BEAS-2B-celler – BEAS-2B-celler i forskning i luftvejssygdomme: En omfattende guide
BEAS-2B er en immortaliseret og ikke-tumorigen human lungeepitelcellelinje. Den er en meget udbredt in vitro-model til at undersøge lungecellers reaktion på forskellige kræftfremkaldende stoffer og toksiner. Derudover er den et værdifuldt forskningsværktøj til at undersøge forskellige luftvejsinfektioner og -sygdomme, såsom COVID-19 og lungekræft.
- Vækstmedium
- BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) medier indeholdende 10 % føtal bovint serum anvendes til dyrkning af BEAS-2B-lungecellelinjen. Medierne bør udskiftes hver 2. til 3. dag.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for BEAS-2B-populationen er ca. 26 timer.
- Væksttype
- BEAS-2B er en epitel-lignende adhærent cellelinje.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-1
- Kan bestilles hos
- Cytion — Bestil BEAS-2B
I denne artikel vil vi diskutere næsten alle aspekter af BEAS-2B-lungecellelinjen, herunder dens oprindelse, information om cellekulturen, fordele, ulemper og anvendelser i forskning. Vi vil især gennemgå:
- Oprindelse og generelle egenskaber ved BEAS-2B-cellerne
- BEAS-2B-cellelinje: Oplysninger om dyrkning
- Fordele og ulemper ved BEAS-2B-celler
- Anvendelser af BEAS-2B-cellelinjen i forskning
- BEAS-2B-celler: Forskningspublikationer
- Protokoller for cellekultivering
1. Oprindelse og generelle karakteristika for BEAS-2B-celler
Det første, man ser efter i en cellelinje, er dens oprindelse og generelle egenskaber. Her vil du lære de vigtigste egenskaber og oprindelsen af BEAS-2B humane bronkiale epitelceller at kende. Du vil studere: Hvad er BEAS-2B-lungecellelinjen? Hvilken type celler er BEAS-2B? Hvad er oprindelsen til BEAS-2B-celler?
- BEAS-2B, bronkieepitelcellelinjen, blev udviklet fra et ikke-kræftagtigt humant lungevæv i 1988 af Curtis C. Harris' gruppe [1].
- BEAS-2B-celler har en epitel-lignende morfologi.
HBEpC vs. BEAS-2B
HBEpC er humane primære bronkiale epitelceller. Ligesom BEAS-2B er de normale humane bronkiale epitelceller. De har dog en begrænset levetid sammenlignet med de udødeliggjorte BEAS-2B-celler. Begge cellelinjer kan bruges til at studere lungebiologi, toksikologi og sygdomsmodellering.
BEAS-2B-cellelinje: Oplysninger om dyrkning
Oplysninger om dyrkning af en cellelinje kan gøre dit arbejde med den lettere. I dette afsnit af artiklen lærer du alt det grundlæggende om dyrkning af BEAS-2B-lungecellelinjen. Vi vil især lære: Hvad er BEAS-2B-fordoblingstiden? Hvad er BEAS-2B-medier? Er BEAS-2B-cellelinjen adhærent? Hvordan dyrker man BEAS-2B-celler?
Vigtige punkter ved dyrkning af BEAS-2B-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for BEAS-2B-populationen er ca. 26 timer.
Adhærent eller i suspension:
BEAS-2B er en epitel-lignende adhærent cellelinje.
Celledensitet:
Den anbefalede celletæthed for BEAS-2B-cellelinjen er 1 til 2 × 104 celler/cm2. Adhærente BEAS-2B-celler skylles med phosphatbuffersaltvand og inkuberes med Accutase ved stuetemperatur i et par minutter. Når cellerne er dissocieret, tilsættes frisk medium, og cellerne opsamles ved centrifugering. De opsamlede celler resuspenderes omhyggeligt og hældes i den nye kolbe til vækst.
Vækstmedium:
BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) medier indeholdende 10 % føtal bovint serum anvendes til dyrkning af BEAS-2B-lungecellelinjen. Mediet bør udskiftes hver 2. til 3. dag.
Vækstbetingelser:
BEAS-2B-kulturen opbevares ved 37 °C i en befugtet inkubator med en kontinuerlig tilførsel af 5 % CO2.
Opbevaring:
Frosne BEAS-2B-cellehætteglas kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller i en elektrisk fryser ved en temperatur under -150 °C.
Fryseproces og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier anvendes til frysning af BEAS-2B-lungecellelinjen. Cellerne fryses ved kun at tillade et temperaturfald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed. Denne type metode kaldes langsom frysning.
Optøningsproces:
Frosne eller kryokonserverede BEAS-2B-kulturer optøs i et 37 °C varmt vandbad indeholdende et antimikrobielt middel i 40 til 60 sekunder. Derefter tilsættes cellerne medier og kan dyrkes direkte i nye kolber eller centrifugeres for at fjerne komponenterne i frysemediet. Derefter resuspenderes de opsamlede celler og dyrkes. I det første tilfælde fjernes frysemediet efter 24 timer.
Biosikkerhedsniveau:
Der kræves laboratorier med biosikkerhedsniveau 1 til håndtering af BEAS-2B-kulturer.
Fordele og ulemper ved BEAS-2B-celler
Ligesom andre cellelinjer er BEAS-2B-celler også forbundet med visse fordele og ulemper. Nogle af disse beskrives nedenfor.
Fordele
Fordelene ved BEAS-2B-cellelinjen omfatter:
Immortaliseret cellelinje
Den humane bronkiale epitelcellelinje BEAS-2B er blevet udødeliggjort. Derfor fortsætter den med at vokse uden at gå i senescens. Denne egenskab ved BEAS-2B-celler eliminerer behovet for gentagen udvinding af primære humane lungeepitelceller med en kortere levetid.
