BEAS-2B-celler - BEAS-2B-celler i forskning i luftvejssygdomme: En omfattende guide
BEAS-2B er en udødeliggjort og ikke-tumorigen human lungeepitelcellelinje. Det er en meget anvendt in vitro-model til at studere lungecellers reaktion på forskellige kræftfremkaldende og giftige stoffer. Derudover er det et værdifuldt forskningsværktøj til at studere forskellige luftvejsinfektioner og sygdomme, såsom COVID-19 og lungekarcinomer.
I denne artikel vil vi diskutere næsten alle aspekter af BEAS-2B-lungecellelinjen, herunder dens oprindelse, oplysninger om celledyrkning, fordele, ulemper og anvendelser inden for forskning. Vi vil især gennemgå:
- BEAS-2B-cellernes oprindelse og generelle egenskaber
- BEAS-2B-cellelinjen: Information om dyrkning
- Fordele og ulemper ved BEAS-2B-celler
- Anvendelser af BEAS-2B-cellelinjen i forskning
- BEAS-2B-celler: Forskningspublikationer
- Protokoller for celledyrkning
1. BEAS-2B-cellernes oprindelse og generelle egenskaber
Det første, man kigger efter i en cellelinje, er dens oprindelse og generelle karakteristika. Her vil du lære de vigtigste egenskaber og oprindelsen af BEAS-2B humane bronkiale epitelceller. Du kommer til at studere: Hvad er BEAS-2B lungecellelinjen? Hvilken type celler er Beas 2B? Hvad er BEAS-2B-cellernes oprindelse?
- BEAS-2B, bronkialepitelcellelinjen, blev udviklet fra ikke-cancerøst humant lungevæv i 1988 af Curtis C. Harris' gruppe [1].
- BEAS-2B-celler har en epitellignende morfologi.
HBEpC mod BEAS-2B
HBEpC er primære bronkiale epitelceller fra mennesker. I lighed med BEAS-2B er de normale humane bronkiale epitelceller. De har dog en begrænset levetid sammenlignet med udødeliggjorte BEAS-2B. Begge cellelinjer kan bruges til at studere pulmonal biologi, toksikologi og sygdomsmodellering.
2.bEAS-2B cellelinje: Information om dyrkning
Oplysninger om dyrkning af en cellelinje kan gøre dit arbejde med den lettere. I dette artikelafsnit lærer du alt det grundlæggende om dyrkning af BEAS-2B lungecellelinjen. Især vil vi vide: Hvad er fordoblingstiden for BEAS-2B? Hvad er BEAS-2B-mediet? Er BEAS-2B-cellelinjen adhærent? Hvordan dyrker man BEAS-2B-celler?
Nøglepunkter for dyrkning af BEAS-2B-celler
|
Fordoblingstid: |
BEAS-2B-populationens fordoblingstid er ca. 26 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
BEAS-2B er en epitellignende adhærent cellelinje. |
|
Celletæthed: |
Den anbefalede celletæthed for BEAS-2B-cellelinjen er 1 til 2 ×104 celler/cm2. Fastsiddende BEAS-2B-celler skylles med fosfatbuffersaltvand og inkuberes med Accutase ved omgivelsestemperatur i et par minutter. Når cellerne er dissocieret, tilsættes friske medier, og cellerne opsamles ved centrifugering. De høstede celler resuspenderes omhyggeligt og hældes i den nye kolbe til vækst. |
|
Vækstmedie: |
BEGM-mediet (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium), der indeholder 10 % føtalt bovint serum, bruges til dyrkning af BEAS-2B-lungecellelinjen. Mediet skal udskiftes hver 2. til 3. dag. |
|
Vækstbetingelser: |
BEAS-2B-kulturen holdes ved 37 °C i en befugtet inkubator med en kontinuerlig tilførsel af 5 % CO2. |
|
Opbevaring: |
Frosne BEAS-2B-celleglas kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller i en elektrisk fryser ved en temperatur på under -150 °C. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1 eller CM-ACF frysemedier anvendes til nedfrysning af BEAS-2B lungecellelinjen. Cellerne nedfryses ved kun at tillade et temperaturfald på 1 °C pr. minut for at beskytte cellernes levedygtighed. Denne type metode kaldes langsom nedfrysning. |
|
Optøningsproces: |
Frosne eller kryopræserverede BEAS-2B-kulturer optøs i et 37 °C varmt vandbad, der indeholder et antimikrobielt middel, i 40 til 60 sekunder. Bagefter tilsættes cellerne medier og kan dyrkes direkte i nye kolber eller centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemedierne. Derefter resuspenderes de indsamlede celler og dyrkes. I førstnævnte tilfælde fjernes frysemediet efter 24 timer. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
Der kræves laboratorier på biosikkerhedsniveau 1 til håndtering af BEAS-2B-kulturer. |
3.fordele og ulemper ved BEAS-2B-celler
Ligesom andre cellelinjer er BEAS-2B-celler også forbundet med nogle fordele og ulemper. Nogle af disse diskuteres nedenfor.
