BxPC-3-Zelllinie
BxPC-3 ist eine aus Menschen gewonnene Pankreaskrebs-Zelllinie. Sie findet breite Anwendung in der Krebsforschung. Forscher nutzen diese Zellen hauptsächlich, um die Biologie von Pankreaskrebs zu untersuchen, therapeutische Ansatzpunkte zu identifizieren und Krebsmedikamente zu entwickeln.
- Wachstumsmedium
- Für die Kultivierung der BxPC-3-Zelllinie wird RPMI 1640-Medium verwendet. Es wird mit 10 % fötalem Rinderserum, 2,1 mM stabilem Glutamin und 2,0 g/l NaHCO₃ ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu erzielen. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
- Verdopplungszeit
- Die Verdopplungszeit von BxPC-3-Zellen liegt zwischen 48 und 60 Stunden.
- Wachstumsart
- BxPC-3 ist eine adhärente Zelllinie.
- Sicherheitsstufe
- BSL-3
- Erhältlich bei
- Cytion – BxPC-3 bestellen
Dieser Artikel enthält wichtige Informationen über die BxPC-3-Zelllinie, die Ihnen bei der Arbeit damit erheblich helfen können. Im Wesentlichen werden folgende Themen behandelt:
- Allgemeine Informationen und Herkunft der BxPC-3-Zelllinie
- Kultivierung von BxPC-3-Zellen
- BxPC-3-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
- Anwendungen von BxPC-3-Zellen in der Forschung
- Forschungspublikationen zu BxPC-3-Zellen
- Ressourcen zur BxPC-3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Allgemeine Informationen und Herkunft der BxPC-3-Zelllinie
- Kultivierung von BxPC-3-Zellen
- BxPC-3-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
- Anwendungen von BxPC-3-Zellen in der Forschung
- 5. Forschungsarbeiten zu BxPC-3-Zellen
- Ressourcen zur BxPC-3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
- Häufig gestellte Fragen
Allgemeine Informationen und Herkunft der BxPC-3-Zelllinie
Kenntnisse über die Herkunft einer Zelllinie sind entscheidend für ihre Anwendbarkeit in der Forschung. Die Vertrautheit mit ihren Eigenschaften, einschließlich Morphologie, Zellgröße und Ploidie, macht ihre Verwendung einfacher und bequemer. Hier erfahren Sie mehr über die Herkunft und die allgemeinen Eigenschaften von BxPC-3-Zellen: Was sind BxPC-3-Zellen? Was ist die BxPC-3-Zelllinie? Woher stammt die BxPC-3-Zelllinie? Wie sieht die Morphologie von BxPC-3 aus?
- BxPC-3, menschliche Pankreaskarzinomzellen, wurden 1986 von einer 61-jährigen Europäerin mit Pankreasadenokarzinom gewonnen. Diese Zellen erwiesen sich auch nach mehreren Strahlen- und Chemotherapie-Behandlungen der Patientin als tumorogen. Somit ist die etablierte Zelllinie ein unschätzbares Modell zur Untersuchung der Entstehung und des Fortschreitens von Krebs.
- BxPC-3-Zellen weisen eine epithelioidartige Morphologie auf.
- Die modale Chromosomenzahl für BxPC-3 beträgt 59. Diese Zellen weisen eine homozygote Deletion auf Chromosom 18q auf, das für das SMAD4/DPC4-Protein kodiert. Außerdem fehlt der Zelllinie die bei Pankreastumoren häufig vorkommende BxPC-3-KRAS-Mutation. Eine BRAF-Deletion findet sich ebenfalls in diesen Pankreaskrebszellen.
Was ist der Unterschied zwischen BxPC3 und PANC-1?
BxPC-3-PADC-Zellen (pankreatisches duktales Adenokarzinom) und PANC-1-Zellen sind primäre Pankreaskrebs-Zelllinien mit epithelialer Morphologie. Dabei weisen erstere Zellen eher epitheliale Eigenschaften auf, während letztere eher mesenchymale Merkmale zeigen [1].
Kultivierung von BxPC-3-Zellen
Die BxPC-3-Zelllinie wird in Krebsforschungslabors häufig verwendet. Für eine effiziente Kultivierung dieser Pankreaskrebs-Zelllinie müssen Sie die folgenden wichtigen Punkte kennen. Sie erfahren: Wie lang ist die Verdopplungszeit von BxPC-3? Wie kultiviert man die BxPC-3-Zelllinie?
Wichtige Punkte für die Kultivierung von BxPC-3-Zellen
Verdopplungszeit der Population:
Die Verdopplungszeit von BxPC-3-Zellen liegt zwischen 48 und 60 Stunden.
Adhärent oder in Suspension:
BxPC-3 ist eine adhärente Zelllinie.
Passagierungsverhältnis:
BxPC-3-Zellen werden im Verhältnis 1:2 bis 1:4 subkultiviert. Die Zellen werden mit 1× PBS gewaschen und mit einer Passagelösung namens Accutase inkubiert. Nach 8–10 Minuten wird frisches Medium zu den Zellen gegeben, und die Zellen werden zentrifugiert. Das Pellet wird erneut in Medium resuspendiert, und die Zellen werden zur Weiterkultur in ein neues Kulturgefäß überführt.
