Hep3B-celler: Forskning og opdagelse af hepatocellulært karcinom

HEP3B er en udødelig hepatocytcarcinom-cellelinje, der stammer fra mennesker. Den bruges i vid udstrækning til forskning i hepatotoksicitet og lægemiddelmetabolisme. HEP3B-transfektionseffektiviteten er betydelig, og derfor bruges disse celler ofte til at studere udvikling og progression af leverkræft samt terapeutiske indgreb. Denne artikel dækker alle de nødvendige oplysninger om HEP3B-cellelinjen for at hjælpe dig med at arbejde med den. Den vil hovedsageligt omfatte:

Generelle karakteristika og oprindelse af HEP3B-celler
Information om dyrkning af HEP3B-cellelinjen
HEP3B-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
Anvendelser af HEP3B-celler i forskning
Publikationer om HEP3B-cellelinjen
Ressourcer til HEP3B-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere

1.generelle egenskaber og oprindelse af HEP3B-celler

De primære oplysninger, du har brug for om en cellelinje, er dens oprindelse og generelle karakteristika. Det kan hjælpe dig med at beslutte, hvordan den skal bruges i din forskning, og hjælpe dig med at håndtere den. Dette artikelafsnit dækker alle de væsentlige oplysninger om HEP3B's oprindelse og egenskaber. Her vil du lære: Hvad er Hep 3B-cellelinjer? Hvad er Hep3B-cellernes oprindelse? Hvad er HEP3B-cellernes morfologi?

HEP3B, en kontinuerlig human hepatomcellelinje, stammer fra levervæv fra en 8-årig afrikansk dreng med hepatocellulært karcinom (HCC). Den blev etableret af Aden og kolleger i 1979 i Barbara B. Knowles' laboratorium på Wistar Institute i Philadelphia, USA [1].
HEP3B-celler har en integration af hepatitis B-virus (HBV)-genomet i sit kromosom.
Disse hepatocytkarcinomceller udviser en epitelial morfologi.
HEP3B-cellerne har et modalt kromosomtal på 60. I modsætning til HepG2 har de ikke et rearrangeret kromosom 1.

Hvad er forskellen mellem HepG2 og Hep3B?

HepG2 og HEP3B adskiller sig ved antallet af kromosomer pr. celle. HEP3B indeholder 60 kromosomer, mens HepG2-celler i gennemsnit har 55 kromosomer. Desuden er HepG2 ikke-tumorigen og hepatitis B-negativ, mens HEP3B er tumorigen og HBV-positiv.

Leverkarcinom i høj forstørrelse under mikroskopet.

2.oplysninger om dyrkning af HEP3B-cellelinjen

Viden om dyrkningsoplysningerne for en cellelinje kan gøre det lettere at arbejde med den. Dette afsnit dækker alle de vigtigste punkter for dyrkning af HEP3B HBV-cellelinjen, herunder: Hvad er fordoblingstiden for Hep3B-celler? Hvad er betingelserne for dyrkning af HEP3B? Hvordan dyrker man HEP3B HCC-celler?

Nøglepunkter for dyrkning af HEP3B-celler

Fordoblingstid:	Fordoblingstiden for HEP3B-celler er ca. 36 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	Denne hepatomcellelinje er adhærent.
Opdelingsforhold:	HEP3B-celler subkultiveres i forholdet 1:2 til 1:4. Vedhæftende HEP3B-celler skylles med 1 x PBS og inkuberes derefter med Accutase-dissociationsopløsningen. Efter 8 til 10 minutter tilsættes friske medier, og cellerne centrifugeres. De høstede celler resuspenderes derefter omhyggeligt og hældes i kolber, der indeholder kulturmedier i et anbefalet splitforhold.
Vækstmedie:	EMEM-medier, der indeholder 10 % FBS, 2,2 g/L NaHCO3, 2 mM L-Glutamin og Earle's Balanced Salt Solution (EBSS), anvendes til dyrkning af HEP3B-celler.
Vækstbetingelser:	HEP3B-celler dyrkes i en 37°C befugtet inkubator med en kontinuerlig 5% CO2-forsyning.
Opbevaring:	Frosne HEP3B-celler opbevares ved en temperatur på under -150 °C i en elektrisk fryser eller i dampfasen af flydende nitrogen.
Fryseproces og -medium:	Det anbefalede frysemedium til HEP3B-celler er CM-1 eller CM-ACF. Cellerne nedfryses ved hjælp af en langsom nedfrysningsproces, der kun tillader et temperaturfald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:	Frosne celler optøs i et vandbad, der er indstillet til 37 °C i 40 til 60 sekunder. Senere tilsættes disse celler til det friske vækstmedium og centrifugeres for at fjerne elementer fra frysemediet. De opsamlede celler resuspenderes og fordeles i nye kolber til vækst.
Biologisk sikkerhedsniveau:	Der kræves et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 til dyrkning af HEP3B-celler.

