NCI-H1299-Zellen: Forschung und klinische Bedeutung der NCI-H1299-Lungenkrebszellen

Informationen zur Zellkultur

Die Aufrechterhaltung einer Zelllinienkultur ist nicht einfach, solange man nicht alle wichtigen Informationen darüber kennt, darunter: Wie lang ist die Verdopplungszeit von NCI-H1299? Wie hoch ist die Aussaatdichte von NCI-H1299? Welches Zellkulturmedium wird für NCI-H1299 verwendet? Wie kultiviert man NCI-H1299-Zelllinien? In diesem Abschnitt finden Sie Antworten auf all diese Fragen zur Kultivierung von NCI-H1299-Zellen.

Wichtige Punkte zur Kultivierung von NCI-H1299-Zellen

Verdopplungszeit:

Die Verdopplungszeit von NCI-H1299 liegt zwischen 22 und 30 Stunden.

Adhärent oder in Suspension:

NCI-H1299 ist eine adhärente Zelllinie.

Subkultivierungsverhältnis:

NCI-H1299-Zellen werden im empfohlenen Verhältnis von 1:3 bis 1:6 subkultiviert. Zur Aussaat werden die adhärenten Zellen mit 1x PBS gewaschen und 8 bis 10 Minuten bei Raumtemperatur mit Accutase-Passagelösung inkubiert. Die abgelösten Zellen werden mit frischem Kulturmedium versetzt und zentrifugiert. Das Zellpellet wird anschließend resuspendiert, und die Zellen werden in neue Flaschen mit Wachstumsmedium überführt.

Wachstumsmedium:

RPM1 1640 ist ein ideales Medium für NCI-H1299-Zellen. Es wird mit 10 % fötalem Rinderserum, 4500 mg/L Glukose, 2,0 mM L-Glutamin, 1 mM Natriumpyruvat, 1500 mg/L NaHCO₃ und 10 mM HEPES ergänzt. Das Medium sollte zwei- bis dreimal pro Woche erneuert werden.

Wachstumsbedingungen:

NCI-H1299-Lungenkrebszellkulturen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C und einer CO₂-Zufuhr von 5 % gehalten.

Lagerung:

Die NCI-H1299-Zelllinie kann langfristig in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff oder in Ultra-Tiefkühlschränken bei Temperaturen unter -150 °C gelagert werden.

Einfrierverfahren und Medium:

CM-1 oder CM-ACF sind Einfriermedien für NCI-H1299-Zellen. Die Zellen werden im Rahmen eines langsamen Einfrierverfahrens eingefroren, bei dem die Temperatur nur um 1 Grad pro Minute sinkt, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.

Auftauprozess:

Gefrorene NCI-H1299-Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem auf 37 Grad Celsius vorgewärmten Wasserbad schnell gerührt, bis nur noch ein kleines Stück Eis übrig ist. Die aufgetauten Zellen werden mit frischem Medium versetzt und können direkt in neuen Kolben kultiviert oder zentrifugiert werden. Im erstgenannten Fall sollte das Medium nach 24 Stunden Inkubation ausgetauscht werden. Die Zentrifugation hilft dabei, Bestandteile des Einfriermediums zu entfernen. Anschließend werden die geernteten Zellen in frischem Medium resuspendiert und zur Kultivierung in den neuen Kolben überführt.

Biosicherheitsstufe:

Für den Umgang mit der NCI-H1299-Zellkultur ist ein Labor der Biosicherheitsstufe 1 erforderlich.

Kaufen Sie die Zelllinie NCI-H1299: Hochwertige Forschungswerkzeuge zur Erforschung der Biologie von Lungenkrebs

Vor- und Nachteile der NCI-H1299-Zellen

Wie andere menschliche Krebszelllinien weisen auch die NCI-H1299-Zellen einige charakteristische Merkmale auf, die mit spezifischen Vor- und Nachteilen verbunden sind. Im Folgenden haben wir einige wichtige davon zusammengefasst.

Vorteile

Die wichtigsten Vorteile der NCI-H1299-Zelllinie für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs sind:

• In-vitro-Lungenkrebsmodell

  NCI-H1299-Zelllinien wurden aus Lymphknotenmetastasen von Lungenkarzinomen entwickelt und weisen daher relativ ähnliche Eigenschaften auf. Daher können diese Zellen als In-vitro-Modell dienen, um die Biologie von Lungenkrebs sowie zelluläre und molekulare Mechanismen zu untersuchen und potenzielle Therapeutika zu screenen und zu testen.

• Einfache Kultivierung

  NCI-H1299-Zellen lassen sich in einem Forschungslabor einfach kultivieren und pflegen. Es gibt keine aufwendigen Anforderungen und Verfahren für die Zellkultur.

