KG-1-cellelinje

KG-1-celler er en leukæmicellelinje, der stammer fra mennesker, og som er meget brugt i biomedicinsk forskning. De har mange anvendelsesmuligheder inden for immunologi, kræft og toksikologisk forskning. Forskere bruger disse celler til at studere sygdomsmekanismer og teste potentielle behandlingsformer. Denne artikel vil give omfattende information om KG-1-cellelinjen, som kan hjælpe dig i dit arbejde. Den vil især diskutere:

  1. Generelle karakteristika og oprindelse af KG-1-cellelinjen
  2. Oplysninger om dyrkning af KG-1-cellelinjen
  3. KG-1-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
  4. Anvendelser af KG-1-celler i forskning
  5. Publikationer om KG-1-celler
  6. Ressourcer til KG-1-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere


1. Generelle karakteristika og oprindelse for KG-1-cellelinjen

En cellelinjes oprindelse og generelle karakteristika hjælper en forsker med at beslutte, hvordan den skal bruges i deres arbejde. Du kan undersøge disse oplysninger, før du begynder at arbejde med den. Dette artikelafsnit handler om KG-1-makrofagers oprindelse og egenskaber. Her vil du lære mere: Hvad er KG-1-celler? Hvad er KG-1a-cellelinjen? Hvad er oprindelsen til KG-1-cellelinjen? Hvad er KG-1's morfologi?

  • KG-1 er en lymfoblastlignende cellelinje, der stammer fra knoglemarvsaspirat fra en kaukasisk mand (59 år gammel) med akut myelogen leukæmi. Den blev etableret af Koeffler og Golde i 1978. Disse celler befinder sig hovedsageligt i promyelocyt- eller myeloblastmodningsstadiet [1].
  • KG-1-celler har en lymfoblastlignende morfologi.
  • KG-1-cellelinjens karyotype udviser et pseudodiploid modalt antal kromosomer.

KG-1 og KG-1a

KG-1a er en underlinje af forældrenes KG-1-celler. Den blev udviklet efter 35 passager af KG1-cellelinjen. Den er mindre differentieret sammenlignet med KG-1-cellelinjen. Desuden er denne sublinje cytokemisk, morfologisk og funktionelt mindre moden sammenlignet med modercellelinjen (KG-1).

Realtidsanalyse af røde blodlegemer i menneskeblod under mikroskop i biologisk laboratorieforskning.

2. Information om dyrkning af KG-1-cellelinjen

Denne del af artiklen dækker alle de vigtige oplysninger om dyrkning af KG-1-celler, der kan lette dit arbejde. Her vil du lære: Hvad er fordoblingstiden for KG-1-cellelinjen? Hvad er dyrkningsbetingelserne for KG-1-makrofager? Hvordan dyrker man KG-1-celler?

Nøglepunkter for dyrkning af KG-1-celler

Fordoblingstid:

KG-1's fordoblingstid er ca. 45 timer. Den kan dog variere afhængigt af dyrkningsbetingelserne.

Vedhæftende eller i suspension:

KG-1-cellerne vokser i suspension.

Celletæthed:

Den optimale celletæthed for KG1-cellelinjen er fra 1 til 3 x105 celler/ml. For at subkultivere overføres cellesuspensionen til et sterilt rør og centrifugeres. De høstede celler tilsættes derefter friske medier og resuspenderes omhyggeligt. Herefter fordeles cellerne i nye kolber og dyrkes ved en optimal celletæthed. Cellerne kan deles, når de når en maksimal celletæthed på 1 - 2 x106 celler/ml.

Vækstmedium:

IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) indeholdende 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat og 3,0 g/L NaHCO3 anvendes til dyrkning af KG-1-celler. Mediet skal udskiftes efter tre dage.

Vækstbetingelser:

KG1 AML-cellelinjen dyrkes i en befugtet inkubator ved 37 °C og med en CO2-forsyning på 5 %.

