Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026

Jurkat E6.1-cellelinje

Jurkat E6.1 er en klon af Jurkat-cellelinjen, en udødeliggjort human T-lymfocytcellelinje, der stammer fra perifert blod. Den blev først etableret i 1977 og anvendes i forskning vedrørende T-celle-receptorsignalering, adoptiv terapi med T-celler og andre lymfocytter mod kræft, forskning i blodrelaterede protoonkogener, celleoverlevelse og celledifferentiering.

I denne artikel vil vi gennemgå alle de oplysninger og forudsætninger, du skal kende, inden du påbegynder dit arbejde med Jurkat E6.1-klonede cellelinjer, herunder:

1. Oprindelse, historie og generelle oplysninger
2. Cellekulturkarakteristika
3. Anvendelser af Jurkat E6.1-cellelinjer
4. Forskningspublikationer
5. Fordele og begrænsninger
6. Ressourcer: Protokoller, videoer og mere

 1. Oprindelse, historie og generelle oplysninger

Her finder du alle nødvendige oplysninger om Jurkat E6.1-cellelinjens historie, oprindelse og generelle egenskaber samt håndtering i cellekultur.

• Jurkat E6.1 er en immortaliseret human T-lymfocytcellelinje. Denne klonede cellelinje er et derivat af Jurkat-cellelinjen, der blev udvundet fra det perifere blod hos en 14-årig dreng, der led af akut lymfoblastisk leukæmi i 1976. Efter isolering fra blodet blev denne cellelinje oprindeligt benævnt JM, idet JM og Jurkat angiver, at disse cellelinjer er isoleret fra den samme patient. Jurkat E6.1-cellelinjen blev klonet fra cellederivater kendt som Jurkat-FHCRC.
• E6.1-cellelinjer stammer fra leukæmi; disse cellelinjer anvendes til at øge ekspressionen af IL-2 via stimulering med monoklonale antistoffer eller lektin. De udtrykker T-celle-antigenreceptorer; derfor kan disse cellelinjer anvendes i undersøgelsen af immunsystemsygdomme og inden for immunonkologisk forskning.
• Cellemorfologi for Jurkat E6.1-celler: Jurkat E6.1-celler blev isoleret fra en leukæmipatient og har en ændret morfologi sammenlignet med T-lymfocytter, hvilket gør dem til udødelige cellelinjer. Lymfoblastcellen dannes, når naive lymfocytter aktiveres ved antigenpræsentation fra antigenpræsenterende celler. Dette resulterer i øget vækst i cellekernen, cytoplasmaet, mRNA og proteiner.
• Cellestørrelse: Jurkat E6.1-cellelinjer er klonede og udødeliggjorte, og deres diameter ligger typisk mellem 10 og 16 μm (diameteren kan variere afhængigt af suspensionstypen). Disse cellelinjer har en meget sfærisk celleform.
• Genom og kromosomantal: Disse cellelinjer er pseudodiploide cellelinjer af humane T-lymfocytter, hvor det modale kromosom er kromosom 46. Undersøgelser viser desuden, at det modale kromosom forekommer i ca. 74 % af cellerne, og at polyploidihastigheden er ca. 5,3 %. Karyotypestudierne viste en karyotype med 46, X, Y, -2, -18, del (2) (p21p23), del (18) (p11.2). X- og Y-kromosomer har typisk en normal kopi i de fleste cellelinjer.
• Jurkat-cellelinjer vs. E6.1 Jurkat-cellelinjer: Jurkat-cellelinjer er de primære stamcellelinjer, der først blev isoleret fra en patient med akut lymfoblastisk leukæmi. E6.1 Jurkat-cellelinjerne er derimod klonede afledninger af Jurkat-FHCRC-cellelinjerne.

Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026

Anvendelser af Jurkat E6.1-cellelinjer

Jurkat E6.1-cellelinjen anvendes især inden for forskning og undersøgelse af lidelser knyttet til immunsystemet og de dermed forbundne kræftformer. Desuden har den vist sig velegnet til undersøgelse af visse kompleksiteter i forbindelse med HIV-infektion, da CD4-T-celle-receptoren er nødvendig for retroviralt indtrængning.

