SiHa-celler - kaster lys over forskning i livmoderhalskræft

SiHa-celler er livmoderhalskræftceller, der i vid udstrækning anvendes i biomedicinsk forskning. De er gode transfektionsværter og er derfor velegnede til genekspressionsstudier. På grund af deres menneskelige oprindelse og relevans for livmoderhalskræft anvendes disse celler hovedsageligt i undersøgelser af kræftbiologi, virologi og lægemiddeludvikling.

SiHa-cellers generelle egenskaber og oprindelse

Det er afgørende at forstå en cellelinjes oprindelse og generelle egenskaber, da det påvirker dens anvendelse i din forskning. I denne artikel vil du lære om SiHa-cellelinjens oprindelse, karakteristiske egenskaber og meget mere: Hvad er SiHa-cellelinjen? Hvad er SiHa-celler HPV? Hvad er SiHa-cellelinjens oprindelse? Hvad er SiHa's morfologi?

SiHa, cellelinjen for livmoderhalskræft, stammer fra fragmenter af en primær livmoderbiopsi fra en asiatisk kvinde (55 år gammel) med pladecellekræft [1].
SiHa-cellelinjen har en hypertriploid karyotype. De fleste af cellerne har et gennemsnitligt kromosomtal på mellem 69 og 72. Omkring 24 % af cellerne har dog et modalt kromosomtal på 71.
SiHa-celler er humant papillomavirus 16-positive. De udviser integration af omkring 1 til 2 kopier af HPV-genomet pr. celle [2].
Disse livmoderhalskræftceller udviser en epitelial morfologi.

Deling af HeLa livmoderhalskræftceller under mikroskopet.

SiHa-cellelinje: Information om dyrkning

Det er ikke let at vedligeholde en cellelinjekultur, før du kender alle de vigtigste punkter for dyrkning af den. Det bør du vide: Hvad er fordoblingstiden for SiHa? Hvad er SiHa-cellemedier? Hvordan dyrker man SiHa-cellelinjen?

Nøglepunkter for dyrkning af SiHa-celler

Fordoblingstid:	Fordoblingstiden for SiHa-celler er ca. 17 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	SiHa er en adhærent cellelinje.
Forhold for subkultivering:	Subkultiveringsforholdet for SiHa-celler er 1:2 til 1:4. Ved passage skylles de adhærente celler med 1x PBS. Accutase-opløsning tilsættes, og cellerne inkuberes i 8 til 10 minutter ved omgivelsestemperatur. Derefter tilsættes kulturmediet, og cellerne centrifugeres. Cellepelleten resuspenderes, og cellerne hældes i den nye kolbe til dyrkning.
Vækstmedium:	Eagle's minimum essential medium (EMEM )indeholdende 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og Earle's Balanced Salt Solution (EBSS) bruges til den ideelle vækst af SiHa-celler. Mediet udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:	SiHa-celler holdes i en 37 °C befugtet inkubator med 5 % CO2-forsyning.
Opbevaring:	De frosne SiHa-cellelinjehætteglas opbevares ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser eller i dampfasen af flydende nitrogen i længere tid.
Fryseproces og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium bruges til nedfrysning af SiHa-celler. Cellerne fryses ved hjælp af en langsom frysemetode, der kun tillader et fald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:	Frosne celler opbevares i 40 til 60 sekunder i et 37 °C varmt vandbad, indtil der er en lille isklump tilbage. Derefter tilsættes frisk vækstmedie, og cellerne centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes, og cellerne fordeles i en dyrkningskolbe til vækst.
Biosikkerhedsniveau:	Der kræves et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 for at håndtere og vedligeholde SiHa-cellekulturer.

Et klæbende lag af SiHa-celler i 10× og 20× forstørrelse.

Fordele og ulemper ved SiHa-cellelinjen

Ligesom andre humane karcinomcellelinjer har SiHa også nogle særlige egenskaber, der er forbundet med visse fordele og ulemper. Her har vi diskuteret nogle af de vigtigste.

Fordele ved SiHa-cellelinjen for livmoderhalskræft

Model for livmoderhalskræft
- Afledt af pladecellecarcinom i livmoderhalsen.
- Bruges til at studere mekanismer, vækst og udvikling af livmoderhalskræft.
- Udtrykker generne p53+ og pRB+, som er relateret til DNA-reparation, cellecyklusregulering og tumorundertrykkelse.
Tumorigenisk potentiale
- SiHa-celler er tumorigeniske og kan fremkalde dårligt differentierede grad III epidermoide tumorer i nøgne mus.
- Anvendes til in vivo kræftforskning og testning af kræftbehandlinger.

Ulemper ved SiHa-celler

Spredningshastighed
- SiHa-celler spreder sig hurtigt, hvilket fører til overvækst.
- Kræver hyppig passage, hvilket øger risikoen for genetisk ustabilitet, som kan påvirke cellernes adfærd over tid.

Forskningsanvendelser af SiHa-celler

SiHa-cellelinjen bruges i vid udstrækning til forskning i livmoderhalskræft. Nogle få specifikke anvendelser af denne cellelinje diskuteres her.

