HT-1376-Zellen
















Allgemeine Informationen
Beschreibung | Die Zelllinie HT-1376 stammt von einem menschlichen Blasenkarzinom, insbesondere einem Übergangszellkarzinom des Grades 3. Diese Zelllinie wurde aus einem Tumor hergestellt, der durch eine transurethrale Resektion bei einer erwachsenen Patientin gewonnen wurde, die an einem invasiven Blasenkarzinom erkrankt war. Die HT-1376-Zellen weisen epitheliale Merkmale auf, darunter das Vorhandensein von Mikrovilli und Tonofibrillen, was auf ihren epithelialen Ursprung hindeutet. Außerdem weisen diese Zellen mehrere Markerchromosomen auf, die sie von anderen bekannten Tumorzelllinien unterscheiden. HT-1376-Zellen sind auch dafür bekannt, dass sie in weichem Agar wachsen und hochgradig tumorerzeugend sind und Tumore bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse und Hamster injiziert werden. HT-1376 ist für die Blasenkrebsforschung aufgrund seines genetischen Profils von Bedeutung, das bemerkenswerte Veränderungen in der chromosomalen Region 9p21 aufweist. In dieser Region finden sich häufig große homozygote Deletionen, die zur Inaktivierung wichtiger Tumorsuppressorgene wie CDKN2, CDKN2B und MTAP führen. Diese Deletionen treten häufig bei Blasenkrebs auf und sind für das Verständnis der molekularen Mechanismen der Tumorentstehung von entscheidender Bedeutung. So wird der Verlust von CDKN2 und CDKN2B mit einer Dysregulation des Zellzyklus in Verbindung gebracht, die ein Schlüsselereignis bei der Krebsentstehung darstellt. Darüber hinaus wurden HT-1376-Zellen auf ihre Expression des p16-Proteins untersucht, einem Produkt des CDKN2-Gens, das häufig mit dem Fehlen der Expression von pRb, einem weiteren Tumorsuppressorprotein, in Verbindung gebracht wird. Die HT-1376-Zelllinie wurde auch in der virologischen Forschung verwendet, um das Vorhandensein von Tumorviren festzustellen, obwohl in diesen Zellen keine Virusexpression nachgewiesen werden konnte. Dies macht HT-1376 zu einem wertvollen Modell für die Untersuchung der nicht-viralen Mechanismen der Entwicklung und des Fortschreitens von Blasenkrebs. Die genetischen Veränderungen der Zelllinie und ihre Fähigkeit, in vitro und in vivo zu wachsen, bieten eine robuste Plattform für präklinische Studien, einschließlich der Prüfung von Arzneimitteln und der Erforschung neuer therapeutischer Strategien, die auf spezifische genetische Pfade bei Blasenkrebs abzielen. |
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Organismus | Menschen |
Gewebe | Harnblase |
Krankheit | Harnblasenkarzinom |
Synonyme | HT1376, HT 1376, HT 1376.T |
Merkmale
Alter | 58 Jahre |
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Geschlecht | Weiblich |
Ethnizität | Europäisch |
Morphologie | Epithelial |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | HT-1376 (Cytion Katalognummer 305100) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Proteinexpression | fibrinolytische Aktivität, Interferon |
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Tumorigene | Ja |
Handhabung
Nährboden | EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a) |
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Mittlere Supplemente | Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA |
Passage-Lösung | Accutase |
Verdopplungszeit | 31 Stunden |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:6 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | Verwenden Sie als Kryokonservierungsmedium ein komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren. |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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