U87MG-celler - Glioblastom-forskning ved hjælp af U87MG og dens indvirkning på undersøgelser af hjernekræft
U-87 MG, den humane primære glioblastom-cellelinje, bruges i vid udstrækning i biologisk forskning. Disse celler anvendes især inden for neurovidenskab og immunonkologi.
Generelle karakteristika og oprindelse af U-87 MG-cellelinjen
I dette afsnit gennemgås U87-cellelinjens oprindelse og generelle karakteristika. Du vil lære Hvad er U-87 MG-celler? Hvor kommer U87-cellen fra? Hvad er den fulde form af U-87 MG? Hvor store er U87-celler? Hvad er U87-cellelinjens morfologi?
- U87-cellelinjen er en glioblastom-, astrocytom-cellelinje. Den blev etableret i 1966 på Uppsala Universitet. Cellerne stammer fra en 44-årig kaukasisk mand, der led af glioblastom. Denne cellelinje kaldes formelt U 87 MG, som står for Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-cellerne har en epitelcellelignende morfologi.
- Størrelsen på U 87 MG-cellerne varierer mellem 12 og 14 µm i diameter.
- Denne humane glioblastomcellelinje er hypodiploid og har et modalt kromosomtal på 44 i ca. 48 % af cellepopulationen. Der findes dog også højere ploidier i 5,9 % af cellepopulationen.
Information om dyrkning af U-87 MG-celler
Før du arbejder med U-87 MG-celler, bør du lære om følgende nøglepunkter for dyrkning af disse glioblastomceller. Du bør især vide: Hvad er populationsfordoblingstiden for U 87 MG-celler? Hvilke medier bruges til dyrkning af U87-celler? Hvad er udsåningstætheden for U 87 MG-cellelinjen?
Nøglepunkter for dyrkning af U-87 MG-celler
|
Populationens fordoblingstid: |
U 87 MG-celler har en populationsfordoblingstid på 18-38 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
U 87 MG er en adhærent cellelinje. Cellerne har en langstrakt form og vokser som monolag. |
|
Udsåningstæthed: |
Glioblastomcellelinjen U 87 MG anbefales til udsåning ved en celletæthed på 1 x104 celler/cm2. De adhærente U87-celler vaskes med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-opløsning. Bagefter centrifugeres de dissocierede celler og udvindes. Cellerne resuspenderes omhyggeligt og tilsættes i nye kolber, der indeholder vækstmedium. |
|
Vækstmedium: |
U 87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsat 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-opløsning. Medierne skal fornyes hver 2. til 3. dag. |
|
Vækstbetingelser: |
U-87 MG-celler kræver en befugtet inkubator med 5 % CO2-forsyning og en temperatur på 37 °C for at opnå optimal vækst. |
|
Opbevaring: |
U87-cellerne opbevares enten i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C for at opretholde maksimal levedygtighed af glioblastomceller. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedier er velegnede til nedfrysning af U87 MG-celler. En langsom fryseproces anbefales, da den forhindrer cellerne i at få et chok og beskytter cellernes levedygtighed. |
|
Optøningsproces: |
Frosne U-87 MG-cellelinje-glas optøs i et 37 °C varmt vandbad. Cellerne tilsættes vækstmedier, resuspenderes og fordeles til dyrkning i nye kolber. I modsætning til dette kan U87-celler centrifugeres for at fjerne frysemedier og derefter dyrkes. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
Biosikkerhedsniveau 1 er påkrævet ved håndtering af U87 MG-cellekulturer. |
Fordele og ulemper ved U-87 MG-celler
Når vi tænker på en cellelinje, er det første, der falder os ind: Hvad er fordelene ved at bruge U-87 MG-celler? Hvad er ulemperne ved U87-celler?
Fordele og ulemper
U-87 MG-cellelinjer bruges i vid udstrækning i forskning. Et par af fordelene ved denne cellelinje er:
Fordele
- Nem at dyrke: U 87 MG-celler er nemme at holde i kultur. De kræver ikke kræsne eller komplicerede krav til celledyrkning
- Homogenitet: U-87 MG er en homogen cellelinje. De fleste celler i en population har den samme genetiske sammensætning og deler dermed lignende egenskaber. Disse celler bruges til at studere celleprocesser, screening af lægemidler og Testme
- Velkarakteriseret: Denne glioblastom-cellelinje er velkarakteriseret med hensyn til vækstkarakteristika, morfologi og genekspression, hvilket gør den til et værdifuldt forskningsværktøj
Ulemper
- Begrænset anvendelighed: U 87 MG er en glioblastom-cellelinje, så dens anvendelsesmuligheder er primært begrænset til at studere glioblastomer og de underliggende molekylære mekanismer. Den er muligvis ikke egnet til at undersøge andre kræfttyper.
Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
U87MG glioblastom-cellelinjen bruges i vid udstrækning i kræftstudier, især i glioblastom-forskning. Nogle af de forskningsmæssige anvendelser af U-87 MG-celler er:
- Forskning i kræftbiologi: U87-cellelinjen bruges til at studere kræftvækst og -udvikling, underliggende molekylære mekanismer, signalveje og tumormikromiljø. En undersøgelse offentliggjort i 2020 brugte en glioblastom in vitro-model, U-87 MG-cellelinjen, til at undersøge BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1)-genet som et terapeutisk mål. Resultaterne viste, at BMAL1-genet hæmmer glioblastomcelleproliferation, migration og invasion ved at undertrykke cyclin B1, metalloproteinase-9 og phospho-AKT-genekspression [1]. En anden undersøgelse udført i 2019 brugte U87-cellelinjen og undersøgte, at nedreguleret lipopolysaccharid-induceret tumornekrosefaktor-alfa-faktor (LITAF) transkriptionsfaktorekspression kan forbedre gliomcellers radiosensitivitet gennem opregulering af FOXO-1-vejen. LITAF er også kendt som p53-induceret gen 7 (PIG7) [2].
- Opdagelse og udvikling af lægemidler: U-87 MG-celler kan bruges til screening og testning af lægemidler, så forskere kan identificere nye potentielle kræftlægemidler og vurdere deres effektivitet og toksicitet. I en undersøgelse brugte man U-87 MG glioblastomcellelinjen til at evaluere antioxidant- og anticancerpotentialet i Inula helenium (L.)-ekstrakt [3]. På samme måde nævnte en anden publikation, at man brugte U87-cellelinjen til at teste den cytotoksiske og apoptotiske effekt af planteekstrakter [4]. Desuden undersøgte forskning offentliggjort i 2018 den cytotoksiske effekt af sesquiterpenalkaloider udvundet af Nuphar-planter på følsomme og lægemiddelresistente U 87 MG-cellelinjer [5].
Bestil din U87 MG-gliomcellelinje i dag
U-87 MG cellelinje: Forskningspublikationer
Her er nogle fremtrædende forskningspublikationer med U 87 MG-cellelinjen.
Denne artikel, der blev offentliggjort i Neuroreport 2018, foreslog, at hypoxi kunne øge humane glioblastomcellers migration og invasion ved at regulere PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvejen.
Denne undersøgelse er offentliggjort i Frontiers in Pharmacology i 2020. Forskningsresultaterne siger, at et flavonoid, Eriodictyol, udøver anticancereffekter på U87-cellelinjen og undertrykker celleproliferation og metastase. Forbindelsen formidler sine antitumoregenskaber ved at modulere PI3K/Akt/NF-κB-vejen.
Denne forskning i Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine (2018) tyder på, at en kinesisk urteformel kaldet Xihuang pill kan fremkalde apoptose i U87-celler ved at målrette ROS-aktiveret Akt/mTOR/FOXO1-kaskade.
LITAF forbedrer strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-vejen
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i tidsskriftet Cellular and Molecular Neurobiology i 2019. Undersøgelsen foreslog, at en transkriptionsfaktor, LITAF, nedregulerer og forbedrer gliomcellers strålefølsomhed ved at regulere FOXO-1-signalvejen.
Denne artikel er udgivet i Biointerface Research in Applied Chemistry (2019). Forskerne brugte U-87 MG-celler til at undersøge den cytotoksiske virkning af curcumin-belastede PLGA-nanopartikler.
Ressourcer til U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og meget mere
U87MG glioblastom-cellelinjen bruges i mange kræftforskningslaboratorier. Nogle få ressourcer med denne cellelinje er:
- Transfektion af U87-cellelinjen: Dette dokument beskriver en transfektionsprotokol for U 87 MG-celler.
- Transfektion af U 87 MG-cellelinjen: Denne video er en tutorial, der trin for trin forklarer transfektionsprotokollen for U87-celler.
Ressourcen til celledyrkningsprotokollen for U87-celler er angivet nedenfor:
- U87 MG-celler: Dette link indeholder grundlæggende oplysninger om U87 MG-cellelinjen. Det inkluderer korte protokoller for celledeling, nedfrysning og optøning af celler.
Indsigt i U87 MG-gliomforskning: Ofte stillede spørgsmål
Referencer
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 undertrykker spredning, migration og invasion af U87MG-celler ved at nedregulere Cyclin B1, Phospho-AKT og Metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al, LITAF forbedrer strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-vejen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): p. 871-882.
- Koc, K., et al., antioxidant- og anticancer-aktiviteter af ekstrakt af Inula helenium (L.) i den humane U-87 MG glioblastom-cellelinje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): p. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh, and A. Ghasempour, Cytotoxicity and apoptosis induction in breast cancer, skin cancer and glioblastoma cells by plant extracts. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): p. 5131-5142.
- Fukaya, M., et al., Cytotoksicitet af sesquiterpenalkaloider fra Nuphar-planter over for følsomme og lægemiddelresistente cellelinjer. Food Funct, 2018. 9(12): p. 6279-6286.