Human papillomavirus (HPV)-relaterede undersøgelser: SiHa-celler er HPV 16-positive, og de er derfor værdifulde enheder til at studere human papillomavirus-infektion, dens molekylære mekanismer og dens rolle i udviklingen og progressionen af livmoderhalskræft. Forskere bruger også disse celler til at undersøge viral replikation, integration og dens indvirkning på værtscelleprocesser. En undersøgelse fra 2020 brugte SiHa-cellelinjen til at undersøge HPV E6/E7-onkoproteins rolle i udviklingen af livmoderhalskræft ved at angribe det med CRISPR-teknologi. Resultaterne afslørede, at knockdown af E6/E7-gener forårsagede SiHa-cellevæksthæmning og apoptose. Derfor kan disse virale gener tjene som vigtige lægemiddelmål for udvikling af terapier mod HPV-associeret livmoderhalskræft [3].
Kræftbiologi: SiHa-celler er en uvurderlig model til at studere livmoderhalskræfts biologi, herunder kræftudvikling, progression, metastase og invasion. Forskere bruger disse celler til at udforske de genetiske mutationer og underliggende molekylære veje, der bidrager til udvikling og vækst af livmoderhalskræft, som f.eks. en undersøgelse, der brugte SiHa-celler og fandt ud af, at opreguleret SEC61G (SEC61 translocon subunit gamma) fremmer spredning af livmoderhalskræftceller gennem aktivering af MAPK-kaskaden [4].
Screening og testning af lægemidler: SiHa er en meget anvendt livmoderhalskræftlinje til at vurdere effekten af potentielle lægemidler mod kræft, der er specifikke for HPV-associeret livmoderhalskræft. Forskere undersøger lægemidlers antiproliferative, apoptotiske og anti-metastatiske potentiale ved hjælp af disse celler. Som f.eks. en undersøgelse fra 2019, der undersøgte det cytotoksiske potentiale af frugtekstrakter fra Vatica diospyroides Symington Type SS på SiHa-cellelinjen for livmoderhalskræft [5].

SiHa-celler til din forskning!

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 305023

Forskningspublikationer med SiHa-celler

Nogle vigtige og ofte citerede forskningspublikationer indeholder SiHa-cellelinjen til livmoderhalskræft.

Anti-tumor-effekten af aloe-emodin på livmoderhalskræftceller var forbundet med human papillomavirus E6/E7 og glukosemetabolisme

Denne publikation i OncoTargets and Therapy (2019) foreslog, at en naturlig forbindelse aloe-emodin udøver HPV E6/E7- og glukosemetabolisme-associerede apoptotiske effekter i SiHa livmoderhalskræftceller.

Evaluering af anti-cancer potentiale af Excoecaria agallocha (L.) bladekstrakt på human livmoderhalskræft (SiHa) cellelinje og vurdering af den underliggende virkningsmekanisme

Denne artikel blev offentliggjort i Future Journal of Pharmaceutical Sciences i 2022. Dette studie undersøgte antitumoraktiviteterne af Excoecaria agallocha (L.) plantebladekstrakt i SiHa-cellelinjen for livmoderhalskræft.

Antiproliferativ effekt af 1, 10-Phenanthroline koblet til sulfaterede ZnO-nanopartikler i SiHa livmoderhalskræftcellelinje

Denne undersøgelse, der blev offentliggjort i Journal of Sol-Gel Science and Technology (2022), foreslog, at 1,10-fenantrolinmolekylet ved kobling med zinksulfatnanopartikler udøver betydelige antiproliferative virkninger i SiHa-celler.

Astragalosid IV hæmmer invasionen og metastasen af SiHa livmoderhalskræftceller via de TGF-β1-medierede PI3K- og MAPK-veje

Denne forskning blev offentliggjort i Oncology Reports i 2019. Undersøgelsen afslørede, at Astragaloside IV, et naturprodukt, undertrykker migration og invasion af SiHa-celler ved at modulere TGF-β1-medierede PI3K- og MAPK-signalveje.

IFI16 fremmer udviklingen af livmoderhalskræft ved at opregulere PD-L1 i det immunomikrobielle miljø gennem STING-TBK1-NF-kB-vejen

Denne undersøgelse i Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) afslørede, at IFI16 (interferon-gamma-inducerbart protein 16) regulerer PD-L1-genet via aktivering af STING-TBK1-NF-kB-vejen for at fremme væksten af SiHa-livmoderhalskræftceller.

Ressourcer til SiHa-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Her er nogle online-ressourcer med SiHa-celler.

Transfektion af SiHa-celler: Denne forskningsartikel indeholder en protokol til vedligeholdelse af SiHa livmoderhalskræftceller og til SiHa-celletransfektion.

Følgende link indeholder oplysninger om celledyrkning af SiHa-celler.

SiHa-cellelinje: Denne hjemmeside indeholder mange værdifulde data om SiHa-cellelinjen. Det omfatter oplysninger om vækstmedier, dyrkningsbetingelser, protokoller for subkulturering af SiHa-celler og håndtering af dens proliferative og kryopræserverede kulturer.

Ofte stillede spørgsmål om SiHa-celler til livmoderhalskræft

Referencer

Melzer, C., J. von der Ohe og R. Hass, Kortfattet gennemgang: Crosstalk af mesenkymale stroma/stamlignende celler med kræftceller giver terapeutisk potentiale. Stem cells, 2018. 36(7): p. 951-968.
Ostrowska, K.M., et al., Undersøgelse af indflydelsen af højrisiko human papillomavirus på den biokemiske sammensætning af livmoderhalskræftceller ved hjælp af vibrationsspektroskopi. Analyst, 2010. 135(12): p. 3087-3093.
Chen, Y., et al., In vitro og in vivo væksthæmning af humane livmoderhalskræftceller via human papillomavirus E6/E7 mRNA's spaltning af CRISPR/Cas13a-systemet. Antiviral forskning, 2020. 178: p. 104794.
Fan, Y., et al., SEC61G fremmer spredning af livmoderhalskræft ved at aktivere MAPK-signalvej. Disease Markers, 2022. 2022.
Chothiphirat, A., et al., Anticancerpotentiale af frugtekstrakter fra Vatica diospyroides symington type SS og deres effekt på programcelledød af livmoderhalskræftcellelinjer. The Scientific World Journal, 2019. 2019.