Nedenfor beskrives nogle af de vigtigste anvendelsesområder for disse cellelinjer:

Modelsystem for T-celle-signalering og apoptotiske signalveje: Denne cellelinje, der stammer fra T-celle-leukæmi, anvendes i vid udstrækning i forskning, der involverer TCR-signalkaskaden. Jurkat E6.1 frigiver større mængder IL-2 og IL-8, som efterfølgende bidrager til T-celleaktivering og udløser de inflammatoriske signalveje. Denne cellelinje er også kendt for sit hyperfosforylerede Pyk2 og sin forøgede produktion af Vav1, hvilket har afgørende indflydelse på omlægningen af aktin-cytoskelettet i T-celler. TCR-segregationen i Jurkat-cellelinjen E6-1 kan ligeledes forbedres ved kraftig ekspression af LFA-1, hvilket dermed styrker TCR-signalering og IL-2-ekspression. Der gennemføres også undersøgelser af celleproliferation og cellecyklus i Jurkat E6.1-cellelinjer. Disse er blevet foretrukket til undersøgelse af apoptotiske signalveje og induktion af DNA-skader ved hjælp af forbindelser afledt af marine og plantebaserede kilder. En undersøgelse fra 2013 vurderede virkningen af epigonalt konditioneret medie fra hajer på humane celler ved hjælp af disse cellelinjer. Tilsvarende blev den hæmmende virkning af det plantebaserede stof hirsutin på celleproliferation undersøgt i Jurkat E6.1-cellelinjer. Ofte anvendes Jurkat E6.1 også i kræftforskning til at evaluere udvalgte målmolekyler. Indflydelsen af marine neurotoksiner såsom brevetoksiner (PbTx) er ligeledes blevet undersøgt i disse cellelinjer.

HIV-undersøgelser: En af de mest betydningsfulde anvendelser af Jurkat E6.1-cellelinjer er deres evne til at fungere som en egnet model for HIV-undersøgelser på grund af deres egenskab til at udløse forskellige signalbegivenheder, der inducerer TCA. Jurkat E6.1-cellelinjer er ikke kun blevet anvendt til at forstå HIV-aktivering, men også til at analysere mekanismerne bag HIV-latens. HIV-replikation og -infektion er blevet grundigt undersøgt i disse cellelinjer, hvor cellerne kan underkastes genredigering og genknockout, som det blev gjort i en undersøgelse fra 2021. Virkningen af lægemiddelafgivelse på HIV-infektion, såsom langtidsvirkende efavirenz (Efa)–enfuvirtide (Enf)-co-ladede polymer-lipid-hybrid-nanopartikler (PLN) på virusindtrængning, blev undersøgt ved hjælp af Jurkat E6.1-cellelinjer. CRISPR/Cas9-modificerede Jurkat E6.1-celler er blevet anvendt adskillige gange til at undersøge mekanismerne bag HIV-indtrængning, replikation og infektion.

Forskningspublikationer

Her er et par bemærkelsesværdige eksempler fra den omfattende samling af forskning, herunder Jurkat E6.1-cellelinjer.

Selenmetabolitten methylselenol regulerer ekspressionen af ligander, der udløser immunaktivering via lymfocytreceptoren NKG2D

Ved hjælp af Jurkat E6.1, inkuberet i forskellige selenforbindelser, blev ligandekspressionen og overfladeekspressionen af MICA/B undersøgt.

Caracasinsyre, et ent-3,4-seco-kauren, fremmer apoptose og celledifferentiering gennem hæmning af NF-κB-signalvejen i leukæmiceller.

Forståelse af caracasinsyre-induceret cytotoksicitet i humane T-cellelinjer såsom Jurkat E6.1 og HL-60.

Bevis for in vitro-udvikling af lægemiddelresistens over for azidothymidin i T-lymfocytiske leukæmicellelinjer (Jurkat E6–1/AZT-100) og hos pædiatriske patienter med HIV-1-infektion

Anvendte Jurkat E6.1-celler, der var inkuberet i længere tid med lægemidlet AZT, til at undersøge azidothymidin (AZT)-resistens hos HIV-1-inficerede patienter.

Undersøgelser af Jurkat E6.1-cellelinjen vedrørende virkningerne af visse bioindoler på membranfluiditeten

I denne forskning blev der anvendt et polariseret fluorescensanalysesystem til at forstå indvirkningen af bioindoler, herunder serotonin, tryptofan og melatonin, på cellemembranens fluiditet i Jurkat E6.1-cellelinjer.

Molekylær mekanisme for induktion af apoptose i Jurkat E6-1-celler ved hjælp af et alkaloidekstrakt fra Tribulus terrestris

Alkaloidekstrakt fra Tribulus terrestris inducerede apoptose i Jurkat E6.1-celler for at forstå den underliggende virkningsmekanisme.

Forøget LFA-1-ekspression forbedrer immunsynapsarkitekturen og T-celle-receptorsignalering i Jurkat E6.1-celler

T-celle-receptorsignalering i Jurkat E6.1-celler blev forstærket ved kraftigt at øge LFA-1-ekspressionen.