Let at dyrke
BEAS-2B-kulturer er nemme at vedligeholde. Cellerne vokser og formerer sig ubesværet under standarddyrkningsbetingelser. Der er ingen krævende eller komplicerede krav til cellekultivering.
Humant oprindelse
BEAS-2B-cellelinjen er af human oprindelse og relevans. Den er derfor en ideel in vitro-model til at studere reaktioner, adfærd og processer i humane luftvejsepitelceller.
Ulemper
Ulemperne ved BEAS-2B-lungecellelinjen er:
Transformerede humane lungeepitelceller
BEAS-2B-celler er transformeret med Ad12-SV40 2B-virus, hvilket kan ændre deres adfærd og reaktioner i forhold til de oprindelige bronkieepitelceller, der stammer fra humant lungevæv.
Anvendelser af BEAS-2B-cellelinjen i forskning
BEAS-2B-cellelinjen har flere anvendelsesmuligheder inden for biomedicinsk forskning. Nogle almindelige anvendelser af BEAS-2B-celler er:
- Toksikologi: BEAS-2B-celler bruges ofte til at undersøge genotoksicitet og cytotoksicitet hos forskellige toksiner, miljøforurenende stoffer og kemikalier. Forskere anvender denne bronkiale epitelcellelinje til at evaluere disse stoffers skadelige virkninger på lungesundheden. Desuden undersøger de også de underliggende molekylære mekanismer. For eksempel vurderede en undersøgelse udført i 2021 toksiciteten af cadmiummetal i BEAS-2B-cellelinjen. Forskningsresultaterne afslørede, at cadmium inducerede celledød og mitokondrieskader i BEAS-2B-lungecellelinjen gennem modulering af MAPK-signalvejen [2]. En anden undersøgelse anvendte BEAS-2B-cellelinjen til at evaluere toksiciteten af zinkoxid-nanopartikler under oxidativt stress [3].
- Modellering af luftvejssygdomme: BEAS-2B-cellelinjen er et fremragende forskningsværktøj og in vitro-model til at studere luftvejssygdomme såsom kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL), astma, lungekræft og virusinfektioner såsom SARS-CoV-2. Forskere har en tendens til at fremkalde sygdomsrelaterede tilstande i BEAS-2B-cellelinjen og undersøge de underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Dette hjælper med at identificere potentielle lægemiddelmål og udvikle personaliserede behandlinger. Forskning udført i 2022 anvendte BEAS-2B-cellelinjen og undersøgte østrogens og dets receptorer rolle i SARS-CoV-2-infektion. Resultaterne afslørede, at højere ekspression af GPER1-østrogenreceptoren reducerer BEAS-2B SARS-CoV-2-virusbelastningen. Derfor kan den være involveret i SARS-CoV-2-virusinfektion eller -replikation [4].
5. BEAS-2B-celler: Forskningspublikationer
Her følger nogle interessante og mest citerede forskningsstudier, der omhandler BEAS-2B-celler.
Toksicitet af grafen i normale humane lungeceller (BEAS-2B)
Denne undersøgelse blev offentliggjort i 2011 i Journal of Biomedical Nanotechnology. Forskningen foreslog, at grafitoxid inducerer apoptose og cytotoksicitet i den normale bronkiale epitelcellelinje (BEAS-2B).
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Denne undersøgelse undersøgte det terapeutiske potentiale af naringenin, et flavonoid, i BEAS-2B-cellelinjen. Resultaterne tyder på, at naringenin beskytter BEAS-2B-lungeceller mod paraquat-induceret toksicitet eller oxidativ skade.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i Inhalation Toxicology (2011). Her vurderede forskerne toksicitetseffekten af magnetiske nanopartikler med amorfe siliciumdioxidbelægninger i BEAS-2B-cellelinjen in vitro.
Denne artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) foreslog, at ursodeoxycholsyre kan hindre unormal migration af luftvejsepitelceller og forhindre skader forårsaget af interaktionen mellem SARS-CoV-2-spike-proteinet og ACE-2. Det kan således bidrage til at genoprette epitelets basallag.
Effekter af radon på miR-34a-induceret apoptose i humane bronkiale epitelceller BEAS-2B
Denne undersøgelse blev offentliggjort i 2019 i Journal of Toxicology and Environmental Health. Forskningsresultaterne viser, at kronisk eksponering for radon kan fremme kræftdannelse i humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) ved at aktivere mikroRNA-34a.
Cellekulturprotokoller
Cellekulturprotokollen for BEAS-2B-celler er beskrevet her.
- BEAS-2B-subkultivering: Dette dokument hjælper dig med at lære om BEAS-2B-medier og subkultiveringsprocedurer.
- BEAS-2B-cellelinje: Denne hjemmeside indeholder alle de grundlæggende oplysninger, du har brug for for at komme i gang med at arbejde med BEAS-2B-cellelinjen, herunder medier og protokoller til håndtering af prolifererende og kryopræserverede kulturer.
Referencer
- Han, X., et al., Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium inducerede apoptose og mitokondrieskader i BEAS-2B-celler via MAPK-signalvejen. Chemosphere, 2021. 263: s. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toksicitet af zinkoxid (ZnO)-nanopartikler på humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) forstærkes af oxidativt stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): s. 1762-1766.
- Costa, A.J., et al., Overekspression af østrogenreceptoren GPER1 og G1-behandling reducerer SARS-CoV-2-infektion i BEAS-2B-bronkialceller. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: s. 111775.