MX-1-cellelinje

MX-1 er en human adenokarcinomcellelinje, der stammer fra en xenotransplantationsmodel for brystkræft i athymiske mus. De humane adenokarcinomceller blev etableret fra en brysttumor hos en 29-årig kaukasisk kvinde. MX1-cellerne er triple-negative brystkræftceller (TNBC), der i vid udstrækning anvendes til forskning i lægemiddelresistens, cellesignalering, lægemiddelresponsmekanisme osv.

Oprindelse og generel information om MX-1-celler

Før du arbejder med denne cellelinje, bør du lære dens grundprincipper at kende. Vi vil gennemgå næsten alle de generelle oplysninger om MX-1-cellelinjen.

Den udødelige MX-1-cellelinje er en tumorigenisk cellelinje, der er etableret ud fra en xenotransplantation af en tumor. MX-1-celler betragtes som en type triple-negativ brystkræft (TNBC) [1]. Desuden er disse celler østrogenreceptor- og p53-negative, da de ikke udtrykker disse gener.

MX-1-celler - et modelsystem for triple-negativ brystkræft

Kulturbetingelserne for MX-1-cellelinjen er ikke krævende. Disse celler kan let opformeres og bruges i forskellige forskningslaboratorier til transfektionsstudier. Den transiente transfektionsmetode studerer almindeligvis de underliggende cellulære mekanismer og genekspressionsmønstre i denne cellelinje [2, 3].

Denne cellelinje er et godt modelsystem for brystkarcinomer. Den kan bruges til at forstå de molekylære mekanismer bag sygdomsprogression og til at screene og udvikle lægemidler til bekæmpelse af sygdommen. Mere specifikt kan den humane MX-1-brystadenokarcinomcellelinje være et alternativ til TNBC-celler, da den er østrogenreceptor-negativ [4].

MX-1 cellelinje: Information om dyrkning

• Fordoblingstid: Fordoblingstiden for INS-1-celler er ca. 44 timer.
• Vedhæftende eller i suspension: INS-1-celler vokser både i suspension og i adhærent form.
• Forhold for sub-kultivering: INS-1-celler subkultiveres i et splitforhold på 1:3. Kort fortalt opsamles suspenderede celler. Vedhæftende celler skylles med PBS og inkuberes med Accutase-opløsningen. Efter frigørelse tilsættes cellerne friske medier. Bagefter centrifugeres og opsamles både suspenderede og adhærente celler. Cellerne resuspenderes omhyggeligt og fordeles i de nye kolber til vækst.
• Vækstmedie: RPMI 1640 anvendes til dyrkning af INS-1 rotteinsulinomcellelinjen. Mediet er suppleret med 10 % varmeinaktiveret føtalt kvægserum, 2,1 mM stabil glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 og 1 mM natriumpyruvat.
• Vækstbetingelser: INS-1-celler opbevares i en befugtet inkubator med en temperatur på 37 °C og en kontinuerlig tilførsel af 5 % CO2.
• Opbevaring: INS-1 betaceller kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser på lang sigt.
• Fryseproces og medie: CM-1- eller CM-ACF-medier bruges til at fryse INS-1-celler gennem en langsom fryseproces. Den tillader kun et temperaturfald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed.
• Optøningsproces: Frosne INS-1-celler optøs i et vandbad, der er indstillet til 37 grader Celsius, i 40 til 60 sekunder. Efter optøning tilsættes cellerne friske medier og hældes direkte over i en ny kolbe til vækst. Efter 24 timer udskiftes mediet for at fjerne frysende mediekomponenter.
• Biologisk sikkerhedsniveau: Der kræves et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 for at dyrke INS-1 rotteinsulinomceller.

MX-1-celler: Anvendelser i forskning

Denne humane brystadenocarcinom MX-1-cellelinje bruges ofte i brystkræftundersøgelser i stedet for celler som MDA-MB-231 eller MCF-7. Her er et par særlige anvendelser af denne cellelinje i kræftforskning.

Mekanismer for lægemiddelresistens

MX-1-celler bruges til at studere de molekylære faktorer, der medierer udviklingen af resistens over for brystkræftmedicin. Undersøgelser har i vid udstrækning brugt MX-1-celler til at etablere lægemiddelresistente modeller. En undersøgelse offentliggjort i 2021 rapporterede om brugen af MX-1-celler til at generere en doxorubicin-resistent brystkræftcellelinje. Den udviklede cellemodel validerede ABC-transporteren ABCB1 og epithelial-mesenchymal transition (EMT) involvering i erhvervelse af kemoresistens [5].

Genekspression/cellesignalvej

MX-1-cellelinjen kan transfekteres transient for at belyse genekspressionsmønstre og cellesignaleringsveje. Undersøgelser har brugt MX-1-celler til shRNA (short hairpin RNA) og ikke-kodende RNA-transfektion for at udforske deres effekt på spredning og vækst af brystkræftceller. Desuden er tilknyttede gensignaleringsveje blevet belyst [2, 6].

Screening af potentielle inhibitorer

MX-1-celler kan bruges til at screene potentielle lægemidler mod brystkræft, da de efterligner kræftcellernes mikromiljø. Et forskningsstudie har vist den terapeutiske aktivitet af Vinorelbine, et mikrotubuli-toksin, der udløste celledød og polyploidi i MX-1-celler [4].

Bestil din MX-1-cellelinje i dag

Ressourcer til MX-1-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Der er begrænsede ressourcer til rådighed vedrørende dyrknings- og transfektionsmetoder, men vi har samlet så meget information som muligt til dig.

Protokoller for celledyrkning

MX-1-celler bruges i mange transiente transfektionsanalyser. Her har vi listet nogle få ressourcer, der kan hjælpe dig med transfektionsprotokollerne.

• Transfektion af MX-1-celler: Denne publikation beskriver protokollen for transfektion med siRNA i MX-1-celler til udvikling af en gen-knock-out-model.
• Transfektion af pattedyrsceller: Denne artikel indeholder alle de væsentlige oplysninger om transfektionsmetoder, der anvendes i pattedyrcellelinjer.

Vi håber, at denne artikel har givet dig værdifuld viden om MX-1-cellelinjen, og at du har fået en bedre forståelse af, hvordan du dyrker, vedligeholder og bruger disse celler i din forskning. Hvis du er interesseret i at arbejde med MX-1-cellelinjen, så tøv ikke med at bestille fra os for at kickstarte din forskningsrejse!

Ofte stillede spørgsmål om MX-1 brystkarcinomcellelinjen

Referencer

1. Stefanski, C.D. og J.R. Prosperi, Bekæmpelse af CHK1-resistens i tredobbelt negativ brystkræft: EGFR-hæmning som potentiel kombinationsbehandling. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al., Analogen af cGAMP, c-di-AMP, aktiverer STING-medieret celledødsvej i østrogenreceptornegative brystkræftceller. Apoptose, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomisk analyse af inhibitor afapoptoseproteinlignende protein-2på brystkræftcelleproliferation. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa, and J. Magae, Vinorelbine, a Microtubule Toxin, Induces Apoptosis and Polyploidy in MX-1, a Human Triple-Negative Breast Cancer Cell Line. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Nongenotoksisk ABCB1-aktivator tetraphenylphosphonium kan bidrage til doxorubicinresistens i MX-1 brystkræftcellelinjen. Videnskabelige rapporter, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics-analyse af brystkræft: Langt ikke-kodende RNA linc01561 fungerer som ceRNA, der er involveret i udviklingen af brystkræft. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.