B16-celler - Grundlæggende guide til B16-melanomceller i onkologisk forskning

B16 er en hudkræftcellelinje (melanom) af murin oprindelse. Denne cellelinje er en effektiv in vitro-model til undersøgelse af hudkræft hos mennesker. Den bruges ofte til at undersøge dannelse af solide tumorer og metastase af kræftceller.

Denne artikel vil hjælpe dig med at forstå det grundlæggende i B16-melanomcellelinjen. Specifikt vil den gennemgå følgende:

1.generelle karakteristika og oprindelse af B16-cellelinjen

Denne del af artiklen dækker de karakteristiske træk ved B16-melanomcellelinjen. Du vil få svar på følgende ofte stillede spørgsmål. Såsom Hvad er B16-cellelinjen? Hvor stammer B16-cellerne fra? Hvad er størrelsen på B16-celler?

B16-cellelinjen blev etableret i 1954. Disse celler stammer fra C57BL/6J-mus, som spontant fik en tumor i huden på Jackson Laboratories i Maine.
Det er melaninproducerende epitelceller, der har evnen til at metastasere i milt, lever og lunger.
Melanom B16-cellerne vokser som monolag og udviser epitellignende og spindelformet cellemorfologi.
Størrelsen på B16-cellelinjen er ca. 15,4 μm.
Der findes forskellige subkloner af B16-celler, herunder B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 og B16F10. Disse sublinjer adskiller sig fra de oprindelige B16-celler og har nogle særlige kendetegn. De har f.eks. en forskel i morfologi, cellestørrelse og andre egenskaber. B16F10 har en høj lungemetastatisk evne, og B164A5 er den mest aggressive hudkræftcellelinje sammenlignet med B16F10, B16-GMCSF og B16FLT3 [1].

3D-animation af et nærbillede af en voksende hudkræft, som f.eks. malignt melanom, der betænder det omgivende væv.

2.information om dyrkning af B16-cellelinjen

Før du vedligeholder eller dyrker en cellelinje, leder du måske efter vigtige oplysninger om fordoblingstid, celletype, vækstmedier, dyrkningsbetingelser osv. Dette afsnit indeholder alle de nødvendige oplysninger om dyrkning af B16-celler.

Nøglepunkter for dyrkning af B16-celler

Populationens fordoblingstid:	Den gennemsnitlige fordoblingstid for B16-celler anslås til at være 24 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	B16-celler er adhærente og vokser i monolag.
Udsåningstæthed:	Det anbefales at udså B16-celler med en celletæthed på 1 til 2 x¹⁰⁴ ^celler/cm2. Tilhæftede B16-celler skylles med 1 x PBS og dissocieres fra overfladen ved hjælp af Accutase-opløsning. Cellerne centrifugeres, og cellepelleten resuspenderes i vækstmediet. Senere fordeles disse celler i en ny kolbe til vækst.
Vækstmedium:	B16-celler dyrkes i EMEM (Eagle's Minimum Essential Medium), der indeholder 10 % føtalt bovint serum (FBS). Vækstmediet skal fornyes 2-3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:	En befugtet inkubator med 5 %_{CO2-tilførsel} og 37 °C temperatur bruges til at dyrke B16-cellelinjen.
Opbevaring:	Disse celler opbevares ved en temperatur på under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at beskytte cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:	CM-1 eller CM-ACF frysemedium bruges til at fryse B16-celler ved hjælp af en langsom fryseproces.
Optøningsproces:	Frosne B16-celler optøs ved 37 °C i et vandbad, der indeholder et antimikrobielt middel. Optøede celler kan dyrkes direkte ved at fordele dem i kolber, der indeholder vækstmedium. Desuden kan disse celler centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemediet og derefter dyrkes i nye medier.
Biologisk sikkerhedsniveau:	B16-cellelinjen skal håndteres eller vedligeholdes i et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1.

Semi-flydende lag af B16-melanomceller under 10x og 20x forstørrelse.

3. b16-cellelinje: Fordele og ulemper

Ligesom andre cellelinjer har B16 en unik blanding af fordele og ulemper. Nogle væsentlige fordele og ulemper ved denne melanomcellelinje er anført i dette afsnit.

Fordele og ulemper

B16 er det første effektive murine værktøj, der er meget brugt i metastaseforskning på grund af de fordele, den tilbyder. Nogle af fordelene ved denne hudkræftcellelinje er:

Let at dyrke	B16-cellelinjen er nem at dyrke i forskningslaboratorier. Den bruges i vid udstrækning til at studere kræftcellers biologi, signalveje og meget mere.
Hurtig vækst	B16-melanomcellelinjen har en høj proliferationsrate, hvilket gør den velegnet til at studere celledeling og vækstprocesser.
Tumorigenicitet	B16 er en tumorigen cellelinje med tumorlignende egenskaber som invasion, migration og proliferation. Den er værdifuld til at studere tumordannelse, progression og metastase.

Ulemper

Ulemperne forbundet med B16-cellelinjen er:

Manglende menneskelig relevans	Da B16 er en musemelanomcellelinje, repræsenterer den muligvis ikke nøjagtigt den menneskelige hudkræftbiologi, hvilket begrænser overførbarheden af forskningsresultater.
Heterogenitet	B16-celler er heterogene og udviser forskellige genetiske og fænotypiske egenskaber inden for den samme kultur. Det kan påvirke resultaternes pålidelighed og reproducerbarhed.

