B16-F10-Zellen – Untersuchung der B16-F10-Melanomzelllinie in der Metastasenforschung
B16-F10-Zellen bilden eine Melanomzelllinie, die aus der Maus C57BL/6J gewonnen wurde. Sie finden breite Anwendung in der Hautkrebsforschung. Forscher nutzen diese Zellen, um die Entstehung und das Fortschreiten von Tumoren sowie therapeutische Maßnahmen zu untersuchen. Dieser Artikel behandelt die grundlegenden Aspekte der B16-F10-Melanomzellen. Insbesondere umfasst er:
- Wachstumsmedium
- B16-F10-Zellen werden im DMEM-Medium kultiviert. Das Medium wird mit 10 % FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/l NaHCO₃, 4,5 g/l Glukose und 1,0 mM Natriumpyruvat ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu gewährleisten. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
- Verdopplungszeit
- Die Verdopplungszeit von B16-F10-Zellen beträgt etwa 20,1 Stunden. Sie kann je nach Kulturbedingungen zwischen 17 und 21 Stunden variieren.
- Wachstumsart
- B16-F10 ist eine adhärente Zelllinie. Die Zellen wachsen schnell und bilden Monolayer.
- Biologische Sicherheitsstufe
- BSL-1
- Erhältlich bei
- Cytion – B16-F10 bestellen
- Herkunft und allgemeine Eigenschaften der Zelllinie B16-F10
- Informationen zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
- B16-F10-Zellen: Vor- und Nachteile
- Forschungsanwendungen von B16-F10-Zellen
- Publikationen zur B16-F10-Zelllinie
- Ressourcen zur B16-F10-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Herkunft und allgemeine Eigenschaften der B16-F10-Zelllinie
- Informationen zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
- B16-F10-Zellen: Vor- und Nachteile
- Forschungsanwendungen von B16-F10-Zellen
- 5. Veröffentlichungen zur B16-F10-Zelllinie
- Ressourcen zur B16-F10-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Häufig gestellte Fragen
Herkunft und allgemeine Eigenschaften der B16-F10-Zelllinie
Dieser Abschnitt gibt Ihnen Einblicke in die Herkunft und die besonderen Eigenschaften der B16-F10-Melanom-Tumorzellen. Er hilft Ihnen dabei, die Zelllinie effizient in Ihrer Forschungsarbeit einzusetzen. Im Wesentlichen erfahren Sie: Was sind B16-F10-Zellen? Wovon stammt B16F10 ab? Wie sieht die Morphologie der B16F10-Zelllinie aus? Wie groß ist die B16F10-Zelle?
- B16-F10 ist ein Subklon der B16-Tumorzelllinie, die aus Hautgewebe von C57BL/6J-Mäusen gewonnen wurde. Dabei wurden B16F10-Melanomzellen entwickelt, nachdem die B16-Linie intravenös in immunsupprimierte oder syngene Mäuse injiziert worden war. Diese Zellen wurden aufgrund ihres Potenzials ausgewählt, in vivo metastasierte Lungenkolonien zu bilden, und anschließend nach zehn Zyklen der Lungenkoloniebildung in vitro etabliert [1]. Sie wurde 1976 von Fidler und Kollegen entwickelt.
- B16-F10-Zelllinien haben ein epithelähnliches und spindelförmiges Erscheinungsbild.
- Die ungefähre Größe von B16-F10-Zellen beträgt 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1- und B16-F10-Zellen
B16-F1- und B16-F10-Zellen wurden aus der B16-Stammzelllinie gewonnen. Beide stammen aus derselben Quelle und weisen nahezu identische Eigenschaften auf. Der Hauptunterschied liegt jedoch in ihrer Metastasierungsfähigkeit. B16-F10-Zellen weisen ein hohes, während B16-F1-Zellen ein geringes Metastasierungspotenzial aufweisen [3].
Informationen zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
Bevor Sie eine Zelllinie handhaben und kultivieren, müssen Sie deren Verdopplungszeit, Wachstumsmedien, Bedingungen und Zellkulturprotokolle kennen. In diesem Abschnitt wird Folgendes behandelt: Wie lang ist die Verdopplungszeit von B16-F10-Zellen? Wie kultiviert man B16-F10-Zellen? Was sind die B16-F10-Zellmedien? Welche Kulturbedingungen werden für B16-F10-Zellen empfohlen?
Wichtige Punkte zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
Verdopplungszeit:
Die Verdopplungszeit von B16-F10-Zellen beträgt etwa 20,1 Stunden. Sie kann je nach Kulturbedingungen zwischen 17 und 21 Stunden liegen.