Opbevaring:

Frosne celler opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk ultra-lavtemperaturfryser for at beskytte cellernes levedygtighed.

Fryseproces og medium:

CM-1 eller CM-ACF er velegnet til nedfrysning af KG-1-celler. Cellerne nedfryses ved hjælp af en langsom nedfrysningsproces for at beskytte cellerne mod chok. Denne metode tillader et gradvist fald i temperaturen på 1 °C pr. minut.

Optøningsproces:

Cellerne optøs i et forvarmet vandbad ved 37 °C, indtil der kun er en lille isklump tilbage. Optøede celler tilsættes det friske medium og centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes omhyggeligt og hældes i nye kolber, der indeholder vækstmedier.

Biosikkerhedsniveau:

Biosafety level 1-laboratoriet er afgørende for vedligeholdelse af KG-1-cellekulturer.

KG-1-celler, der viser dannelsen af små celleklynger i suspensionskultur ved 20x og 10x forstørrelse.

3. KG-1 cellelinje: Fordele og begrænsninger

Ligesom andre cellelinjer er KG-1-myeloid leukæmicellelinjen også forbundet med mange fordele og begrænsninger. I dette afsnit vil vi lære om nogle af de vigtigste, som kan være afgørende for, om den skal bruges i din forskning.

Fordele og begrænsninger

De vigtigste fordele ved KG-1-celler er:

  • Nem dyrkning

    KG-1-celler er nemme at dyrke i forskningslaboratorier, da de har ukomplicerede krav til celledyrkning. Deres nemme vedligeholdelse og vækstbetingelser giver adgang til et bredt spektrum af forskere med basale celledyrkningsfaciliteter.

  • Model for akut myeloid leukæmi (AML)

    KG-1 AML-cellelinjen stammer fra en mandlig patient med akut myeloid leukæmi (AML) og er et værdifuldt værktøj til at undersøge AML's biologi og forske i potentielle behandlingsformer, hvilket giver indsigt i denne sygdoms underliggende mekanismer og behandlingsstrategier.

begrænsninger

Begrænsningerne i forbindelse med KG1-cellelinjen er:

  • In vitro-model

    KG-1-celler er en værdifuld in vitro-model til AML-forskning, men det er vigtigt at bemærke, at de måske ikke fuldt ud gengiver sygdommens kompleksitet in vivo og fungerer som en forenklet cellemodel, der måske ikke omfatter alle aspekter af AML-biologien.

4. Anvendelser af KG-1-celler i forskning

KG-1 tilbyder flere lovende anvendelser inden for biomedicinsk forskning. Nogle af de vigtige forskningsanvendelser af KG1-makrofager omfatter:

  • Kræftforskning: KG-1-celler stammer fra en patient med akut myeloid leukæmi og betragtes derfor som et værdifuldt forskningsværktøj til undersøgelse af AML-biologi. Forskere bruger disse celler til at studere de cellulære og molekylære mekanismer, der driver AML-udvikling, vækst og lægemiddelresistens. Det indebærer også at identificere og opdage nye biomarkører, genetiske mutationer og signalveje, der er forbundet med AML. Et studie fra 2019 undersøgte f.eks., at det lange ikke-kodende RNA linc00239 fremmer doxorubicin-resistens og ondartet adfærd i akutte myeloide leukæmiceller, KG-1. Yderligere undersøgelser afslørede, at lncRNA'et aktiverer PI3K/Akt/mTOR-signalering for at udøve disse effekter i AML-celler [2].
  • Toksikologi: KG1-cellelinjen bruges i vid udstrækning i toksikologisk forskning. Forskere tester potentielle terapeutiske midlers toksicitet og effektivitet, herunder kemoterapeutiske lægemidler og målrettede terapier på KG1 myeloide leukæmiceller, for at identificere lovende lægemiddelkandidater til fremtidige prækliniske og kliniske vurderinger. Forskning udført i 2018 analyserede toksiciteten af doxorubicin-holdige nano-niosomer på KG1 AML-cellelinjen. Undersøgelsen foreslog, at nano-niosomer er en egnet bærer til levering af lægemidler, da det forbedrer behandlingens effektivitet [3]. I en anden undersøgelse udforskede forskerne de terapeutiske virkninger af brændenælde-te fremstillet af Urtica dioica-planteblade. Undersøgelsen viste, at dette vandige bladekstrakt af planten udøver antitumoreffekter i akutte myeloide leukæmiceller, KG-1 og U937 [4].


