T98G-cellelinje

T98G-celler er en human glioblastom-cellelinje, der generelt anvendes i biomedicinsk forskning. Disse celler bruges især i studier af hjernekræft til at undersøge vigtige celler og molekylære faktorer, der bidrager til det. Desuden hjælper de forskere med at screene og teste nye lægemidler mod kræft, der kan hjælpe med at udvikle lægemidler.

Denne artikel indeholder alle de vigtige detaljer om T98G-cellelinjen, som du har brug for, før du begynder at arbejde med den, f.eks:

  1. Generelle karakteristika og oprindelse af T98G-cellelinjen
  2. Information om dyrkning af T98G-cellelinjen
  3. T98G-cellelinjen: Fordele og ulemper
  4. Anvendelser af T98G-celler
  5. Forskningspublikationer med T98G-celler
  6. Ressourcer til T98G-celler: Protokoller, videoer og meget mere

1. Generelle karakteristika og oprindelse af T98G-cellelinjen

Denne del af artiklen vil hjælpe dig med at udforske de grundlæggende egenskaber ved T98G-cellelinjen. Det vil omfatte oplysninger om cellelinjens oprindelse, morfologi, størrelse og ploidi. Desuden vil den give en omfattende forståelse af følgende spørgsmål: Hvad er T98G-celler? Hvilken type celle er T98G? Hvor kommer T98G fra? Hvad er kendetegnene ved T98G-cellelinjen? Hvad er glioblastom-cellelinjen T98G U87?

  • T98G-cellelinjen blev etableret af GH Stein. Den består af fibroblastlignende celler, der stammer fra hjernevæv fra en 61-årig kaukasisk mand med glioblastoma multiforme [1].
  • T98G-celler er ikke-tumorogene; de forårsager ikke tumorer, når de injiceres i nøgne mus. De har dog en tendens til at sprede sig med passende forankring i cellekulturen.
  • Disse celler har en fibroblastcellelignende morfologi.
  • Glioblastomcellelinjen T98G repræsenterer hyperpentaploidi. Det modale kromosomtal varierer mellem 128 og 132. Højere ploidier kan forekomme i 1,39 % af cellepopulationen.

T98 mod T98G

Begge er humane glioblastom-cellelinjer og har samme oprindelse. Den eneste forskel mellem disse cellelinjer er antallet af kromosomer. T98G har næsten dobbelt så mange kromosomer som T98. Derfor er T98G kendt som den polyploide variant af T98.

T98G mod U87

U87 og T98G er begge humane glioblastom-cellelinjer, der bruges i forskning i hjernekræft. U87 udviser en mere aggressiv fænotype sammenlignet med T98G GBM.

Mikroskopisk undersøgelse af et udsnit af hjernevæv i 100x forstørrelse, der afslører de indviklede detaljer i en gliom-tumor.

2. Oplysninger om dyrkning af T98G-cellelinjen

Oplysninger om dyrkning af en cellelinje er vigtige at kende, før du begynder at arbejde med den. Det vil hjælpe dig med nemt og bekvemt at håndtere cellelinjen i laboratoriet. Det bør du vide: Hvad er fordoblingstiden for T98G-cellelinjen? Hvilket vækstmedie er bedst til T98G-celler? Hvad er T98G's vækstkarakteristika? Hvad er udsåningstætheden for T98G-celler? Hvordan nedfryser man T98G-celler?

Nøglepunkter for dyrkning af T98G-celler

Fordoblingstid:

Den omtrentlige fordoblingstid for T98G-celler er 40 timer. Den kan variere afhængigt af dyrkningsbetingelserne.

Vedhæftende eller i suspension:

T98G-celler er adhærente. De sætter sig fast på bunden af dyrkningsbeholdere og danner monolag.

Opdelingsforhold:

T98G-cellerne subkultiveres i et splitforhold på 1:2 til 1:5. Til dette vaskes cellerne først med 1 X PBS-buffer og inkuberes derefter med passageløsning (Accutase) i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Efter inkubationen tilsættes de løsrevne celler til frisk vækstmedium og centrifugeres. Derefter resuspenderes den opsamlede cellepellet omhyggeligt, og cellerne fordeles i en kulturkolbe, der indeholder vækstmedium.