Adhärent oder in Suspension:
B16-F10 ist eine adhärente Zelllinie. Die Zellen wachsen schnell und bilden Monolayer.
Teilungsverhältnis:
B16-F10-Zellen werden mit einem Teilungsverhältnis von 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Die Zellen werden mit phosphatgepufferter Kochsalzlösung (1x) gewaschen und anschließend 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur mit Accutase-Passagelösung inkubiert. Den Zellen wird frisches Medium hinzugefügt und sie werden zentrifugiert. Das gewonnene Zellpellet wird erneut resuspendiert, und die Zellen werden entsprechend dem Teilungsverhältnis in die neue Flasche mit frischem Kulturmedium dispensiert.
Wachstumsmedium:
B16-F10-Zellen werden im DMEM-Medium kultiviert. Das Medium wird mit 10 % FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/l NaHCO₃, 4,5 g/l Glukose und 1,0 mM Natriumpyruvat ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu gewährleisten. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
Wachstumsbedingungen:
B16-F10-Zellen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C und einer CO₂-Zufuhr von 5 % gezüchtet.
Lagerung:
Gefrorene Zellen werden bei Temperaturen unter -150 °C in einem elektrischen Ultra-Tiefkühlschrank oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten.
Einfrierverfahren und Medium:
B16-F10-Zellen werden zur Lagerung in CM-1- oder CM-ACF-Medien eingefroren. Hierfür wird ein langsamer Einfrierprozess empfohlen, bei dem die Temperatur nur um 1 °C pro Minute sinkt, um einen Schock für die Zellen zu vermeiden.
Auftauprozess:
Gefrorene B16-F10-Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem auf 37 °C voreingestellten Wasserbad aufgetaut. Anschließend werden die Zellen in frisches Medium gegeben und zentrifugiert, um Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Die gewonnenen Zellen werden in einem Wachstumsmedium resuspendiert und zur Kultivierung in Flaschen überführt.
Biosicherheitsstufe:
Für die Handhabung und Aufbewahrung der B16-F10-Zelllinie ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich.
B16-F10-Zellen: Vor- und Nachteile
Wie andere Zelllinien weist auch B16-F10 einige Vor- und Nachteile auf. In diesem Abschnitt werden einige wesentliche Vor- und Nachteile dieser Hautmelanom-Zelllinie erörtert.
Vorteile
Die B16-F10-Zelllinie wird in der Krebsforschung häufig verwendet. Die Vorteile von B16-F10-Zellen sind:
Metastasierungspotenzial
Hautmelanom-B16F10-Zellen weisen ein hohes Metastasierungspotenzial auf, was sie für die Untersuchung von Krebsmetastasen und den zugrunde liegenden Mechanismen wertvoll macht.
In-vitro-Tumormodell
B16-F10-Zellen dienen als In-vitro-Modell zur Untersuchung des Fortschreitens und Wachstums von Krebs und helfen Forschern dabei, die zellulären und molekularen Mechanismen zu verstehen, die Krebs antreiben.
Nachteile
Die mit der B16-F10-Zelllinie verbundenen Nachteile sind:
Von der Maus stammende Zelllinie
B16-F10 ist eine aus Mäusen stammende Zelllinie, was ihre Anwendbarkeit auf humanspezifische Studien einschränkt. Forschungsergebnisse aus diesen Zellen lassen sich möglicherweise nicht immer direkt auf die menschliche Biologie übertragen.
Forschungsanwendungen von B16-F10-Zellen
Die B16-F10-Zelllinie wird in der Krebsforschung intensiv genutzt. Einige vielversprechende Anwendungsbereiche dieser Zelllinie werden hier erläutert.
- Krebsforschung: Die B16-F10-Zelllinie ist ein wertvolles Modell zur Untersuchung von Krebszellprozessen, darunter Proliferation, Invasion, Migration und Zelltod bzw. Apoptose. Außerdem hilft sie Forschern, Einblicke in die molekularen Mechanismen und Signalwege zu gewinnen, die diese zellulären Prozesse steuern. Eine 2018 durchgeführte Studie untersuchte die Rolle von CCR5 (C-C-Chemokinrezeptor Typ 5) bei der epithelial-mesenchymalen Zelltransition und der Metastasierung von Melanomzellen. Die Ergebnisse zeigten, dass ein CCR5-Mangel das Tumorwachstum und die Metastasierung hemmt, während eine hohe Expression zu verstärktem Wachstum und Metastasierung von B16-F10-Zellen führt. Weitere Forschungsergebnisse zeigten, dass CCR5 die TGFβ1-Expression reguliert, was wiederum die PI3K/AKT/GSK3β-Signalübertragung steuert und so den epithelial-mesenchymalen Übergang sowie die Zellmigration fördert [4].
