MX-1-cellelinje

MX-1 er en human adenokarcinom-cellelinje fra brystet, der stammer fra en xenotransplantationsmodel for brystkræft i athymiske mus. De humane brystadenokarcinomceller blev etableret ud fra brysttumoren hos en 29-årig kaukasisk kvinde. MX1-celler er triple-negativ brystkræft (TNBC), som i vid udstrækning anvendes til forskning i lægemiddelresistens, cellesignalering, mekanismer for lægemiddelrespons osv.

Oprindelse og generelle oplysninger om MX-1-celler

Inden du arbejder med denne cellelinje, bør du sætte dig ind i dens grundlæggende egenskaber. Vi vil gennemgå næsten alle de generelle oplysninger vedrørende MX-1-cellelinjen.

Den udødelige MX-1-cellelinje er en tumorigen cellelinje, der er etableret ud fra en tumor-xenotransplantat. MX-1-celler betragtes som en type af tredobbelt-negativ brystkræft (TNBC) [1]. Desuden er disse celler østrogenreceptor- og p53-negative, da de ikke udtrykker disse gener.

MX-1-celler – et modelsystem for tredobbelt-negativ brystkræft

Dyrkningsbetingelserne for MX-1-cellelinjen er ikke krævende. Disse celler kan let formeres og anvendes i forskellige forskningslaboratorier til transfektionsstudier. Den transiente transfektionsmetode anvendes ofte til at undersøge de underliggende cellulære mekanismer og genekspressionsmønstre i denne cellelinje [2, 3].

Denne cellelinje er et solidt modelsystem for brystkarcinomer. Den kan anvendes til at forstå de molekylære mekanismer bag sygdommens progression samt til at screene og udvikle lægemidler til bekæmpelse af sygdommen. Mere specifikt kan den humane MX-1-brystadenokarcinomcellelinje udgøre et alternativ til TNBC-celler, da den er østrogenreceptor-negativ [4].

Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026

MX-1-cellelinje: Oplysninger om dyrkning

• Fordoblingstid: Fordoblingstiden for INS-1-celler er ca. 44 timer.
• Adhærent eller i suspension: INS-1-celler vokser både i suspension og i adhærent form.
• Subkultiveringsforhold: INS-1-celler subkultiveres med et opdelingsforhold på 1:3. Kort fortalt opsamles celler i suspension. Adhærente celler skylles med PBS og inkuberes med Accutase-opløsningen. Efter løsrivelse tilsættes cellerne frisk væske. Derefter centrifugeres både celler i suspension og vedhæftede celler og opsamles. Cellerne resuspenderes omhyggeligt og fordeles i nye kolber til vækst.
• Vækstmedium: RPMI 1640 anvendes til dyrkning af INS-1-rotteinsulinomcellelinjen. Mediet tilsættes 10 % varmeinaktiveret føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin, 10 mM HEPES, 2,0 g/L NaHCO3 og 1 mM natriumpyruvat.
• Vækstbetingelser: INS-1-celler opbevares i en befugtet inkubator indstillet til 37 °C og med en kontinuerlig tilførsel af 5 % CO₂.
• Opbevaring: INS-1-betaceller kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved temperaturer under -150 °C i en elektrisk fryser i længere tid.
• Fryseproces og medium: CM-1- eller CM-ACF-medier anvendes til at fryse INS-1-celler ved hjælp af en langsom fryseproces. Dette tillader kun et temperaturfald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed.
• Optøningsproces: Frosne INS-1-celler optøs i et vandbad, der er forindstillet til 37 grader Celsius, i 40 til 60 sekunder. Efter optøning tilsættes der frisk væske til cellerne, og de hældes direkte over i en ny kolbe til vækst. Efter 24 timer udskiftes væsken for at fjerne rester af frysemidlet.
• Biosikkerhedsniveau: Der kræves et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 til dyrkning af INS-1-insulinomceller fra rotter.