4. anvendelser af B16-celler

B16-cellelinjen bruges i vid udstrækning i forskningsstudier. Nogle få lovende anvendelser af denne cellelinje er:

Tumorbiologi: Denne murine hudkræftcellelinje er tumorigen og bruges i vid udstrækning til at forstå tumorbiologi. Flere undersøgelser er blevet udført for at udforske de cellulære mekanismer bag tumorcellevækst, spredning og metastase ved hjælp af B16-celler. Et forskningsstudie udført i 2020 brugte B16-celler til at undersøge den rolle, som det lange ikke-kodende RNA, LncRNA MEG3, spiller i dannelsen af melanom, vækst og metastase. Denne forskning viste, at det ikke-kodende RNA modulerer miRNA-21/E-Cadherin-aksen for at stimulere disse cellulære begivenheder [2]. På samme måde blev der udført forskning for at undersøge den potentielle rolle af Notch1-signalering i tumorinduceret immunosuppression ved hjælp af B16-celler [3].
Opdagelse af lægemidler: B16-celler bruges til at validere og teste de potentielle terapeutiske virkninger af lægemiddelkandidater. En undersøgelse evaluerede antitumoreffekten af neogamboginsyre, en naturlig forbindelse, ved hjælp af en B16-cellelinje. Resultaterne af undersøgelsen viste, at dette stof modulerer PI3K/Akt/mTOR-signalvejen for at forårsage kræftcelledød [4]. Et andet studie undersøgte anti-melanom-effekten af Ginsenoside Rg3, et saponin, ved hjælp af B16-cellelinjen. Forskningen foreslog, at denne naturlige forbindelse forårsagede antitumoraktivitet ved at nedregulere ERK- og Akt-veje [5].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 305154

5.forskningspublikationer med B16-celler

Her er nogle vigtige forskningspublikationer med B16-melanomcellelinjen.

LncRNA MEG3 fremmer melanomvækst, metastase og dannelse gennem modulering af miR-21/E-cadherin-aksen

Denne publikation i tidsskriftet Cancer Cell International (2020) foreslog, at langt ikke-kodende RNA MEG3 forbedrer dannelsen, væksten og metastasen af B16-melanomceller ved at modulere miRNA-21/E-Cadherin-aksen.

Et nyt psoralen-derivat - MPFC - øger melanogenesen via aktivering af p38 MAPK og PKA-signalveje i B16-celler

Denne artikel blev offentliggjort i International Journal of Molecular Medicine i 2018. Dette studie undersøgte den melanogene effekt og mekanismerne i et psoralen-derivat - 4-methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g] chromen-2-on (MPFC) i B16-celler. Undersøgelsen foreslog, at dette derivat fremmer melanogenese ved at stimulere PKA- og p38 MAPK-cellesignalering.

Notch1-signalering i melanomceller fremmer tumorinduceret immunosuppression via opregulering af TGF-β1

Denne forskning blev offentliggjort i 2018 i Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Resultaterne af undersøgelsen tyder på, at aktivering af Notch1-signalering i B16-celler kan forhindre antitumorimmunitet ved at øge udtrykket af TGF-β1-genet.

Neogamboginsyre inducerer apoptose af melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvejen

Denne undersøgelse blev udført af Chunlan Wu og hans kolleger i 2020 og offentliggjort i tidsskriftet Acta Biochimica Polonica. Denne forskning viser, at neogamboginsyre, en naturlig forbindelse, kan forårsage B16-melanomcelledød ved at modulere PI3K/Akt/mTOR-signalkaskaden.

Et iridium (III)-kompleks som potent kræftmiddel inducerer apoptose og autofagi i B16-celler gennem hæmning af AKT/mTOR-vejen

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i European Journal of Medicinal Chemistry i 2018. I dette studie undersøgte forskerne anti-cancer-aktiviteten af en forbindelse, iridium (III)-kompleks, ved hjælp af B16-melanomceller.

Ailanthone inducerer cellecyklusstop og apoptose i melanom B16- og A375-celler

Denne undersøgelse foreslog, at en plantebioaktiv, Ailanthone, besidder anticancerpotentiale, da den kan fremkalde apoptose og cellecyklusstop i B16- og A375-melanomceller. Artiklen blev offentliggjort i Biomolecules i 2019.

6. ressourcer til B16-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Der er begrænsede ressourcer til B16-cellelinjen, som forklarer dens dyrknings- og transfektionsprotokoller.

Dyrkning af melanomceller: Denne video giver værdifulde tips til dyrkning af melanomcellelinjer.
Subdyrkning af en cellelinje: Denne video forklarer en generel subkultureringsprotokol for en cellelinje.
Transfektion af B16F10-cellelinjen: Denne video forklarer transfektionsprotokollen for en sublinje af B16-melanomceller. Den kan hjælpe dig med at optimere transfektionsprotokollen for B16-celler.

Følgende er nogle celledyrkningsprotokoller for B16-celler.

Dyrkning af B16-celler: Dette websted indeholder alle de nødvendige oplysninger om dyrkning af B16-celler, herunder vækstmedier, subdyrkning, optøning og nedfrysning af celler.

Referencer

Danciu, C., et al., Behaviour of four different B 16 murine melanoma cell sublines: C57 BL/6J hud. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): p. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 fremmer melanomvækst, metastase og dannelse gennem modulering af miR-21/E-cadherin-aksen. Cancer cell international, 2020. 20: p. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1-signalering i melanomceller fremmede tumorinduceret immunosuppression via opregulering af TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): p. 1-13.
Wu, C., et al., Neogamboginsyre inducerer apoptose af melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvejen. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): p. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumoraktivitet af ginsenosid Rg3 i melanom gennem nedregulering af ERK- og Akt-vejene. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): p. 2069-2079.