• NCI-H1299-P53 und NCI-H1299-KRAS-Mutation

  NCI-H1299-Zellen weisen keine p53-Genexpression auf, wodurch sich die Zellen stark vermehren können. Zudem besitzen sie eine KRAS-Mutation, die zum Zellwachstum, zur Proliferation, Invasion und Migration beiträgt. Vor diesem Hintergrund nutzen Forscher H1299-Zellen, um molekulare Mechanismen im Zusammenhang mit KRAS- und p53-Mutationen zu untersuchen.

Nachteile

Die Nachteile der NCI-H1299-Zellen sind:

• Gewebespezifität

  NCI-H1299 stammt aus Lungengewebe. Daher ist ihre Anwendbarkeit größtenteils auf die Forschung an Lungenkarzinomen beschränkt. Sie spiegelt möglicherweise die Heterogenität und die allgemeinen Merkmale anderer Krebsarten nicht vollständig wider.

Forschungsanwendungen von NCI-H1299-Zellen

Die NCI-H1299-Zelllinie wird in der Lungenkrebsforschung umfassend genutzt. Im Folgenden werden einige vielversprechende Anwendungsbereiche dieser Zelllinie aufgeführt.

• Krebsbiologie: NCI-H1299-Zellen dienen als hervorragendes Forschungsinstrument zur Untersuchung der Entstehung und des Fortschreitens von Krebs sowie der damit verbundenen zellulären und molekularen Mechanismen. Diese Zellen weisen bestimmte Mutationen auf, was es Forschern ermöglicht, das damit verbundene Verhalten von Krebszellen, Signalwege und Genexpressionsprofile zu erforschen. In mehreren Studien wurde die NCI-H1299-Zelllinie für nicht-kleinzelliges Lungenkarzinom genutzt, um die Biologie des Lungenkrebses zu untersuchen. So untersuchte beispielsweise eine im Jahr 2018 durchgeführte Studie den an der Apoptose von Lungenkrebszellen beteiligten Signalweg unter Verwendung von NCI-H1299-Zellen. Die Forscher fanden heraus, dass der PI3K/AKT-Signalweg zur Zellproliferation beiträgt und dessen Hemmung den Tod von Krebszellen bewirken kann [1]. Ebenso untersuchte eine weitere Studie die Mechanismen, die an der epithelial-mesenchymalen Transition (EMT) von NCI-H1299 beteiligt sind. Diese Studie legte nahe, dass ein extrazelluläres Protein namens SPARC (secreted protein acidic and rich in cysteine) zur EMT und Migration von NCI-H1299 beiträgt und somit die Tumorentstehung in den Zellen fördert – das SPARC-Protein fungiert dabei als Mediator der TGF-β1-Signalübertragung [2]. 

• Wirkstoffforschung und Screening: NCI-H1299, eine menschliche Lungenkrebszelllinie, wird in großem Umfang zur Bewertung der Toxizität und Wirksamkeit potenzieller Wirkstoffe eingesetzt. Darüber hinaus wird sie von Forschern genutzt, um den Wirkmechanismus von Antitumormitteln zu untersuchen. In Studien wurden diese Zellen auch genutzt, um mögliche Wirkstoffziele und Resistenzmechanismen zu identifizieren. So untersuchten beispielsweise Xiao-Yun Shen und Kollegen das krebshemmende Potenzial der Naturstoffverbindung Brucein D (BD). Die Ergebnisse zeigten, dass BD die Proliferation, Invasion und Migration von NCI-H1299-Zellen signifikant hemmt. Daher könnte es als potenzielle adjuvante Therapie zur Behandlung des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms in Betracht gezogen werden [3]. In ähnlicher Weise wurden in einer Studie die zytotoxischen Wirkungen von Xanthohumol allein und in Kombination mit dem Chemotherapeutikum Cisplatin auf NCI-H1299-Lungenkrebszellen untersucht [4].

Häufig gestellte Fragen zur Zelllinie NCI-H1299

Literaturverzeichnis

1. Gu, J. et al., Untersuchung der durch EGCG induzierten Apoptose in Lungenkrebszellen durch Hemmung des PI3K/Akt-Signalwegs. Eur. Rev. Med. Pharmacol. Sci, 2018. 22(14): S. 4557–4563.
2. Sun, W. et al., SPARC wirkt als Mediator von TGF-β1 bei der Förderung der epithelial-mesenchymalen Transition in A549- und H1299-Lungenkrebszellen. Biofactors, 2018. 44(5): S. 453–464.
3. Shen, X.-Y. et al., Eine Untersuchung zum Wirkmechanismus von Brucein D bei der Behandlung von H1299-Zellen des nicht-kleinzelligen Lungenkarzinoms. World Journal of Traditional Chinese Medicine, 2020. 6(4): S. 500.
4. Long, B. et al., Zytotoxische Wirkungen von Xanthohumol und dessen Kombination mit Cisplatin auf menschliche metastasierende Lungenkrebszellen der Linie H1299. Journal of Advances in Medicine and Medical Research, 2019. 30(9): S. 1–15.