Fastsiddende semi-flydende lag af Hep3B-celler ved 10× og 20× forstørrelse.

3.hEP3B-cellelinje: Fordele og begrænsninger

HEP3B er en meget anvendt hepatocellulær karcinomcellelinje. Dette afsnit vil fokusere på nogle af de vigtigste fordele og begrænsninger ved disse hepatomceller.

Fordele og begrænsninger

De vigtigste fordele ved HEP3B-celler er:

Nemme at dyrke	HEP3B-celler har ingen krævende krav til celledyrkning, hvilket gør dem nemme at håndtere og vedligeholde i et forskningslaboratorium. Det forenkler de eksperimentelle procedurer.
Høj transfektionseffektivitet	HEP3B-celler udviser en bemærkelsesværdig transfektionseffektivitet, hvilket gør dem meget anvendte i genetisk manipulation og genekspressionsrelaterede undersøgelser.
Tumorigenicitet	HEP3B er en tumorigenisk hepatocellulær carcinom-cellelinje, der er i stand til at danne tumorer, når den injiceres i en immunkompromitteret mus. Det gør det lettere at studere kræftprogression og -udvikling ved hjælp af HEP3B xenograft-modeller.
HEP3B's P53-status	HEP3B-celler har en P53-genmutation, der ligner hepatocellulært karcinom (HCC) og andre kræftformer, hvilket gør dem relevante til undersøgelse af P53-mutationens effekt på kræftvækst, -udvikling og -progression.

Begrænsninger

Begrænsningen i forbindelse med HEP3B-cellelinjen er:

In vitro-cellemodel

HEP3B-cellelinjen fungerer som en in vitro-model af hepatocellulære karcinomceller (HCC). Men den repræsenterer muligvis ikke fuldt ud kompleksiteten af HCC, som den findes i levende organismer. Derfor kan eksperimentelle resultater in vitro afvige fra dem, der observeres in vivo.

4.anvendelse af HEP3B-celler i forskning

HEP3B-cellelinjen tilbyder flere forskningsanvendelser inden for biomedicinsk forskning. Nogle af de vigtigste forskningsanvendelser af HEP3B-cellerne omfatter:

Kræftbiologi: HEP3B er en human hepatocellulær karcinomcellelinje. Det er en uvurderlig cellemodel til at undersøge celle- og molekylære mekanismer, der ligger til grund for udvikling og progression af HCC. Forskere bruger disse celler til at studere genetiske mutationer, cellulære processer og cellesignaleringsveje, der er forbundet med leverkræft. I en undersøgelse brugte man HEP3B-celler og fandt, at mikroRNA-223-3p regulerer NLRP3-inflammasomkomponenter, hæmmer spredning og øger apoptosen i HEP3B-hepatocarcinomceller [2].
Screening og udvikling af lægemidler: HEP3B-cellelinjen bruges også til at teste, screene og udvikle nye lægemidler mod leverkarcinom. Desuden bruges den til at evaluere toksiciteten og effekten af forskellige kræftlægemidler og -behandlinger. Forskerne brugte også disse hepatomceller til at studere lægemiddelmetabolisme. Forskere brugte HEP3B-celler og vurderede det cytotoksiske potentiale af Cotinus coggygria-planteekstrakt på HEP3B-hepatocytkarcinomceller [3].
Virale infektioner: HEP3B er en hepatitis B-virus-positiv cellelinje; derfor bruges den til at studere virusinfektioner, der kan føre til udvikling af leverkræft, dvs. HBV og HCV. Det kan hjælpe med at forstå virusinfektioner bedre og udvikle potentielle antivirale behandlinger. I en undersøgelse brugte man f.eks. HEP3B-hepatocytkræftceller og undersøgte ubiquitineringens betydning for udbredelsen af hepatitis c-virus. Resultaterne tydede på, at ubiquitin-specifik protease 15 (USP15) er involveret i udbredelsen af HCV via regulering af hepatocyt-specifikke funktioner, herunder dannelse af lipiddråber og HCV RNA-translation [4].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 305141

5.publikationer om HEP3B-cellelinjen

Denne del af artiklen dækker et par interessante forskningspublikationer om HEP3B-celler.