Fordele og ulemper
Fordelene ved BEAS-2B-cellelinjen er bl.a:
|
Udødeliggjort cellelinje |
BEAS-2B human bronkial epitelcellelinje er blevet udødeliggjort. Derfor fortsætter den med at vokse uden at gå i aldring. Denne BEAS-2B-celleegenskab eliminerer behovet for gentagen udvinding af primære humane lungeepitelceller med en kortere levetid. |
|
Let at dyrke |
BEAS-2B-kulturer er nemme at vedligeholde. Cellerne vokser og formerer sig ubesværet under almindelige dyrkningsforhold. Der er ingen besværlige eller komplicerede krav til celledyrkning. |
|
Menneskelig oprindelse |
BEAS-2B-cellelinjen har en menneskelig oprindelse og relevans. Derfor er den en ideel in vitro-model til at studere menneskelige luftvejsepitelcellers reaktioner, adfærd og processer. |
Ulemper
Ulemperne forbundet med BEAS-2B-lungecellelinjen er:
|
Transformerede humane lungeepitelceller |
BEAS-2B-celler er transformeret med Ad12-SV40 2B-virus, hvilket kan ændre deres adfærd og respons i forhold til de oprindelige bronkiale epitelceller, der stammer fra humant lungevæv. |
4.anvendelse af BEAS-2B-cellelinjen i forskning
BEAS-2B-cellelinjen har flere anvendelsesmuligheder inden for biomedicinsk forskning. Nogle almindelige anvendelser af BEAS-2B-celler er:
- Toksikologi: BEAS-2B-celler bruges ofte til at undersøge genotoksiciteten og cytotoksiciteten af forskellige toksiner, miljøforurenende stoffer og kemikalier. Forskere bruger denne bronkiale epitelcellelinje til at evaluere de skadelige virkninger af disse stoffer på lungesundheden. Desuden studerer de også de underliggende molekylære mekanismer. En undersøgelse fra 2021 vurderede f.eks. toksiciteten af cadmiummetal i BEAS-2B-cellelinjen. Forskningsresultaterne afslørede, at cadmium inducerede celledød og mitokondriel skade i BEAS-2B-lungecellelinjen gennem modulering af MAPK-signalvejen [2]. En anden undersøgelse brugte BEAS-2B-cellelinjen til at evaluere toksiciteten af zinkoxidnanopartikler under oxidativ stress [3].
- Modellering af luftvejssygdomme: BEAS-2B-cellelinjen er et godt forskningsværktøj og en in vitro-model til at studere luftvejssygdomme som kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL), astma, lungekræft og virusinfektioner som SARS-CoV-2. Forskere har en tendens til at fremkalde sygdomsrelaterede tilstande i BEAS-2B-cellelinjen og undersøge de underliggende cellulære og molekylære mekanismer. Det hjælper med at identificere potentielle lægemiddelmål og udvikle personlige behandlingsformer. Forskning udført i 2022 brugte BEAS-2B-cellelinjen og undersøgte østrogen og dets receptorers rolle i SARS-CoV-2-infektion. Resultaterne viste, at højere ekspression af GPER1-østrogenreceptoren reducerer BEAS-2B SARS-CoV-2-virusbelastningen. Derfor kan den være involveret i SARS-CoV-2-virusinfektion eller -replikation [4].
5.bEAS-2B-celler: Forskningspublikationer
Følgende er nogle interessante og mest citerede forskningsstudier med BEAS-2B-celler.
Grafenens toksicitet i normale humane lungeceller (BEAS-2B)
Denne undersøgelse blev offentliggjort i 2011 i Journal of Biomedical Nanotechnology. Forskningen foreslog, at grafitoxid inducerer apoptose og cytotoksicitet i den normale bronchiale epitelcellelinje (BEAS-2B).
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Denne undersøgelse udforskede det terapeutiske potentiale af naringenin, et flavonoid, i BEAS-2B-cellelinjen. Resultaterne tyder på, at naringenin beskytter BEAS-2B-lungeceller mod paraquat-induceret toksicitet eller oxidativ skade.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i Inhalation Toxicology (2011). Heri vurderede forskerne toksicitetseffekten af magnetiske nanopartikler med amorfe silica-belægninger i BEAS-2B-cellelinjen in vitro.
Denne artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) foreslog, at ursodeoxycholic acid kan hindre unormal migration af luftvejsepitelceller og forhindre skader forårsaget af SARS-CoV-2 spike protein og ACE-2 interaktion. Det kan således hjælpe med at genoprette det epitheliale basallag.
Effekter af radon på miR-34a-induceret apoptose i humane bronkialepitelceller BEAS-2B
Denne undersøgelse blev offentliggjort i 2019 i Journal of Toxicology and Environmental Health. Forskningsresultaterne viser, at kronisk eksponering for radon kan fremme carcinogenese i humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) ved at aktivere microRNA-34a.
6.protokoller for celledyrkning
Celledyrkningsprotokollen for BEAS-2B-celler er nævnt her.
- BEAS-2B subkulturering: Dette dokument hjælper dig med at lære om BEAS-2B-medier og subkultureringsprocedurer.
- BEAS-2B cellelinje: Dette websted indeholder alle de grundlæggende oplysninger, du har brug for til at begynde at arbejde med BEAS-2B-cellelinjen, herunder dens medier og protokoller til håndtering af prolifererende og kryopræserverede kulturer.
Referencer
- Han, X., et al, Human lung epithelial BEAS-2B cells exhibit characteristics of mesenchymal stem cells. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Cadmium inducerede BEAS-2B-cellers apoptose og mitokondrieskade via MAPK-signalvej. Chemosphere, 2021. 263: p. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toksiciteten af zinkoxid (ZnO) nanopartikler på humane bronkiale epitelceller (BEAS-2B) forstærkes af oxidativ stress. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): p. 1762-1766.
- Costa, AJ, et al., Overekspression af østrogenreceptoren GPER1 og G1-behandling reducerer SARS-CoV-2-infektion i BEAS-2B-bronkialceller. Molekylær og cellulær endokrinologi, 2022. 558: p. 111775.