NCI-H520-Zellen
















Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die Zelllinie wurde 1982 aus einer Probe einer Lungenmasse hergestellt, die A.F. Gazdar einem Patienten mit Plattenepithelkarzinom der Lunge entnommen hatte. Im Vergleich zu normalem Lungengewebe exprimiert diese Zelllinie eine stark reduzierte Menge an p53 mRNA. Die Zellen weisen keine groben strukturellen DNA-Anomalien auf. Die Zellen weisen eine positive Färbung für Keratin und Vimentin auf, sind aber negativ für das Neurofilament-Triplet-Protein. Die Zellen können in Weichagar mit/ohne Serum Kolonien bilden. |
---|---|
Organismus | Menschen |
Gewebe | Lunge |
Krankheit | Plattenepithelkarzinom der Lunge |
Synonyme | NCI-H520, H-520, NCI-HUT-520, NCIH520 |
Merkmale
Geschlecht | Männlich |
---|---|
Ethnizität | Europäisch |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | NCI-H520 (Cytion-Katalognummer 305063) |
---|---|
Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Tumorigene | Ja, bei Nacktmäusen, denen 1?10^7 Zellen subkutan injiziert wurden (Tumore entwickelten sich innerhalb von 21 Tagen mit einer Häufigkeit von 100% (5/5)). |
---|
Handhabung
Nährboden | RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a) |
---|---|
Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Verdopplungszeit | 32 bis 60 Stunden |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1: 3 bis 1: 4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
|
Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
---|---|
STR profile |
Amelogenin: x,x
CSF1PO: 10
D13S317: 10,11
D16S539: 13
D5S818: 12,13
D7S820: 8,12
TH01: 10
TPOX: 8
vWA: 18,19
D3S1358: 16
D21S11: 30
D18S51: 17
Penta E: 5,14
Penta D: 13
D8S1179: 14,16,17
FGA: 22
D1S1656: 14,16.3
D6S1043: 12,18
D2S1338: 18,23
D12S391: 21
D19S433: 13,14
|