B16-F10-Zellen - Erforschung der B16-F10-Melanom-Zelllinie in der Metastasenforschung
B16-F10-Zellen sind eine Melanom-Zelllinie, die aus der C57BL/6J-Maus gewonnen wird. Sie werden häufig in der Hautkrebsforschung eingesetzt. Forscher nutzen diese Zellen, um die Entwicklung und das Fortschreiten von Tumoren sowie therapeutische Interventionen zu untersuchen. Dieser Artikel befasst sich mit den grundlegenden Aspekten der B16-F10-Melanomzellen. Dazu gehören insbesondere:
- Ursprung und allgemeine Merkmale der B16-F10-Zelllinie
- Informationen zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
- B16-F10-Zellen: Vorteile und Nachteile
- Forschungsanwendungen von B16-F10-Zellen
- Veröffentlichungen über die B16-F10-Zelllinie
- Ressourcen für die B16-F10-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
1. Herkunft und allgemeine Merkmale der B16-F10-Zelllinie
Dieser Abschnitt gibt Ihnen einen Einblick in den Ursprung und die besonderen Eigenschaften der B16F10 Melanom-Tumorzellen. Er wird Ihnen helfen, die Zelllinie effizient in Ihrer Forschungsarbeit einzusetzen. Hauptsächlich werden Sie lernen: Was sind B16-F10-Zellen? Wovon wird B16F10 abgeleitet? Wie ist die Morphologie der B16F12-Zelllinie? Wie groß ist die B16F10-Zelle?
- B16-F10 ist ein Subklon der B16-Tumorzelllinie, die aus dem Hautgewebe von C57BL/6J-Mäusen gewonnen wird. Die B16F10-Melanomzellen wurden nach intravenöser Injektion der B16-Linie in immungeschwächte oder syngene Mäuse entwickelt. Diese Zellen wurden aufgrund ihres Potenzials, in vivo metastasierte Lungenkolonien zu bilden, ausgewählt und dann nach zehn Zyklen der Lungenkoloniebildung in vitro etabliert [1]. Sie wurde 1976 von Fidler und Kollegen entwickelt.
- B16-F10-Zelllinien haben ein epithelähnliches und spindelförmiges Aussehen.
- Die ungefähre Größe von B16-F10-Zellen beträgt 15,4 ± 1,4 μm [2].
B16-F1- und B16-F10-Zellen
B16-F1- und B16-F10-Zellen wurden von der B16-Elternzelllinie abgeleitet. Beide haben denselben Ursprung und weisen fast ähnliche Merkmale auf. Der Hauptunterschied ist jedoch ihre Metastasierungsfähigkeit. B16-F10-Zellen haben ein hohes, B16-F1-Zellen dagegen ein geringes Metastasierungspotenzial [3].
2.informationen zur Kultivierung von B16-F10-Zellen
Bevor Sie eine Zelllinie handhaben und kultivieren, müssen Sie über deren Verdopplungszeit, Wachstumsmedien, Bedingungen und Zellkulturprotokolle Bescheid wissen. In diesem Abschnitt wird erörtert: Was ist die Verdopplungszeit von B16-F10-Zellen? Wie kultiviert man B16F10-Zellen? Welches sind die Medien für B16-F10-Zellen? Welche Kulturbedingungen werden für B16-F10-Zellen empfohlen?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von B16-F10-Zellen
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Verdopplungszeit: |
Die Verdopplungszeit von B16-F10-Zellen beträgt etwa 20,1 Stunden. Je nach Kulturbedingungen kann sie zwischen 17 und 21 Stunden liegen. |
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Adhärent oder in Suspension: |
B16-F10 ist eine adhärente Zelllinie. Die Zellen wachsen schnell und bilden Monolayer. |
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Teilungsverhältnis: |
B16-F10-Zellen werden in einem Split-Verhältnis von 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Die Zellen werden mit Phosphatpuffersalzlösung (1x) gewaschen und dann 8 bis 10 Minuten lang bei Raumtemperatur mit Accutase-Passagierlösung inkubiert. Die Zellen werden mit frischem Medium versetzt und zentrifugiert. Das geerntete Zellpellet wird erneut resuspendiert, und die Zellen werden entsprechend dem Teilungsverhältnis in eine neue Flasche mit frischem Kulturmedium gegeben. |
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Wachstumsmedium: |