Wachstumsmedium:
Für die Kultivierung der BxPC-3-Zelllinie wird RPMI 1640-Medium verwendet. Es wird mit 10 % fötalem Rinderserum, 2,1 mM stabilem Glutamin und 2,0 g/l NaHCO₃ ergänzt, um ein optimales Zellwachstum zu erzielen. Das Medium sollte 2 bis 3 Mal pro Woche ausgetauscht werden.
Wachstumsbedingungen:
BxPC-3-Zellkulturen werden in einem befeuchteten Inkubator bei 37 °C gehalten, der an eine 5 %ige CO₂-Zufuhr angeschlossen ist.
Lagerung:
Gefrorene Zellen werden im Allgemeinen bei Temperaturen unter -150 °C oder in der Dampfphase von flüssigem Stickstoff gelagert, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.
Einfrierverfahren und Medium:
CM-1 oder CM-ACF können zum Einfrieren von BxPC-3-Zellkulturen verwendet werden. Es wird ein langsamer Einfrierprozess angewendet, bei dem die Temperatur nur um 1 °C sinkt, um einen Schock für die Zellen zu vermeiden.
Auftauprozess:
Gefrorene BxPC-3-Zellen werden 40 bis 60 Sekunden lang in einem auf 37 °C voreingestellten Wasserbad aufgetaut. Nachdem ein kleiner Eisklumpen zurückbleibt, werden die Zellen mit frischem Kulturmedium versetzt und zentrifugiert, um die Gefriermedienbestandteile zu entfernen. Anschließend wird das Zellpellet resuspendiert und die Zellen werden zur Vermehrung in die Flasche gegeben.
Biosicherheitsstufe:
BxPC-3-Zellkulturen werden in Laboren der Biosicherheitsstufe 1 gehalten.
BxPC-3-Zelllinie: Vorteile und Einschränkungen
BxPC-3 ist eine bekannte Zelllinie für Pankreasadenokarzinome, die mit mehreren Vorteilen und Einschränkungen verbunden ist. Die wichtigsten Vor- und Nachteile der Zelllinie sind hier aufgeführt.
Vorteile
Die Hauptvorteile von BxPC-3-Zellen sind:
-
In-vitro-Modell für Bauchspeicheldrüsenkrebs
BxPC-3-Zellen, die von Patienten mit Pankreasadenokarzinom stammen, weisen relevante Eigenschaften auf, was sie zu einem geeigneten Modell für die Untersuchung des Verhaltens von Bauchspeicheldrüsenkrebs in vitro macht.
-
Tumorogene Zelllinie
BxPC-3-Zellen besitzen tumorogene Eigenschaften und können Tumore bilden, wenn sie in Nacktmäuse oder immunsupprimierte Mäuse injiziert werden. Diese Tumore ähneln stark primären Pankreasadenokarzinomen, was das BxPC-3-Xenotransplantatmodell ideal für die Untersuchung von Krebswachstum und -progression macht.
Einschränkungen
Die mit der BxPC-3-Zelllinie verbundenen Einschränkungen sind:
-
Kreuzkontamination
Die BxPC-3-Zelllinie birgt, wie jede andere auch, das Risiko einer Kreuzkontamination. Forscher sollten beim Umgang mit diesen Zellen Vorsicht walten lassen und strenge Protokolle zur Kontaminationsprävention einhalten.
-
Langsame Wachstumsrate
BxPC-3-Zellen weisen eine relativ langsame Proliferationsrate auf, mit einer Verdopplungszeit zwischen 48 und 60 Stunden. Diese Eigenschaft kann für bestimmte Experimente längere Inkubationszeiten erfordern, was möglicherweise zu Verzögerungen im Forschungsfortschritt führen kann.
Anwendungen von BxPC-3-Zellen in der Forschung
BxPC-3-Zellen bieten zahlreiche Anwendungsmöglichkeiten in der Krebsforschung. Die häufigsten Anwendungen sind:
- Forschung zu Bauchspeicheldrüsenkrebs: BxPC-3-Zellen ahmen das Pankreasadenokarzinom nach und werden daher zur Erforschung der genetischen und molekularen Mechanismen genutzt, die der Tumorentwicklung und dem Tumorwachstum zugrunde liegen. Darüber hinaus entdecken Forscher mithilfe dieser Zellen neue Biomarker und therapeutische Ansatzpunkte. Darüber hinaus exprimieren BxPC-3-Zellen in hohem Maße angiogene Faktoren, d. h. Interleukin-8 (IL-8), Prostaglandin E2 (PGE2) und den vaskulären endothelialen Wachstumsfaktor (VEGF), was sie für die Untersuchung der Angiogenese geeignet macht. Die Angiogenese ist dabei ein entscheidender Prozess, der mit dem Krebswachstum und der Metastasierung in Verbindung steht. Eine 2022 veröffentlichte Studie untersuchte, dass die Überexpression von Laminin-5-Gamma-2 (LAMC2) in BxPC3-PDAC (duktales Pankreasadenokarzinom) dessen Tumorentstehung durch die Regulierung des BxPC3-EGFR/ERK1/2/ AKT/mTOR-Signalweg verstärkt [2].