5. Publikationer om KG-1-celler

Dette afsnit af artiklen indeholder et par interessante forskningspublikationer om KG-1-celler.

Quercetin gør human myeloid leukæmi KG-1-celler følsomme over for TRAIL-induceret apoptose

Denne artikel blev udgivet i Journal of Cellular Physiology (2019). Undersøgelsen foreslog, at quercetin-forbindelsen sensibiliserer KG1 AML-cellelinjen mod TNF-relateret apoptose-inducerende ligand (TRAIL) og kan øge effekten af TRAIL-induceret cytotoksicitet i celler.

KLF8 øger væksten af akutte myeloide leukæmiceller og glykolysen via AKT/mTOR-vejen

Denne artikel i Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) foreslog, at nedregulering af krüppel-lignende transkriptionsfaktor 8 undertrykker AML-celleproliferation og glykolyse og tilskynder til apoptose via regulering af AKT/mTOR-signalvejen.

Virkninger af sorafenib og arsentrioxid på U937- og KG-1-cellelinjer: Apoptose eller autofagi?

Denne undersøgelse i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersøgte de potentielle virkninger af arsentrioxid og sorafenib på U937- og KG-1-celler.

Akut myeloid leukæmis følsomhed over for metaboliske hæmmere: Glykolysen viste sig at være et bedre terapeutisk mål

Denne undersøgelse offentliggjort i Medical Oncology (2020) evaluerede OXPHOS og glykolyse som terapeutiske mål i AML-cellelinjen KG-1.

Curcumin kombineret med thalidomid reducerer ekspressionen af STAT3 og Bcl-xL, hvilket fører til apoptose i akut myeloid leukæmi cellelinjer

Denne publikation om lægemiddeldesign, -udvikling og -terapi fra 2020 foreslog, at curcumin- og thalidomidforbindelser synergistisk udøver apoptotiske virkninger i KG-1-celler via nedsat STAT3- og Bcl-xL-ekspression.

6. Ressourcer til KG-1-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Følgende er nogle få online ressourcer, der er tilgængelige om KG-1-celler.

Følgende link indeholder KG-1-cellekulturprotokollen:

  • KG-1 cellelinje: Dette websted er fyldt med grundlæggende oplysninger om KG-1-cellelinjen. Det omfatter oplysninger om cellelinjemedier og protokoller til subkulturering og håndtering af kryokonserverede og proliferative kulturer.


Referencer

  1. Pelliccia, F., V. Ubertini og N. Bosco, The importance of molecular cytogenetic analysis prior to using cell lines in research: Tilfældet med KG-1a leukæmicellelinjen. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
  2. Yang, Y., et al., Longnon-coding RNA linc00239 promotes malignant behaviors and chemoresistance against doxorubicin partially via activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway in acute myeloid leukaemia cells. Onkologiske rapporter, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
  3. Bahrami-Banan, F., et al., Fremstilling og undersøgelse af nano-niosomer, der indeholder doxorubicin, og evaluering af dets toksicitet på akut myeloblastisk leukæmicellelinje KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
  4. Hodroj, M.H., et al., Brændenælde-te hæmmer væksten af akutte myeloide leukæmiceller in vitro ved at fremme apoptose. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.

Vi har opdaget, at du befinder dig i et andet land eller bruger et andet browsersprog end det, der er valgt i øjeblikket. Vil du acceptere de foreslåede indstillinger?

Luk