- Arzneimitteltests und -entwicklung: B16F10-Melanomtumorzellen sind hochaggressiv und eignen sich daher für die Prüfung potenzieller Antitumormittel und -behandlungen. Forscher nutzen diese Zellen und bewerten die Wirkung verschiedener Verbindungen auf Zellwachstum, Proliferation und Metastasierung, was die Arzneimittelentwicklung unterstützt. Eine 2018 von Valentina Nanni und Kollegen durchgeführte Studie untersuchte die therapeutischen Wirkungen eines hydroalkoholischen Extrakts aus Spartiumjunceum-Blüten. Die Studie kam zu dem Ergebnis, dass der Blütenextrakt die Seneszenz in B16-F10-Zellen wirksam induzierte, was zu einer Unterdrückung des Zellwachstums und der Melanogenese führt und somit potenzielle krebsbekämpfende Wirkungen entfalten kann [5].
5. Veröffentlichungen zur B16-F10-Zelllinie
Hier sind einige wichtige Forschungsarbeiten zur Melanom-Zelllinie B16-F10:
Diese Studie wurde in Nutrients (2020) veröffentlicht. Sie legt nahe, dass der ethanolische Extrakt aus Sorghum bicolor eine antimelanogene Wirkung in B16/F10-Hautmelanomzellen hat.
Calcitriol hemmt die Proliferation und induziert möglicherweise Apoptose in B16–F10-Zellen
Die in Medical Science Monitor Basic Research (2022) veröffentlichte Studie legt nahe, dass das Medikament Calcitriol in B16-F10-Melanomzellen eine antitumorale Wirkung entfaltet, indem es die Proliferation hemmt und Apoptose induziert.
Dieser Artikel wurde in Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) veröffentlicht. Die Ergebnisse zeigten, dass Cardole, Resorcinol-Lipide, eine starke zytotoxische Wirkung auf die B16-F10-Zelllinie ausüben.
Die in „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018) veröffentlichte Studie untersuchte das antimetastatische Potenzial von Ginkgo-biloba-Exokarp-Extrakt unter Verwendung von B16-F10-Zellen.
Diese in „World Neurosurgery“ (2018) veröffentlichte Studie legte nahe, dass Thymochinon eine wirksame Therapie gegen intrazerebrale metastatische Läsionen sein kann, da es das Wachstum von B16-F10-Zellen unterdrückt und Apoptose induziert.
Ressourcen zur B16-F10-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
B16F10-Endothelzellen finden in der Hautkrebsforschung breite Anwendung. Hier sind einige Online-Ressourcen, die die Protokolle zur Kultivierung und Transfektion erläutern:
- Transfektion von B16F10-Melanomzellen: Dieses Video-Tutorial hilft Ihnen dabei, das Transfektionsprotokoll für B16-F10-Zellen zu erlernen.
- Transfektion von B16-F10: Dieses Dokument erläutert das In-vitro-DNA-Transfektionsprotokoll für B16F10-Hautmelanomzellen.
Der folgende Link enthält das Zellkulturprotokoll für B16-F10-Zellen:
- Subkultivierung von B16-F10: Diese Website enthält hilfreiche Informationen zu B16F10-Melanomtumorzellen. Dazu gehören Wachstumsmedien, Verdopplungszeit, Kulturbedingungen und das Protokoll für die Subkultivierung von Zellen sowie der Umgang mit kryokonservierten und proliferativen Kulturen.
Referenzen
- Poste, G., et al., Vergleich der Metastasierungseigenschaften von B16-Melanomklonen, isoliert aus kultivierten Zelllinien, subkutanen Tumoren und einzelnen Lungenmetastasen. Cancer Research, 1982. 42(7): S. 2770–2778.
- Nakamura, M., D. Ono und S. Sugita, Mechanophenotypisierung von B16-Melanomzellvarianten zur Bewertung der Wirksamkeit einer Behandlung mit (-)-Epigallocatechingallat unter Verwendung einer konischen Mikrofluidikvorrichtung. Micromachines, 2019. 10(3): S. 207.
- Danciu, C. et al., Verhalten von vier verschiedenen B16-Maus-Melanomzell-Sublinien: C57BL/6J-Haut. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): S. 73–80.
- Liu, J. et al., Eine hohe Expression von CCR5 im Melanom verstärkt die epitheliale-mesenchymale Transition und die Metastasierung über TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): S. 481–493.
- Nanni, V., et al., Der hydroalkoholische Extrakt aus Blüten von Spartium junceum L. hemmt das Wachstum und die Melanogenese in B16-F10-Zellen durch Induktion der Seneszenz. Phytomedicine, 2018. 46: S. 1–10.