B16-F10-Zellen werden in DMEM-Medium kultiviert. Das Medium ist für ein ideales Zellwachstum mit 10 % FBS, 4 mM L-Glutamin, 1,5 g/L NaHCO3, 4,5 g/L Glucose und 1,0 mM Natriumpyruvat angereichert. Die Medien sollten 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden. |
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Wachstumsbedingungen: |
B16-F10-Zellen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C mit einer 5%igen CO2-Zufuhr gezüchtet. |
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Lagerung: |
Gefrorene Zellen werden unter -150 °C in einem elektrischen Ultratiefkühlgerät oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu erhalten. |
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Einfrierprozess und Medium: |
B16-F10-Zellen werden zur Lagerung in CM-1- oder CM-ACF-Medien eingefroren. Dabei wird ein langsamer Gefrierprozess empfohlen, der nur eine Temperaturabnahme von 1 °C pro Minute zulässt, um die Zellen vor einem Schock zu schützen. |
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Auftauprozess: |
Eingefrorene B16-F10-Zellen werden in einem voreingestellten 37°C-Wasserbad für 40 bis 60 Sekunden aufgetaut. Anschließend werden die Zellen in frisches Medium gegeben und zentrifugiert, um die Bestandteile des Gefriermediums zu entfernen. Die gesammelten Zellen werden in einem Wachstumsmedium resuspendiert und zur Kultivierung in Flaschen gefüllt. |
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Biosicherheitsstufe: |
Für die Handhabung und Pflege der B16-F10-Zelllinie ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich. |
3.b16-F10-Zellen: Vorteile und Nachteile
Wie andere Zelllinien weist auch die B16-F10 einige Vor- und Nachteile auf. Einige wichtige Vor- und Nachteile dieser Hautmelanom-Zelllinie werden in diesem Abschnitt erörtert.
Vorteile
Die B16-F10-Zelllinie wird in der Krebsforschung häufig verwendet. Die Vorteile von B16-F10-Zellen sind:
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Metastasierungspotenzial |
B16-F10-Hautmelanomzellen weisen ein hohes Metastasierungspotenzial auf, was sie für die Untersuchung der Krebsmetastasierung und der zugrunde liegenden Mechanismen wertvoll macht. |
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In vitro-Tumormodell |
B16-F10-Zellen dienen als In-vitro-Modell für die Untersuchung von Krebswachstum und -progression und helfen den Forschern, die zellulären und molekularen Mechanismen zu verstehen, die Krebs verursachen. |
Nachteile
Die mit der B16-F10-Zelllinie verbundenen Nachteile sind:
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Von der Maus abstammende Zelllinie |
B16-F10 ist eine von Mäusen abstammende Zelllinie, was ihre Anwendbarkeit für humanspezifische Studien einschränkt. Die mit diesen Zellen gewonnenen Forschungsergebnisse lassen sich möglicherweise nicht immer auf die Biologie des Menschen übertragen. |
4.forschungsanwendungen von B16-F10-Zellen
Die B16-F10-Zelllinie wird in der Krebsforschung in großem Umfang eingesetzt. Einige vielversprechende Anwendungen dieser Zelllinie werden hier erörtert.
- Krebsforschung: Die B16-F10-Zelllinie ist ein wertvolles Modell zur Untersuchung von Krebszellprozessen, einschließlich Proliferation, Invasion, Migration und Zelltod oder Apoptose. Außerdem hilft sie Forschern, Einblicke in die molekularen Mechanismen und Wege zu gewinnen, die diese zellulären Prozesse steuern. Eine 2018 durchgeführte Studie untersuchte die Rolle von CCR5 (C-C-Chemokinrezeptor Typ 5) beim Übergang von epithelialen zu mesenchymalen Zellen und bei der Metastasierung von Melanomzellen. Die Ergebnisse zeigten, dass ein CCR5-Mangel das Tumorwachstum und die Metastasierung einschränkt, während eine hohe Expression zu verstärktem Wachstum und Metastasierung von B16-F10-Zellen führt. Weitere Forschungen ergaben, dass CCR5 die TGFβ1-Expression reguliert, die wiederum die PI3K/AKT/GSK3β-Signalübertragung steuert, um den Übergang von Epithel zu Mesenchym und die Zellmigration zu fördern [4].
