RBL-2H3-celler - Betydningen af RBL-2H3 i allergisk respons og immunologiske studier

RBL-2H3-cellelinjen er en rotteafledt basofil leukæmicellelinje, der bruges i immunologisk forskning. Den fungerer som et modelsystem til at studere mastcellers fysiologi, adfærd og funktioner. Disse celler bruges også til at studere allergiske reaktioner, immunologiske processer samt test og udvikling af lægemidler.

Artiklen vil give indsigt i RBL-2H3's oprindelse, generelle egenskaber, dyrkningskrav og forskningsanvendelser.

RBL-2H3-celler: Oprindelse og generelle egenskaber

Før du bruger en basofil cellelinje i din forskning, bør du kende dens oprindelse og generelle egenskaber. Denne del af artiklen vil informere dig om det grundlæggende ved RBL-2H3-celler. Såsom: Hvad er RBL-2H3-mastceller? Hvorfor bruge RBL-2H3-celler? Hvad er RBL-2H3-celler i basofil leukæmi hos rotter? Hvad er RBL-2H3-morfologien? Er RBL-2H3-celler udødelige?

RBL-2H3 er basofile leukæmiceller afledt af basofile celler fra Wistar-rotter i 1978 på National Institute of Dental Research Laboratory of Immunology.
RBL-2H3-celler har c-kit-receptortyrosinkinase- og mastcelleprotease II (RMCP-II)-receptorer, hvilket gør dem til en potentiel mastmodel. Derfor kaldes de almindeligvis mastceller på trods af deres oprindelse fra rottebasofiler [1].
De frigiver histamin og andre mediatorer ved aktivering og udtrykker IgE-receptorer med høj affinitet.
RBL-2H3-celler udviser fibroblastlignende morfologi.

Mikroskopisk visualisering af en mastcelle.

RBL-2H3-celler: Information om dyrkning

Dette afsnit hjælper dig med at lære nogle af de vigtigste aspekter ved dyrkning af RBL-2H3-cellelinjen. Du vil vide det: Hvad er RBL-2H3-cellernes fordoblingstid? Hvad er RBL-2H3-celleudsåningstætheden? Hvad er RBL-2H3-celledyrkningsprotokollen? Hvad er RBL-2H3-cellelinjens frysemedie?

Nøglepunkter for dyrkning af RBL-2H3-celler

Populationens fordoblingstid:	RBL-2H3-mastcellens fordoblingstid er ca. 50-60 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	RBL-2H3 er en adhærent cellelinje.
Sub-kultiveringsforhold:	For RBL-2H3-celler holdes splitforholdet mellem 1:2 og 1:4. De adhærente celler vaskes med magnesium- og calciumfri 1 x PBS-opløsning. Passageopløsningen Accutase tilsættes, og cellerne holdes ved omgivelsestemperatur i 10 minutter for at løsne sig fra bunden af dyrkningsbeholderen. Der tilsættes friske medier, og cellerne centrifugeres. De høstede celler resuspenderes omhyggeligt i frisk medie og hældes i nye kolber med vækstmedie.
Vækstmedium:	EMEM-medier, der indeholder 10 % FBS, 2 mM L-Glutamin, 2,2 g/L NaHCO3 og EBSS-salt, anvendes til dyrkning af RBL-2H3-celler. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:	RBL-2H3-celler dyrkes i en befugtet inkubator indstillet til 37 °C og tilsluttet en 5 %_CO2-kilde.
Opbevaring:	Cellerne opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser for at beskytte cellernes levedygtighed på lang sigt.
Fryseproces og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedier bruges til at fryse RBL-2H3-celler ved hjælp af en langsom fryseproces. Kort fortalt tillader denne metode et fald i temperaturen på 1 °C pr. minut og beskytter cellerne mod chok.
Optøningsproces:	RBL-2H3-celler optøs i et forudindstillet vandbad (37 °C) i ca. 60 sekunder. Bagefter tilsættes cellerne til frisk dyrkningsmedium og centrifugeres. Dette trin er vigtigt for at fjerne komponenter fra frysemediet. Derefter resuspenderes cellepelleten i et vækstmedium, og cellerne fordeles i en kolbe til dyrkning.
Biologisk sikkerhedsniveau:	RBL-2H3-cellerne skal opbevares i laboratorier med biosikkerhedsniveau 1.