Vækstmedium:

EMEM-medium indeholdende 10 % føtalt kvægserum, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS anvendes til dyrkning af T98G-celler. Mediet skal udskiftes 3 til 4 gange om ugen.

Vækstbetingelser:

T98G-celler holdes i en befugtet inkubator, der er indstillet til 37 °C og tilsluttet en CO2-forsyning.

Opbevaring:

Frosne celler kan opbevares ved under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at beskytte cellernes levedygtighed på længere sigt.

Fryseproces og medium:

Det anbefales at nedfryse T98G-celler i CM-1- eller CM-ACF-cellefrysemedier. Til dette foreslås en langsom fryseproces, der kun tillader et fald i temperaturen på 1 °C pr. minut. Dette forhindrer cellerne i at få et chok og bevarer deres levedygtighed.

Optøningsproces:

Frosne celler optøs forsigtigt ved at placere dem i et forvarmet vandbad ved 37 grader Celsius i 40 til 60 sekunder. Derefter resuspenderes de i friske vækstmedier og overføres til en ny kolbe. Efter 24 timers inkubation skiftes mediet for at fjerne frysende mediekomponenter.

Biologisk sikkerhedsniveau:

T98G-kulturer vedligeholdes i et biosikkerhedslaboratorium.

Visualisering af det fibroblastlignende vækstmønster i glioblastomcellelinjen T98G ved 10x og 20x forstørrelse.

3. T98G-cellelinjen: Fordele og ulemper

T98G er en meget udbredt glioblastom-cellelinje, der stammer fra mennesker. Den har flere fordele og ulemper, der adskiller den fra andre. Nogle få bemærkelsesværdige af dem diskuteres i dette afsnit af artiklen.

Fordele og ulemper

Fordelene ved T98G-cellerne er:

  • Velkarakteriseret

    Veletableret og velkarakteriseret cellelinje. Omfattende studeret og dokumenteret i litteraturen.

  • In vitro-model

    Repræsenterer karakteristika for glioblastom, den mest aggressive hjernetumor. Et værdifuldt værktøj til sygdomsundersøgelse, forståelse af biologi og udvikling af behandling.

Ulemper

Ulemperne forbundet med T98G-celler er:

  • Heterogenitet

    Genetisk heterogenitet i T98G-cellepopulationen kan føre til uoverensstemmelse i forsøgsresultaterne og komplicere fortolkningen af data.

4. Anvendelser af T98G-celler

T98G-cellelinjen er et værdifuldt værktøj i kræftforskningen. Nogle få vigtige forskningsanvendelser af T98G-cellerne er listet her:

  • Kræftforskning: T98G-cellelinjen er et værdifuldt værktøj til at undersøge glioblastom-tumorers biologi. Disse celler bruges primært til at undersøge de komplicerede molekylære veje, der ligger til grund for glioblastoms sygdomsudvikling og -progression. Desuden bruges de til at identificere genetiske mutationer, der driver tumorvækst og andre kræftcellemekanismer. Yang Chen og hans kolleger arbejdede med disse celler og fandt ud af, at overudtryk af miRNA-21 reducerer PDCD4-niveauet (programmeret celledødsprotein 4) i T98G-celler. Dette fører til en hæmning af PDCD4-medieret T98G-celleapoptose. Undersøgelsen peger således på miRNa-21 som et potentielt mål for udvikling af terapier [2]. I lighed med denne undersøgelse undersøgte Fanqiang Kong og kolleger mikroRNA-15a's rolle i T98G-glioblastomcellers spredning og invasion. De fandt ud af, at miRNA-15a-5p fremmer disse celleprocesser ved at rette sig mod celleadhæsionsmolekyle 1 (CADM1) [3].
  • Test af lægemidler og terapeutisk udvikling: T98G fungerer som en fantastisk in vitro-model for glioblastom til screening af nye lægemidler og som en platform til at evaluere effektiviteten af potentielle kræftbehandlinger. Forskere tester også en række forskellige forbindelser og terapier for at identificere og opdage lægemiddelkandidater med de mest lovende anti-glioblastom-egenskaber. Det fører til udvikling af nye lægemidler og behandlingsstrategier, som giver håb for glioblastompatienter. Et sådant studie undersøgte anti-kræftpotentialet i en naturlig forbindelse kaldet corilagin i den temozolomidresistente T98G GBM-cellelinje. Undersøgelsens resultater viste, at corilagin i kombination med temozolomid fremkalder højere niveauer af antiproliferative og antiapoptotiske virkninger i cellerne [4].