- Prüfung und Entwicklung von Medikamenten: B16F10-Melanom-Tumorzellen sind sehr aggressiv und eignen sich daher für die Erprobung potenzieller Anti-Tumor-Medikamente und -Behandlungen. Forscher setzen diese Zellen ein und bewerten die Wirkung verschiedener Substanzen auf Zellwachstum, Proliferation und Metastasierung, was die Entwicklung von Medikamenten unterstützt. Eine 2018 von Valentina Nanni und Kollegen durchgeführte Studie untersuchte die therapeutischen Wirkungen des hydroalkoholischen Extrakts der Blüten von Spartium junceum . Die Studie schlug vor, dass der Blütenextrakt wirksam die Seneszenz in B16-F10-Zellen induziert, was zu einer Unterdrückung des Zellwachstums und der Melanogenese führt und somit potenzielle Anti-Krebs-Aktivitäten ausüben kann [5].
5.veröffentlichungen mit der B16-F10-Zelllinie
Hier finden Sie einige wichtige Forschungspublikationen, die sich mit der B16-F10 Melanomzelllinie befassen:
Diese Studie wurde in Nutrients (2020) veröffentlicht. Darin wird vorgeschlagen, dass der ethanolische Extrakt von Sorghum bicolor eine antimelanogene Wirkung in Hautmelanomzellen B16F10 hat.
Calcitriol hemmt die Proliferation und induziert potenziell Apoptose in B16-F10-Zellen
Die in der Zeitschrift Medical Science Monitor Basic Research (2022) veröffentlichte Forschungsarbeit schlug vor, dass Calcitriol in B16-F10-Melanomzellen eine Antitumorwirkung ausübt, indem es die Proliferation hemmt und Apoptose induziert.
Dieser Artikel wurde in Biochemical and Biophysical Research Communications (2022) veröffentlicht. Die Ergebnisse zeigen, dass Cardole, resorcinolische Lipide, eine intensive Zytotoxizität auf die B16-F10-Zelllinie ausüben.
Die in Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) veröffentlichte Studie untersuchte das antimetastatische Potenzial von Ginkgo biloba-Exokarp-Extrakt anhand von B16-F10-Zellen.
Diese Forschung in World Neurosurgery (2018) schlug vor, dass Thymochinon eine wirksame Therapie gegen intrazerebrale metastatische Läsionen sein kann, da es das B16-F10-Zellwachstum unterdrückt und Apoptose induziert.
6.ressourcen für B16-F10-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
B16F10-Endothelzellen werden in der Hautkrebsforschung häufig verwendet. Hier finden Sie einige Online-Ressourcen, die ihre Kultivierungs- und Transfektionsprotokolle erklären:
- B16F10 Melanomzellen Transfektion: Dieses Video-Tutorial hilft Ihnen, das Transfektionsprotokoll für B16-F10-Zellen zu lernen.
- B16-F10-Transfektion: In diesem Dokument wird das In-vitro-DNA-Transfektionsprotokoll für Hautmelanomzellen B16F10 erläutert.
Der folgende Link enthält das Zellkulturprotokoll für B16-F10-Zellen:
- B16-F10 Subkultivierung: Diese Website enthält hilfreiche Informationen über B16F10-Melanomtumorzellen. Sie umfasst Wachstumsmedien, Verdopplungszeit, Kulturbedingungen und Protokoll für die Subkultivierung von Zellen sowie den Umgang mit kryokonservierten und proliferativen Kulturen.
Referenzen
- Poste, G., et al., Comparison of the metastatic properties of B16 melanoma clones isolated from cultured cell lines, subcutaneous tumors, and individual lung metastases. Krebsforschung, 1982. 42(7): p. 2770-2778.
- Nakamura, M., D. Ono, and S. Sugita, Mechanophenotyping of B16 Melanoma Cell Variants for the Assessment of the Efficacy of (-)-Epigallocatechin Gallate Treatment Using a Tapered Microfluidic Device. Micromachines, 2019. 10(3): p. 207.
- Danciu, C., et al., Behaviour of four different B16 murine melanoma cell sublines: C57BL/6J skin. Int J Exp Pathol, 2015. 96(2): p. 73-80.
- Liu, J., et al., High expression of CCR5 in melanoma enhances epithelial-mesenchymal transition and metastasis via TGFβ1. The Journal of Pathology, 2019. 247(4): p. 481-493.
- Nanni, V., et al., Hydroalcoholic extract of Spartium junceum L. flowers inhibits growth and melanogenesis in B16-F10 cells by inducing senescence. Phytomedicine, 2018. 46: p. 1-10.