Klæbende monolag af RBL-2H3-celler ved forskellige konfluenser i 20- og 10-foldig forstørrelse.

Fordele og begrænsninger ved RBL-2H3 Basofil cellelinje

RBL-2H3-celler bruges ofte i immunologisk forskning. Dette afsnit beskriver deres primære fordele og begrænsninger.

Fordele

Nemme at dyrke: RBL-2H3-celler kan nemt dyrkes og vedligeholdes i laboratoriemiljøet. Det letter omkostningseffektive og reproducerbare eksperimenter, hvilket gør dem til et populært valg til indledende undersøgelser inden for immunologi.

Begrænsninger

Ikke-menneskelig oprindelse: RBL-2H3-celler stammer fra rottebasofiler og efterligner muligvis ikke nøjagtigt menneskelige biologiske processer, hvilket kan begrænse deres anvendelighed i menneskespecifikke forskningsstudier. Dette nødvendiggør en forsigtig fortolkning af data, når man ekstrapolerer resultater til menneskelige systemer.
Forenklet mastcellemodel: Selvom disse celler giver en grundlæggende model til at studere mastcellefunktioner, repræsenterer de ikke fuldt ud den komplekse karakter af mastcelleinteraktioner i det menneskelige immunsystem. Derfor er det ikke sikkert, at de i tilstrækkelig grad modellerer mastcellernes mangefacetterede roller i immunresponser eller sygdomstilstande in vivo.

RBL-2H3-cellelinjen: En hjørnesten i immunologisk forskning

Basofil- og mastcelleforskning med brug af RBL-2H3-cellelinjen

RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, fungerer som en vigtig model til undersøgelse af basofilers og mastcellers biologi. Disse rotte-mastceller giver vigtig indsigt i frigivelse af mastcellemediatorer, som er afgørende for at forstå allergiske tilstande som allergisk rhinitis. Gennem disse celler udforsker forskerne cellereceptordynamikken og etableringen af immunologiske synapser, som er centrale for immunsystemets reaktion på allergener. En interessant undersøgelse, der blev offentliggjort i 2019, brugte RBL-2H3-cellelinjen og undersøgte mekanismerne bag pseudoallergiske reaktioner fremkaldt af Qingkailing-injektion. Undersøgelsen viste, at PI3K-RAC1-signalkaskaden delvist fremkalder denne allergiske reaktion i cellerne [2]

Immunologisk synapsedynamik i allergiforskning

RBL-2H3-celler anvendes i vid udstrækning i immunologisk forskning og er særligt effektive til at undersøge immunologisk synapsedynamik. Det hjælper med at belyse immunsystemets kommunikationsprocesser og kan bruges til at studere både perifert blod og peritoneale mastceller. Sådan forskning er afgørende for en omfattende forståelse af immunresponsen i både systemiske og lokaliserede sammenhænge

Screening af lægemidler og test af toksicitet

Ved screening og testning af lægemidler udnyttes RBL-cellernes reaktion på forskellige stimuli, herunder undersøgelsen af, hvordan H2O2 hæmmer IgE-medierede reaktioner. Disse celler spiller en vigtig rolle i udviklingen af behandlinger for sygdomme som streptokokinfektioner, hvor mitisgruppen af streptokokker hæmmer mastcelleaktivering. Derudover evaluerer forskere de toksiske virkninger af forskellige stoffer, herunder kemikalier, lægemidler og nanopartikler, ved hjælp af denne RBL 2H3 mc-model. En nylig undersøgelse (2022) vurderede f.eks. cytotoksiciteten af polystyren-mikroplast på RBL-2H3-celler. De fandt, at mikroplast beskadiger RBL-2H3-celleorganeller og fremmer celledød [3]. En anden undersøgelse fra 2021 evaluerede det antiallergiske og antiinflammatoriske potentiale i et naturligt produkt, neferin, ved hjælp af RBL 2H3 mc-modellen. Undersøgelsen afslørede forbindelsens gode anti-allergiske og anti-inflammatoriske egenskaber [4]

Avancerede metoder til immunologisk måling

Den konsekvente og målbare frigivelse af mediatorer fra RBL-2H3-celler gør dem ideelle til praktisk fluorimetri, hvilket muliggør præcise og nøjagtige målinger, der er afgørende for sygdomsundersøgelser og vurdering af terapeutiske midler.

