- und Transfektionsprotokolle erläutern.

Im Folgenden finden Sie einige Zellkulturprotokolle für B16-Zellen. 

  • Kultivierung von B16-Zellen: Diese Website enthält alle notwendigen Informationen zur Kultivierung von B16-Zellen, einschließlich Wachstumsmedien, Subkultivierung, Auftauen und Einfrieren von Zellen.

Referenzen

  1. Danciu, C., et al., Verhalten von vier verschiedenen B16-Maus-Melanomzell-Sublinien: C57 BL/6J-Haut. International Journal of Experimental Pathology, 2015. 96(2): S. 73–80.
  2. Wu, L., et al., LncRNA MEG3 fördert das Wachstum, die Metastasierung und die Bildung von Melanomen durch Modulation der miR-21/E-Cadherin-Achse. Cancer Cell International, 2020. 20: S. 1–14.
  3. Yang, Z., et al., Die Notch1-Signalübertragung in Melanomzellen förderte die tumorinduzierte Immunsuppression durch Hochregulierung von TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): S. 1–13.
  4. Wu, C., et al., Neogamboginsäure induziert die Apoptose von Melanom-B16-Zellen über den PI3K/Akt/mTOR-Signalweg. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): S. 197–202.
  5. Meng, L., et al., Antitumoraktivität von Ginsenosid Rg3 bei Melanomen durch Herunterregulierung der ERK- und Akt-Signalwege. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): S. 2069–2079.

 

Wir haben festgestellt, dass Sie sich in einem anderen Land befinden oder eine andere Browsersprache als die derzeit ausgewählte verwenden. Möchten Sie die vorgeschlagenen Einstellungen akzeptieren?

Schließen Sie