5. Forskningspublikationer med T98G-celler

Følgende er nogle interessante og ofte citerede forskningspublikationer om T98G, glioblastomcellelinjen.

Kemoterapeutisk effekt af SR9009, en REV-ERB-agonist, på de humane glioblastom T98G-celler

Denne publikation i ASN Neuro (2019) undersøgte anti-kræfteffekterne af en REV-ERB-agonist kaldet SR9009 på T98G-glioblastomceller.

Quercetin og natriumbutyrat øger synergistisk apoptose i rotte-C6- og humane T98G-glioblastomceller gennem hæmning af autofagi

Denne forskningsartikel i Neurochemical research (2019) foreslog, at natriumbutyrat og quercetin synergistisk hæmmer beskyttende autofagi i T98G-celler og øger celleapoptose.

RNA-sekventering i hypoxi-tilpassede T98G-glioblastomceller giver understøttende bevis for IRE1 som et potentielt terapeutisk mål

Denne undersøgelse i Genes (2023) udsatte den hypoxi-tilpassede T98G-cellelinje for RNA-sekventering og foreslog IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) som et lovende terapeutisk mål.

MicroRNA-548c-3p hæmmer proliferation og migration af T98G-gliomceller ved at nedregulere c-Myb

Denne artikel blev offentliggjort i Oncology Letters (2017). Studiet undersøgte, at miRNA-548c-3p retter sig mod T98G-onkogener (c-Myb) for at hæmme spredningen og migrationen af T98G-celler.

Kloroformekstrakt af tibetansk urtemedicin Dracocephalum tanguticum Maxim. Hæmmer spredningen af T98G-glioblastomceller ved at modulere spaltningen af Caspase-3 og udtrykket af Bax og p21

Denne artikel i Journal of Medicinal Plants Research (2011) foreslog, at Dracocephalum tanguticum-kloroformekstrakt udøver antiproliferative virkninger på T98G-celler ved at modulere caspase-3-, Bax- og P21-gener.

6. Ressourcer til T98G-celler: Protokoller, videoer og meget mere

De tilgængelige ressourcer med protokoller for dyrkning og transfektion af T98G-celler er nævnt her.

  • T98G-transfektion: Denne forskningsartikel indeholder protokollen for T98G-transfektion. Den forklarer kort metoden og det nødvendige reagens.

De følgende links vil i høj grad hjælpe dig med at lære T98G-celledyrkningsprotokollen og gøre dit arbejde let med den.

  • T98G-celler: Dette websted indeholder vigtige oplysninger om T98G-celledyrkningsprotokoller, herunder subkulturer og håndtering af proliferative og kryopræserverede kulturer. Desuden vil det også hjælpe dig med at lære om cellevækstmedier, betingelser og fordoblingstid.

Referencer

  1. Haehl, E., Endothelial-cell induced radioresistance in glioblastoma. 2021, Universität Tübingen.
  2. Chen, Y., et al., MicroRNA-21 nedregulerer udtrykket af tumorsuppressoren PDCD4 i den humane glioblastomcelle T98G. Cancer letters, 2008. 272(2): p. 197-205.
  3. Kong, F., et al., MicroRNA-15a-5pfremmer spredning og invasion af T98G-glioblastomceller via målretning af celleadhæsionsmolekyle 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): p. 1-1.
  4. Milani, R., et al., Corilagin inducerer høje niveauer af apoptose i den temozolomidresistente T98G-gliomcellelinje. Oncol Res, 2018. 26(9): p. 1307-1315.

Vi har opdaget, at du befinder dig i et andet land eller bruger et andet browsersprog end det, der er valgt i øjeblikket. Vil du acceptere de foreslåede indstillinger?

Luk