Wilms6-celler

800,00 €*

Produkterne leveres frosne på tøris i kryorør. Hvert kryorør indeholder typisk 3 × 10 ⁶ celler til adhærente linjer eller 5 × 10⁶ celler til suspensionslinjer (se batch-COA for detaljer).

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300415

Sikkerhedsdatablad

Produktblad

Analysecertifikat (COA)

Aftale om overførsel af materiale

Beskrivelse	Wilms6-cellelinjen blev etableret fra en primær Wilms-tumor hos en pædiatrisk patient med en germline WT1-mutation. Denne cellelinje er defineret af en homozygot nonsensmutation i WT1-genet (c.1168 C>T, p.R390X), som resulterer i et afkortet og ikke-funktionelt WT1-protein. WT1 er en kritisk regulator for nyreudvikling, og tabet af det er stærkt forbundet med Wilms-tumor, især i tilfælde, der viser mesenkymal differentiering. Wilms6-cellelinjen er en vigtig model til at studere de tumorigeniske effekter af komplet WT1-tab, især i forbindelse med tumorer, der udviser både epiteliale og mesenkymale egenskaber. Wilms6-celler bærer også en mutation i CTNNB1-genet, der specifikt påvirker serin 45 (p.S45F), et vigtigt sted for fosforylering, der regulerer β-Catenin-nedbrydningen. Denne mutation fører til stabilisering og nuklear ophobning af β-Catenin, hvilket resulterer i en konstitutiv aktivering af Wnt-signalvejen. Den afvigende aktivering af Wnt-signalering er en kendt drivkraft for celleproliferation og tumorigenese i Wilms-tumorer, hvilket gør Wilms6 til et værdifuldt værktøj til at undersøge den rolle, som dysregulering af Wnt-signalvejen spiller i tumorer med WT1-mutationer. Fænotypisk udviser Wilms6-celler en mesenkym-morfologi med stærk ekspression af vimentin og fravær af epitelmarkører som cytokeratin, hvilket afspejler den oprindelige tumors stromale natur. Disse celler har vist sig at have et begrænset, men bemærkelsesværdigt differentieringspotentiale, herunder evnen til at differentiere til muskellignende celler under specifikke forhold, hvilket afspejler den mesenkymale differentiering, der er observeret i nogle Wilms-tumorer. Proteomiske studier af Wilms6 har identificeret aktivering af flere receptortyrosinkinaser (RTK'er), herunder PDGFRβ og AXL, som er involveret i at fremme celleoverlevelse, spredning og migration. Den efterfølgende aktivering af signalveje som MAPK og PI3K/AKT understreger yderligere den aggressive karakter af denne cellelinje. Samlet set fungerer Wilms6-cellelinjen som en afgørende model til at udforske de molekylære mekanismer, der ligger til grund for udviklingen af Wilms-tumorer, især i tilfælde af komplet WT1-tab kombineret med aktivering af Wnt-signalering. Dens genetiske og fænotypiske egenskaber gør den til en fremragende platform til at studere samspillet mellem WT1-mangel og afvigende signalveje, hvilket giver indsigt i potentielle terapeutiske mål for denne aggressive tumortype.
Organisme	Menneske
Væv	Nyre
Sygdom	Wilms-tumor
Anvendelser	In vitro-cellekulturmodel. Biokemiske undersøgelser

Alder	15 måneder
Køn	Mand
Etnicitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vækstegenskaber	Vedhæftende

Citat	Wilms6 (Cytion katalognummer 300415)
Biosikkerhedsniveau	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SI

Mutationsprofil	WT1-mutationsstatus: homozygot c.1168C>T, p.R390x, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutationsstatus: homozygot del TCT, p.DS45

Kulturmedium	MSCGM-kit (fra Lonza)
Dissociationsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Frys medium	Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Optøning og dyrkning af celler	Bekræft, at hætteglasset forbliver dybfrosset ved levering, da cellerne sendes på tøris for at opretholde optimale temperaturer under transport. Ved modtagelsen skal du enten straks opbevare kryohætteglasset ved temperaturer under -150 °C for at sikre, at cellernes integritet bevares, eller gå videre til trin 3, hvis øjeblikkelig dyrkning er påkrævet. Ved øjeblikkelig dyrkning optøs hætteglasset hurtigt ved at nedsænke det i et 37 °C varmt vandbad med rent vand og et antimikrobielt middel og røre forsigtigt i 40-60 sekunder, indtil der kun er en lille isklump tilbage. Udfør alle efterfølgende trin under sterile forhold i en flowhætte, og desinficer kryovialet med 70 % ethanol, før det åbnes. Åbn forsigtigt det desinficerede hætteglas, og overfør cellesuspensionen til et 15 ml centrifugerør, der indeholder 8 ml kulturmedium ved stuetemperatur, og bland forsigtigt. Centrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for at adskille cellerne, og kassér omhyggeligt supernatanten, der indeholder resterende frysemedium. Resuspender forsigtigt cellepelleten i 10 ml frisk dyrkningsmedium. For klæbende celler deles suspensionen mellem to T25-kulturkolber; for suspensionskulturer overføres alt mediet til en T25-kolbe for at fremme effektiv celleinteraktion og -vækst. Overhold etablerede subkulturprotokoller for fortsat vækst og vedligeholdelse af cellelinjen, hvilket sikrer pålidelige eksperimentelle resultater.
Inkubationsatmosfære	37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.
Overfladebehandling af flasker	Ingen
Fryseprocedure	Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
Forsendelsesbetingelser	Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
Opbevaringsforhold	For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Sterilitet	Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder. For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
HLA-alleler	A: '02:05:01, '29:01:01 B: '07:05:01, '13:02:01 C: '06:02:01, '15:05:02 DRB1: '07:01:01, '10:01:01 DQA1: '01:05:01, '02:01:01 DQB1: '02:02:01, '05:01:01 DPB1*: '04:02:01, '17:01:01 E: '01:01:01

Partiets nummer	Certifikatets type	Dato	Katalognummer
300415-221	Certifikat for analyse	23. May. 2025	300415

Hvis du kun vil bruge Cytion-cellelinjer til intern forskning på et enkelt forskningssted, skal du udfylde og underskrive vores materialeoverførselsaftale (MTA) og sende den sammen med din ordre.

Ved kommerciel anvendelse – herunder, men ikke begrænset til, arbejde mod betaling, kvalitetskontrol, produktfrigivelse, diagnostisk brug eller regulatoriske undersøgelser – bedes du udfylde formularen til tilsigtet brug, så vi kan udarbejde en aftale, der er skræddersyet til dit projekt.

Bemærk: MTA gælder kun for visse cellelinjer. Hvis denne meddelelse og MTA-dokumentet vises på en produktside, er aftalen gældende. For cellelinjer, der ikke er omfattet af MTA, vises der ingen henvisning til aftalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vores amerikanske afdeling for at modtage den relevante aftale.

Wilms6-celler

Generel information

Karakteristika

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontrol / Genetisk profil / HLA

Analysecertifikat (COA)

Aftale om overførsel af materiale