Accutase-cellefrigørelsesvæske – 100 ml

Accutase-cellefrigørelsesvæske med EDTA og fenolrød – 100 ml

Accutase er en brugsklar, sterilt filtreret celleafløsningsopløsning, der er udviklet som et skånsomt alternativ til trypsin/EDTA til at adskille vedhæftede pattedyrceller fra standard plastudstyr til vævskultur og overflader med vedhæftningsbelægning. Den kombinerer proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet i en afbalanceret saltopløsning for at sikre en effektiv, men kontrolleret adskillelse, der bevarer proteinerne på celleoverfladen og understøtter høj levedygtighed efter passage samt hurtig genvedhæftning.

Accutase-formuleringen er baseret på Dulbeccos phosphatbufferede saltvand (DPBS) med EDTA og fenolrødt som visuel pH-indikator. Enzymerne er af ikke-pattedyr- og ikke-bakteriel oprindelse, hvilket gør Accutase særligt velegnet til stamcelleforskning, vaccinearbejdsgange og enhver anvendelse, hvor forurening fra dyr eller mikroorganismer skal minimeres. Opløsningen hæmmer sig selv ved 37 °C, så der kræves ingen neutraliserende reagens eller serumholdigt medium efter løsningen – cellerne kan overføres direkte til frisk medium.

Nøglefunktioner

• Klar til brug 1x sterilt filtreret væske – ingen fortynding eller rekonstituering kræves
• Kombineret proteolytisk og kollagenolytisk enzymaktivitet for skånsom dissociation
• Hvert parti er standardiseret til en defineret dissociationsaktivitet for konsistens fra parti til parti
• Enzymer af ikke-pattedyr og ikke-bakteriel oprindelse
• Selvhæmmer ved 37 °C – ingen neutraliserende opløsning nødvendig
• Formuleret i Dulbeccos PBS med EDTA
• Fenolrødt inkluderet som visuel pH-indikator
• pH 6,8 – 7,8

Typiske anvendelser

Accutase adskiller skånsomt en lang række adhærente og følsomme celletyper, herunder humane embryonale stamceller (hESCs), humane inducerede pluripotente stamceller (iPSCs), neurale stamceller, primære neuroner og rutinemæssigt dyrkede adhærente cellelinjer såsom HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 og A549. Typiske anvendelsestilfælde omfatter:

• Rutinemæssig subkultur og passering af adhærente pattedyrceller
• Skånsom enkeltcelle-dissociation af hESC'er, iPSC'er og andre følsomme linjer
• Prøveforberedelse til flowcytometri og FACS-analyse
• Analyse af celleoverflademarkører, hvor epitopintegritet er afgørende
• Assays af cellemigration, proliferation og apoptose
• Hviletilstandsassays ved serumudtømning og onkogen-transfektionsstudier
• Assays af tumorcelle- og neuralkamcellemigration
• Opskalering af produktionen i bioreaktor-arbejdsgange

Til rutinearbejde påføres ca. 10 ml Accutase pr. 75 cm² kulturoverflade og inkuberes i 5–10 minutter ved stuetemperatur. Den optimale inkuberingstid bør bestemmes for hver cellelinje og bør ikke overstige en time. Før tilsætning skylles cellelaget med en Ca²⁺/Mg²⁺-^fri saltopløsning, såsom DPBS uden calcium og magnesium, for at fjerne resterende serum og toværdige kationer.

Håndtering og opbevaring

Opbevar den uåbnede flaske frosset ved -15 °C eller derunder. Optø enten ved stuetemperatur eller natten over ved +2 °C til +8 °C. Optø ikke Accutase i et 37 °C vandbad, da forhøjede temperaturer reducerer enzymaktiviteten. Efter optøning kan opløsningen opbevares i op til 2 måneder ved +2 °C til +8 °C; opbevar ikke ved stuetemperatur. Reagenset må ikke forvarmes til 37 °C før anvendelse – tilsæt det direkte til vaskede celler ved stuetemperatur. For at opnå lang holdbarhed anbefales det at opdele reagenset i engangsportioner for at undgå gentagne optøningscyklusser. Arbejd altid under aseptiske forhold.

Kvalitet

Fremstillet under strenge kvalitetsstandarder. Hvert parti Accutase er sterilt filtreret og testet for sterilitet, pH, udseende og dissociationsaktivitet for at sikre ensartet, reproducerbar ydeevne fra parti til parti.

Produktspecifikationer

Formulering (sammensætning pr. liter)

Accutase er et registreret varemærke tilhørende Innovative Cell Technologies, Inc.