Forståelse af "passage-nummeret"

Begrebet "passagenummer" er centralt inden for cellekultur og henviser til det antal gange, en cellelinje er blevet subkultiveret eller overført til et nyt vækstmedium efter den første genoplivning fra kryopræservering eller modtagelse fra en referencecellebank. Denne måling er afgørende for at spore en cellekulturs afstamning og historie.

Oversigt over processen

• I rutinemæssig cellekulturpraksis overføres cellerne til et nyt medium, når de når en bestemt tæthed, for at opretholde væksten og forhindre overkonfluens. Hver sådan overførsel registreres som en passage.
• Når vi har modtaget en cellelinje, f.eks. ved passage 60 fra indskyderen, har vi traditionelt fortsat med dette passage-nummer og øget antallet ved hver subkultur. Denne praksis opretholdt en historisk tråd, men førte ofte til høje passageantal fra starten. I betragtning af den omfattende og ofte årtier lange brug af visse cellelinjer, såsom HeLa, der blev etableret i 1951, er det ikke muligt at bestemme det samlede antal passager siden cellelinjens begyndelse.
• For at forbedre klarheden og kvaliteten i vores celledyrkningsprocesser reviderede vi denne tilgang i begyndelsen af 2023. Når vi nu starter en kultur fra et nyt hætteglas, nulstiller vi og begynder at tælle forfra fra passage 1 for hver fremstillet batch, uanset passagenummeret fra deponenten

Begrundelse

Passage er en vigtig procedure for at sikre sundheden og anvendeligheden af cellekulturer til forskning. Når celler bliver for store, oplever de kontakthæmning, hvilket reducerer deres spredningshastighed, hvilket kan påvirke forsøgsresultaterne negativt. For at afbøde disse problemer gennemfører Cytion streng kontrol med de celletætheder, som subkulturen foregår ved, og opretholder dermed lave passageantal under fremstillingen af deres cellelinjer. Denne forholdsregel hjælper med at forhindre de negative virkninger af overdreven passage, såsom morfologiske anomalier, ændringer i væksthastighed og genetisk drift, som kan få cellerne til at afvige markant fra deres oprindelige tilstand. Længere perioder med subkulturer kan også øge risikoen for mikrobiel kontaminering.

Vores løfte

Vi sikrer, at de celler, der leveres til forskere, er så tæt på den oprindelige genetiske sammensætning og fænotypiske egenskaber som muligt, hvilket øger pålideligheden af eksperimentelle data. Ved at dokumentere hver passage omhyggeligt bidrager Cytion desuden til forskningens sporbarhed og reproducerbarhed, en forpligtelse, der afspejler de høje standarder for praksis inden for cellekultur. Forskere opfordres til at føre nøjagtige optegnelser over passagenumre, både på dyrkningsbeholderne og i deres laboratorienotesbøger, som en reference til deres cellekulturers sundhed og historie.