Regulering af apoptose og autofagi ved hjælp af luteolin i humane hepatocellulære cancer Hep3B-celler

Denne publikation i Biochemical and Biophysical Research Communications (2019) foreslog, at luteolinforbindelsesinduceret endoplasmatisk retikulumstress kan udøve antitumoreffekter i P53-null HEP3B-celler på en P53-uafhængig måde.

Potentiel målretning af Hep3B leverkræftceller med lupeol isoleret fra Avicennia marina

Denne undersøgelse i Archiv der Pharmazie (2021) foreslog et pentacyklisk triterpenoid, lupeol, som et potentielt anticancer-middel mod HEP3B-celler.

Ethanolekstrakt fra Cnidium monnieri (L.) Cusson inducerer cellecyklusstop og apoptose via regulering af den p53-uafhængige vej i HepG2- og Hep3B-hepatocellulære karcinomceller

Denne artikel er udgivet i Molecular Medicine Reports (2017). Undersøgelsens resultater viser, at Cnidium monnieri (L.) Cusson ethanolekstrakt inducerer celledød (apoptose) og cellecyklusstop i hepatocarcinomceller HepG2 og HEP3B gennem regulering af p53 og Akt/GSK-3β signalvej.

Auranofin forstærker sulforaphan-medieret apoptose i hepatocellulære karcinom Hep3B-celler gennem inaktivering af PI3K/Akt-signalvejen

Denne forskning offentliggjort i Biomolecules and Therapeutics (2020) foreslog, at auranofin udviser synergistisk aktivitet og fremmer den sulforaphan-medierede apoptose af HEP3B-celler via PI3K / AKT-vejaktivering.

Cirkulært RNA-0072309 har antitumorpåvirkninger i Hep3B-cellelinjen ved at målrette mod mikroRNA-665

Denne forskningsartikel i BioFactors (2023) foreslog, at cirkulært RNA-0072309 udøver antitumoreffekter i hepatocellulære karcinomceller HEP3B via målretning mod miRNA-665.

6.ressourcer til HEP3B-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Følgende er nogle få tilgængelige ressourcer om HEP3B-celler:

HEP3B-transfektion: Denne video forklarer transfektionsprotokollen for HEP3B-celler.
HEP3B-transfektionseffektivitet: Dette link hjælper dig med at lære HEP3B DMEM-mediets sammensætning, cellepassage og transfektionsprotokol for HEP3B-celler. Derudover giver det oplysninger om optimering af HEP3B lipofectamine 3000-reagenset i din transfektionsprotokol.

Følgende link indeholder HEP3B-celledyrkningsprotokollen:

HEP3B-kulturbetingelser: Dette link hjælper dig med at lære protokollen til håndtering og vedligeholdelse af Huh7- og HEP3B-kulturer.
HEP3B-celler: Denne hjemmeside har masser af information om HEP3B-celler, herunder HEP3B-medier, protokollen for celledeling, optøning og håndtering af proliferative og kryopræserverede kulturer.

Referencer

Puttahanumantharayappa, L.D., et al., Origin and prop-erties of hepatocellular carcinoma cell lines. Japanese J Gastroenterol Res, 2021. 1(8): p. 1040.
Wan, L., et al., miRNA-223-3p regulerer NLRP3 for at fremme apoptose og hæmme proliferation af hep3B-celler. Eksperimentel og terapeutisk medicin, 2018. 15(3): p. 2429-2435.
Danjolli-Hashani, D. og S. Selen-Isbilir, Cytotoksisk effekt af Cotinus coggygria-ekstrakt på Hep3B-kræftcellelinjen. Natural Product Research, 2022: s. 1-4.
Kusakabe, S., et al., USP15 deltager i udbredelsen af hepatitis C-virus gennem regulering af viral RNA-translation og dannelse af lipiddråber. Journal of Virology, 2019. 93(6): s. 10.1128/jvi. 01708-18.