Fordele og begrænsninger

Ligesom andre cellelinjer har Jurkat E6.1 sine fordele og begrænsninger.

Fordele

Der er mange grunde til, at den foretrækkes i disse anvendelser:

• Vækstform

  Jurkat E6.1 er en suspensions- og ikke-adhærent cellelinje, hvilket betyder, at den vokser i suspension og ikke klæber sig fast til kulturoverfladen.

• Genekspression

  Jurkat E6.1-cellelinjen udtrykker gener, der koder for interleukin-2 (IL-2) og CD3. Ved stimulering med monoklonale antistoffer, lektiner eller phorbolestere mod det T3-antigene kompleks har disse celler vist sig at producere forstærket IL-2.

• Ekspression af antigener

  Jurkat E6.1-cellelinjen udtrykker CD3-antigenet, der er forbundet med T-celleaktivering og signalering.

• Ekspressionsmarkører

  Cellelinjen udtrykker T-celleantigenreceptor (TCR)-markører, som er afgørende for T-cellegenkendelse og immunrespons.

• Anvendelighed til transfektion

  Jurkat-klon E6.1-cellelinjen er velegnet til transfektionsforsøg, hvilket muliggør indføring af eksogent genetisk materiale i cellerne til forskellige forskningsformål.

Begrænsninger

Efter fordelene vil vi nu gennemgå de begrænsninger, der er forbundet med brugen af Jurkat E6.1-cellelinjer:

• Celletransfektion med viral vektor

  Transfektion af Jurkat E6.1-celler er udfordrende på grund af deres T-celleoprindelse. Typisk kræves der dyre og tidskrævende virale vektorer til genetisk modifikation. Ikke-virale vektorer har vist lav transfektionseffektivitet og betydelig toksicitet i Jurkat-celler.

• Bakteriel kontaminering

  Jurkat E6.1-cellekulturer bør overvåges for potentiel bakteriel kontaminering for at sikre eksperimentresultaternes integritet.

• Virale kontamineringer

  Jurkat E6.1-cellelinjer udtrykker forskellige kemokinreceptorer og lave niveauer af CD4, hvilket letter virusets indtrængning. Dette gør dem modtagelige for T-celle-inficerende vira såsom HTLV og HIV.

6. Ressourcer: Protokoller, videoer og mere

Dette afsnit vil omhandle metoder og protokoller til cellekultivering og transfektion samt undervisningsvideoer relateret til denne cellelinje:

Protokoller til cellekultivering

Her er nogle grundlæggende dyrkningsprocedurer, der skal følges for denne cellelinje:

• SOP for cellekultur, formering af Jurkat: University of California har også stillet en metode til rådighed på deres USCS Genome-browser til dyrkning af Jurkat-klon E6-1.
• Jurkat, klon E6-1 – dyrkning og håndtering: Elabscience har medtaget en protokol for håndtering af dyrkningen på deres produktbeskrivelsesside.

Transfektionsprotokoller

Her er en liste over de forskellige tilgængelige transfektionsprotokoller:

• Transfektionsprotokol for Jurkat-celler med Lipofectamine LTX-reagens: En transfektionsprotokol for Jurkat-celler ved brug af Lipofectamine LTX-reagens fra ThermoFisher. 
• Amaxa™ 4D-Nucleofector™-protokol til Jurkat-klon E6.1 [ATCC®]: Lonza Group AG har leveret transfektionsprotokollen til Jurkat-klon E6.1 fra ATCC ved brug af 4D-Nucleofector® X-enheden.

Videoer om Jurkat E6.1

Der findes flere fremragende videoer, der dækker begreber inden for cellekultur, procedurer, proliferation, udpladning og andre emner.

• Passering af celler: Grundlæggende cellekultur: Dette er en fremragende video med en grundlæggende vejledning i passering af humane cellelinjer fra ThermoFisher.
• Optøning af celler: Grundlæggende cellekultur: Denne video indeholder grundlæggende instruktioner om cellekultur og optøning fra ThermoFisher.
• Protokol for transfektion af plasmid-DNA: Denne video fokuserer på protokollen for transfektion af plasmid-DNA med Lipofectamine® LTX og Plus™-reagens fra ThermoFisher.
• Måling af apoptose ved hjælp af Jurkat-celler i suspension behandlet med 3 mikromolar staurosporin: Denne video demonstrerer, hvordan man udfører en apoptoseanalyse på Celigo-billedcytometeret ved hjælp af Hoechst- og caspase 3/7-reagenser fra Nexcelom Bioscience.