Wilms3-celler

800,00 €*

Produkterne leveres frosne på tøris i kryorør. Hvert kryorør indeholder typisk 3 × 10 ⁶ celler til adhærente linjer eller 5 × 10⁶ celler til suspensionslinjer (se batch-COA for detaljer).

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300414

Sikkerhedsdatablad

Produktblad

Analysecertifikat (COA)

Aftale om overførsel af materiale

Beskrivelse	Wilms3-cellelinjen blev etableret fra en primær Wilms-tumor hos en pædiatrisk patient, der var karakteriseret ved en somatisk WT1-mutation. I modsætning til mange andre Wilms-tumorcellelinjer har Wilms3 en heterozygot frameshift-mutation i WT1-genet (c.1293-1294insA, p.V432SfsX87), der fører til produktion af et afkortet WT1-protein. Dette delvise tab af WT1-funktion er forbundet med udviklingen af tumorer, der viser en stromal eller mesenkymal fænotype. WT1-mutationen i Wilms3 er dog ikke homozygot, hvilket gør undersøgelsen mere kompleks, da den bevarer en vis WT1-funktion, som kan påvirke tumorbiologien på en anden måde end cellelinjer med komplet WT1-tab. Wilms3 bærer også en mutation i CTNNB1-genet, der specifikt påvirker treonin 41 (p.T41A), som spiller en kritisk rolle i Wnt-signalvejen. Denne mutation stabiliserer β-Catenin, forhindrer dets nedbrydning og fører til konstitutiv aktivering af Wnt-signalvejen. Den vedvarende aktivering af Wnt-signalering driver celleproliferation og bidrager til tumorigenese i Wilms3, hvilket gør den til en vigtig model til undersøgelse af effekten af CTNNB1-mutationer i sammenhæng med en delvist funktionel WT1-baggrund. Fænotypisk udviser Wilms3-celler en mesenkymlignende morfologi, der udtrykker vimentin og mangler cytokeratin, hvilket stemmer overens med de stromale egenskaber, der er observeret i den oprindelige tumor. Disse celler udviser et begrænset differentieringspotentiale med evnen til at undergå en vis mesenkymal differentiering under specifikke forhold. Proteomiske analyser af Wilms3 har afsløret aktivering af flere receptortyrosinkinaser (RTK'er), herunder PDGFRβ og AXL, som understøtter celleoverlevelse og -spredning. Derudover aktiveres downstream-signalveje som MAPK og PI3K/AKT, hvilket forstærker Wilms3-cellernes ondartede egenskaber. Et unikt aspekt ved Wilms3 er dens delvise WT1-funktionalitet, som giver et særskilt perspektiv på, hvordan WT1-mutationer bidrager til Wilms-tumorbiologi, når mutationen ikke er komplet. Samspillet mellem WT1 og Wnt-signalering i Wilms3 giver en værdifuld mulighed for at studere de nuancerede roller, som disse veje spiller i tumorudvikling. Samlet set fungerer Wilms3 som en vigtig model til undersøgelse af de molekylære mekanismer, der ligger til grund for Wilms-tumor i nærvær af delvist WT1-tab og konstitutiv Wnt-signalvejsaktivering.
Organisme	Menneske
Væv	Nyre
Sygdom	Wilms-tumor
Anvendelser	In vitro-cellekulturmodel. Biokemiske undersøgelser

Alder	11-12 måneder
Køn	Mand
Etnicitet	Kaukasisk
Morfologi	Spindelformet
Celletype	Wilms-celler
Vækstegenskaber	Vedhæftende

Citat	Wilms3 (Cytion katalognummer 300414)
Biosikkerhedsniveau	1
NCBI_TaxID	9606
CellosaurusAccession	CVCL_A5SF

Mutationsprofil	WT1-mutationsstatus: homozygot c.1293-1294insA, p.V432fsx87, LOH: 11p11-11pter, CTNNB1-mutationsstatus: vildtype

Kulturmedium	MSCGM-kit (fra Lonza)
Dissociationsreagens	Accutase
Subkulturer	Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Frys medium	Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Optøning og dyrkning af celler	Bekræft, at hætteglasset forbliver dybfrosset ved levering, da cellerne sendes på tøris for at opretholde optimale temperaturer under transport. Ved modtagelsen skal du enten straks opbevare kryohætteglasset ved temperaturer under -150 °C for at sikre, at cellernes integritet bevares, eller gå videre til trin 3, hvis øjeblikkelig dyrkning er påkrævet. Ved øjeblikkelig dyrkning optøs hætteglasset hurtigt ved at nedsænke det i et 37 °C varmt vandbad med rent vand og et antimikrobielt middel og røre forsigtigt i 40-60 sekunder, indtil der kun er en lille isklump tilbage. Udfør alle efterfølgende trin under sterile forhold i en flowhætte, og desinficer kryovialet med 70 % ethanol, før det åbnes. Åbn forsigtigt det desinficerede hætteglas, og overfør cellesuspensionen til et 15 ml centrifugerør, der indeholder 8 ml kulturmedium ved stuetemperatur, og bland forsigtigt. Centrifuger blandingen ved 300 x g i 3 minutter for at adskille cellerne, og kassér omhyggeligt supernatanten, der indeholder resterende frysemedium. Resuspender forsigtigt cellepelleten i 10 ml frisk dyrkningsmedium. For klæbende celler deles suspensionen mellem to T25-kulturkolber; for suspensionskulturer overføres alt mediet til en T25-kolbe for at fremme effektiv celleinteraktion og -vækst. Overhold etablerede subkulturprotokoller for fortsat vækst og vedligeholdelse af cellelinjen, hvilket sikrer pålidelige eksperimentelle resultater.
Inkubationsatmosfære	37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.
Overfladebehandling af flasker	Ingen
Fryseprocedure	Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
Forsendelsesbetingelser	Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
Opbevaringsforhold	For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Sterilitet	Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder. For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
HLA-alleler	A: '03:01:01 B: '35:01:01, '35:03:01 C: '04:01:01 DRB1: '04:03:01, '11:04:01 DQA1: '03:01:01, '05:05:01 DQB1: '03:01:01, '03:02:01 DPB1*: '01:01:01, '04:01:01 E: '01:03:02, '01:06:01

Partiets nummer	Certifikatets type	Dato	Katalognummer
300414-221	Certifikat for analyse	23. May. 2025	300414

Hvis du kun vil bruge Cytion-cellelinjer til intern forskning på et enkelt forskningssted, skal du udfylde og underskrive vores materialeoverførselsaftale (MTA) og sende den sammen med din ordre.

Ved kommerciel anvendelse – herunder, men ikke begrænset til, arbejde mod betaling, kvalitetskontrol, produktfrigivelse, diagnostisk brug eller regulatoriske undersøgelser – bedes du udfylde formularen til tilsigtet brug, så vi kan udarbejde en aftale, der er skræddersyet til dit projekt.

Bemærk: MTA gælder kun for visse cellelinjer. Hvis denne meddelelse og MTA-dokumentet vises på en produktside, er aftalen gældende. For cellelinjer, der ikke er omfattet af MTA, vises der ingen henvisning til aftalen. MTA er ikke gyldig for kunder i Amerika, Kina eller Taiwan. Kontakt vores amerikanske afdeling for at modtage den relevante aftale.

Wilms3-celler

Generel information

Karakteristika

Regulatoriske data

Biomolekylære data

Håndtering

Kvalitetskontrol / Genetisk profil / HLA

Analysecertifikat (COA)

Aftale om overførsel af materiale