- Arzneimittelforschung und -entwicklung: Die BxPC-3-Zelllinie dient als unschätzbares Testmodell für Krebsmedikamente. Forscher untersuchen die zytotoxischen, antimetastatischen und apoptotischen Wirkungen potenzieller Medikamente auf BxPC3-PDAC. Eine von Alexandria Turner und Kollegen im Jahr 2020 durchgeführte Studie untersuchte die apoptotischen Eigenschaften von Fruchtextrakten aus Elaeocarpus reticulatus in BxPC-3-Bauchspeicheldrüsenkrebszellen [3]. Ebenso wurde im Jahr 2020 eine Studie durchgeführt, die das Antikrebs-Potenzial eines Methanolextrakts der Pflanze Oxialis obtriangulata in BxPC-3-Zellen untersuchte. Darüber hinaus untersuchten die Forscher auch den zellulären Wirkmechanismus, über den der Pflanzenextrakt seine therapeutische Wirkung entfaltete [4].
5. Wissenschaftliche Veröffentlichungen zu BxPC-3-Zellen
In diesem Abschnitt sind einige der meistzitierten und interessantesten Veröffentlichungen zur BxPC-3-Zelllinie aufgeführt.
Licocoumaron induziert den Zelltod von BxPC-3-Pankreasadenokarzinomzellen durch Hemmung von DYRK1A
Diese Veröffentlichung in „Chemico-Biological Interactions“ (2020) untersuchte die apoptotischen Wirkungen eines Naturstoffs, Licocoumaron, auf BxPC-3-Pankreaskrebszellen.
Dieser Forschungsartikel wurde in Anticancer Research (2022) veröffentlicht. Die Studie legte nahe, dass Hydroxychloroquin den Zelltod von BxPC3-Zellen durch Hemmung des BCL-XL-Gens verursacht.
Diese Forschungsarbeit wurde 2020 im Journal of Cellular Biochemistry veröffentlicht. Die Studie besagt, dass der natürliche Wirkstoff Salidrosid in BxPC-3-Zellen krebshemmende Wirkungen zeigt, indem er die HIF-1α- (Hypoxie-induzierbarer Faktor) und LOXL2-Signalkaskade reguliert.
Dieser Artikel in „Biomedicine & Pharmacotherapy“ legt nahe, dass Ibrutinib als hervorragender Radiosensibilisator bei Patienten mit Bauchspeicheldrüsenkrebs eingesetzt werden kann. In-vitro-Untersuchungen an BxPC-3-Zellen zeigen, dass es die EGFR-Phosphorylierung in BxPC-3-Zellen sowie die Expression von pAKT und nachgeschalteten Genen, die durch Strahlentherapie hochreguliert werden, verringert.
Diese Studie in „Integrative Cancer Therapies“ legt nahe, dass das Naturprodukt Chelidonin in menschlichen Pankreaszellen der Linie BxPC-3 eine apoptotische Wirkung entfaltet, indem es die p53- und GADD45a-Signalwege in BxPC-3 reguliert.
Ressourcen zur BxPC-3-Zelllinie: Protokolle, Videos und mehr
Die BxPC-3-Zelllinie bietet viele überzeugende Vorteile, die sie für Forschungszwecke geeignet machen. Viele Online-Ressourcen zur BxPC-3-Zelllinie behandeln deren Handhabung, Kultivierung und Transfektionsprotokolle.
- BxPC-3-Transfektion: Dieses Video ist eine Schritt-für-Schritt-Anleitung zum Erlernen des Transfektionsprotokolls für BxPC-3-Zellen.
Dieser Abschnitt des Artikels enthält einige Links, die Protokolle zur BxPC3-Zellkultur erläutern.
- BxPC-3-Zellkultur: Diese Website hilft Ihnen dabei, Protokolle für die Subkultivierung und Handhabung von kryokonservierten und proliferativen BxPC-3-Kulturen zu erlernen.
Referenzen
- Kim, Y., et al., Vergleichende proteomische Profilierung von Zelllinien des duktalen Adenokarzinoms des Pankreas. Mol Cells, 2014. 37(12): S. 888–98.
- Kirtonia, A., et al., Die Überexpression von Laminin-5-Gamma-2 fördert die Tumorentstehung des duktalen Pankreasadenokarzinoms über die EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-Kaskade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): S. 362.
- Turner, A. et al., Fruchtextrakte von Elaeocarpus reticulatus verringern die Lebensfähigkeit und induzieren Apoptose in Pankreaskrebszellen in vitro. Molecular Biology Reports, 2020. 47: S. 2073–2084.
- An, E.-J., et al., Antikrebs-Potenzial von Oxialis obtriangulata in Pankreaskrebszellen durch Regulierung des ERK/Src/STAT3-vermittelten Signalwegs. Molecules, 2020. 25(10): S. 2301.