MX-1-celler: Anvendelser i forskning

Denne humane brystadenokarcinom-cellelinje MX-1 anvendes ofte i brystkræftstudier i stedet for celler som MDA-MB-231 eller MCF-7. Her er nogle særlige anvendelser af denne cellelinje inden for kræftforskning.  

Mekanismer for lægemiddelresistens

MX-1-celler anvendes til at undersøge de molekylære faktorer, der medierer udviklingen af resistens over for brystkræftlægemidler. I studier har man i vid udstrækning anvendt MX-1-celler til at etablere lægemiddelresistente modeller. En undersøgelse offentliggjort i 2021 rapporterede om brugen af MX-1-celler til at generere en doxorubicinresistent brystkræftcellelinje. Den udviklede cellemodel bekræftede, at ABC-transportøren ABCB1 og den epitel-mesenkymale overgang (EMT) er involveret i udviklingen af kemoresistens [5].

Genekspression/cellesignalveje

MX-1-cellelinjen kan transfekteres midlertidigt for at belyse genekspressionsmønstre og cellesignalveje. I undersøgelser er der anvendt MX-1-celler til transfektion med shRNA (short hairpin RNA) og ikke-kodende RNA for at undersøge deres effekt på brystkræftcellers proliferation og vækst. Desuden belyses de tilknyttede gensignalveje [2, 6].

Screening af potentielle hæmmere

MX-1-celler kan anvendes til screening af potentielle lægemidler mod brystkræft, da de efterligner kræftcellernes mikromiljø. En forskningsundersøgelse har påvist den terapeutiske virkning af vinorelbin, et mikrotubulustoksin, som udløste celledød og polyploidi i MX-1-celler [4].

Bestil din MX-1-cellelinje i dag

MX-1-cellelinje – Ressourcer: Protokoller, videoer og mere

Der findes kun begrænsede ressourcer vedrørende dyrknings- og transfektionsmetoder, men vi har samlet så mange oplysninger som muligt til dig.

Protokoller til cellekultivering

MX-1-celler anvendes i mange undersøgelser af transient transfektion. Her har vi listet nogle ressourcer, der kan hjælpe dig med transfektionsprotokollerne.

• Transfektion af MX-1-celler: Denne publikation beskriver protokollen for transfektion med siRNA i MX-1-celler med henblik på udvikling af en gen-knockout-model.
• Transfektion af pattedyrceller: Denne artikel indeholder alle de væsentlige oplysninger om transfektionsmetoder, der anvendes i pattedyrcellelinjer.

Vi håber, at denne artikel har givet dig værdifuld viden om MX-1-cellelinjen, og at du har fået en bedre forståelse af, hvordan du dyrker, vedligeholder og anvender disse celler i din forskning. Hvis du er interesseret i at arbejde med MX-1-cellelinjen, så tøv ikke med at bestille hos os for at sætte gang i din forskningsrejse!

Ofte stillede spørgsmål om MX-1 brystkarcinomcellelinjen

Referencer

1. Stefanski, C.D. og J.R. Prosperi, Bekæmpelse af CHK1-resistens ved tredobbelt negativ brystkræft: EGFR-hæmning som potentiel kombinationsbehandling. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): s. 229.
2. Vasiyani, H., et al., Analoget til cGAMP, c-di-AMP, aktiverer den STING-medierede celledødsvej i østrogenreceptor-negative brystkræftceller. Apoptosis, 2021. 26: s. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomisk analyse af inhibitor of apoptosis protein‑like protein‑2 på brystkræftcellers proliferation. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): s. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa og J. Magae, Vinorelbin, et mikrotubulustoksin, inducerer apoptose og polyploidi i MX-1, en human tredobbelt-negativ brystkræftcellelinje. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): s. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Den ikke-genotoksiske ABCB1-aktivator tetraphenylphosphonium kan bidrage til doxorubicinresistens i brystkræftcellelinjen MX-1. Scientific reports, 2021. 11(1): s. 1-11.
6. Jiang, R., et al., Mixomics-analyse af brystkræft: Det lange ikke-kodende RNA linc01561 fungerer som ceRNA, der er involveret i udviklingen af brystkræft. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: s. 1-9.