RBL-2H3-cellelinjen, der stammer fra Rattus norvegicus, er et uvurderligt aktiv i både grundforskning og anvendt forskning inden for immunologi. Den giver store muligheder for at fremme vores viden om og behandling af immunologiske sygdomme

RBL-2H3-cellelinje til avanceret immunologisk forskning

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 305194

RBL-2H3-celler: Forskningspublikationer

Følgende er nogle spændende forskningspublikationer, der omhandler RBL-2H3-mastceller:

Hæmmende aktivitet af narirutin på degranulering af RBL-2H3-celler

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Immunopharmacology and Immunotoxicology (2021). Undersøgelsen foreslog, at narirutin, en naturlig forbindelse, udøver hæmmende virkninger på RBL 2H3-degranulering via regulering af NF-KB, MAPK og tyrosinkinase-signalvejen.

Effekter af apigenin på RBL-2H3, RAW264. 7 og HaCaT-celler: anti-allergiske, anti-inflammatoriske og hudbeskyttende aktiviteter

Denne forskning i International Journal of Molecular Sciences (2020) foreslog, at apigeninforbindelsen signifikant undertrykker allergiske og inflammatoriske reaktioner i RBL-2H3- og RAW264.7-celler. Derfor kan det tjene som et potentielt middel til bekæmpelse af immunrelaterede sygdomme.

Anti-inflammatoriske og anti-allergiske virkninger af saponarin og dets indvirkning på signalveje i RAW 264.7, RBL-2H3 og HaCaT-celler

Denne forskningsartikel i International Journal of Molecular Sciences (2021) evaluerede de anti-allergiske og anti-inflammatoriske virkninger af et naturprodukt, saponarin, ved hjælp af forskellige cellelinjer, herunder RBL-2H3.

Hæmmende effekt på frigivelse af β-hexosaminidase fra RBL-2H3-celler af ekstrakter og nogle rene bestanddele af Benchalokawichian, et thailandsk urtemedicin, der bruges mod allergiske lidelser

Denne evidensbaserede undersøgelse af komplementær og alternativ medicin (2014) viste, at ekstrakter af Benchalokawichian og nogle aktive bestanddele har en potentiel hæmmende effekt på frigivelse af RBL 2H3 ß-hexosaminidase.

Spirulina maxima-peptider undertrykker mastcelledegranulering via inaktivering af Akt- og MAPK-fosforylering i RBL-2H3-celler

Denne artikel blev offentliggjort i 2018 i International Journal of Biological Macromolecules. Undersøgelsen viste, at spirulina maxima, et naturprodukt, hæmmer RBL-2H3-degranulering ved at forhindre MAPK- og AKT-phosphorylering.

Ressourcer til RBL-2H3-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

RBL-2H3 er en meget anvendt mastcellelinje. De tilgængelige ressourcer, der dækker RBL-2H3-dyrkning og transfektionsprotokoller, er nævnt her:

RBL 2H3 MC-model: Denne forskningsartikel omfatter protokoller til vedligeholdelse af RBL-2H3-kulturer og til RBL-2H3-transfektion.

Her er nogle ressourcer, der forklarer RBL-2H3-celledyrkningsprotokollen:

RBL-2H3-celler: På dette websted kan du lære om celledyrkningsprotokoller for RBL-2H3-cellelinjen. Desuden indeholder den oplysninger om RBL-2H3-cellemedier og dyrkningsbetingelser.

RBL-2H3 cellelinje: Vigtige spørgsmål og svar for forskere

Referencer

Passante, E. og N. Frankish, The RBL-2H3 cell line: its provenance and suitability as a model for the mast cell. Inflamm Res, 2009. 58(11): p. 737-45.
Li, Q., et al., Pseudoallergisk reaktion forårsaget af Qingkailing-injektion delvist via PI3K-Rac1-signalvejen i RBL-2H3-celler. Toxicology Research, 2019. 8(3): p. 353-360.
Liu, L., et al., Polystyren-mikro(nano)plast beskadiger organellerne i RBL-2H3-celler og fremmer MOAP-1 for at fremkalde apoptose. Journal of Hazardous Materials, 2022. 438: p. 129550.
Chiu, K.-M., et al, Anti-allergiske og anti-inflammatoriske virkninger af neferin på RBL-2H3-celler. International Journal of Molecular Sciences, 2021. 22(20): p. 10994.