B16-celler – Grundlæggende guide til B16-melanomceller i onkologisk forskning

B16 er en hudkræftcellelinje (melanom) af musoprindelse. Denne cellelinje er en effektiv in vitro-model til undersøgelse af hudkræft hos mennesker. Den bruges ofte til at undersøge dannelsen af solide tumorer og metastasering af kræftceller.

📋 B16-cellelinje — hurtige fakta

Vækstmedium: B16-celler dyrkes i EMEM-medium (Eagle's Minimum Essential Medium), der indeholder 10 % føtal bovint serum (FBS). Vækstmediet bør udskiftes 2-3 gange om ugen.
Fordoblingstid: Den gennemsnitlige fordoblingstid for B16-celler anslås til 24 timer.
Væksttype: B16-celler er adhærente og vokser i monolag.
Biosikkerhedsniveau: BSL-1
Fås hos: Cytion — Bestil B16

Denne artikel vil hjælpe dig med at forstå det grundlæggende om B16-melanomcellelinjen. Den vil specifikt gennemgå følgende:

📋 Indhold

Generelle karakteristika og oprindelse af B16-cellelinjen
Oplysninger om dyrkning af B16-cellelinjen
B16-cellelinjen: Fordele og ulemper
Anvendelser af B16-celler
5. Forskningspublikationer om B16-celler
Ressourcer til B16-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Ofte stillede spørgsmål

Generelle egenskaber og oprindelse af B16-cellelinjen

Dette afsnit af artiklen vil omhandle de karakteristiske træk ved B16-melanomcellelinjen. Du vil få svar på følgende ofte stillede spørgsmål. F.eks. Hvad er B16-kræftcellelinjen? Hvor stammer B16-celler fra? Hvad er størrelsen på B16-celler?

B16-cellelinjen blev etableret i 1954. Disse celler stammer fra C57BL/6J-mus, der spontant udviklede en tumor i huden på Jackson Laboratories i Maine.
Dette er melaninproducerende epitelceller, der har evnen til at metastasere i milten, leveren og lungerne.
Melanom-B16-cellerne vokser som monolag og udviser epitel-lignende og spindelformet cellemorfologi.
Størrelsen af B16-cellelinjen er ca. 15,4 μm.
Der findes forskellige subkloner af B16-celler, herunder B16GMCSF, B164A5, B16FLT3 og B16F10. Disse sublinjer adskiller sig fra de oprindelige B16-celler og bevarer nogle specifikke træk. De adskiller sig f.eks. i morfologi, cellestørrelse og andre egenskaber. B16F10 har en høj evne til lungemetastaser, og B164A5 er den mest aggressive hudkræftcellelinje sammenlignet med B16F10, B16-GMCSF og B16FLT3 [1].

3D-animation af et nærbillede af en voksende hudkræft, såsom malignt melanom, der forårsager betændelse i det omgivende væv.

Oplysninger om dyrkning af B16-cellelinjen

Inden du opbevarer eller dyrker en cellelinje, kan det være en god idé at søge efter vigtige oplysninger om fordoblingstid, celletype, vækstmedier, dyrkningsbetingelser osv. Dette afsnit indeholder alle de nødvendige oplysninger til dyrkning af B16-celler.

Vigtige punkter ved dyrkning af B16-celler

Populationsfordoblingstid:: Den gennemsnitlige fordoblingstid for B16-celler anslås til 24 timer.
Adhærent eller i suspension:: B16-celler er adhærente og vokser i monolag.
Udsåningstæthed:: Det anbefales at udså B16-celler med en celletæthed på 1 til 2 x 10⁴ celler/cm². De vedhæftede B16-celler skylles med 1 x PBS og løsnes fra overfladen ved hjælp af Accutase-opløsning. Cellerne centrifugeres, og cellepelleten resuspenderes i vækstmediet. Senere overføres disse celler til en ny kolbe til vækst.
Vækstmedium:: B16-celler dyrkes i EMEM-medium (Eagle's Minimum Essential Medium) indeholdende 10 % føtal bovint serum (FBS). Vækstmediet bør fornyes 2-3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:: Der anvendes en befugtet inkubator med 5 % CO₂-tilførsel og en temperatur på 37 °C til dyrkning af B16-cellelinjen.
Opbevaring:: Disse celler opbevares ved en temperatur under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at beskytte cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:: CM-1- eller CM-ACF-frysemedium anvendes til at fryse B16-celler ved hjælp af en langsom fryseproces.
Optøningsproces:: Frosne B16-celler optøs ved 37 °C i et vandbad indeholdende et antimikrobielt middel. Optøede celler kan dyrkes direkte ved at overføre dem til kolber indeholdende vækstmedium. Desuden kan disse celler centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemediet og derefter dyrkes i nyt medium.
Biosikkerhedsniveau:: B16-cellelinjen skal håndteres eller opbevares i et laboratorium med biosikkerhedsniveau 1.

B16 cells

Et delvist sammenvokset lag af B16-melanomceller set ved 10x og 20x forstørrelse.

B16-cellelinjen: Fordele og ulemper

Ligesom andre cellelinjer har B16 en unik blanding af fordele og ulemper. Nogle væsentlige fordele og ulemper ved denne melanomcellelinje er anført i dette afsnit.

Fordele

B16 er det første effektive museværktøj, der er udbredt i metastaseforskning på grund af de fordele, det tilbyder. Nogle fordele ved denne hudkræftcellelinje er:

Let at dyrke: B16-cellelinjen er nem at dyrke i forskningslaboratorier. Den bruges i vid udstrækning til at studere kræftcellebiologi, signalveje og meget mere.
Hurtigvoksende: B16-melanomcellelinjen udviser en høj proliferationshastighed, hvilket gør den velegnet til at studere celledeling og vækstprocesser.
Tumorigenicitet: B16 er en tumorigen cellekultur med tumorlignende egenskaber såsom invasion, migration og proliferation. Den er værdifuld til at studere tumordannelse, progression og metastase.

Ulemper

Ulemperne ved B16-cellelinjen er:

Manglende relevans for mennesker: Da B16 er en musemelanomcellelinje, repræsenterer den muligvis ikke nøjagtigt biologien bag hudkræft hos mennesker, hvilket begrænser forskningsresultaternes overførbarhed.
Heterogenitet: B16-celler er heterogene og udviser forskellige genetiske og fænotypiske egenskaber inden for samme kultur. Dette kan påvirke resultaternes pålidelighed og reproducerbarhed.

Anvendelser af B16-celler

B16-cellelinjen anvendes i vid udstrækning i forskningsstudier. Nogle få lovende anvendelser af denne cellelinje er:

Tumorbiologi: Denne murine hudkræftcellelinje er tumorigen og bruges i vid udstrækning til at forstå tumorbiologi. Der er gennemført flere undersøgelser for at udforske de cellulære mekanismer bag tumorcellers vækst, proliferation og metastase ved hjælp af B16-celler. En forskningsundersøgelse gennemført i 2020 anvendte B16-celler til at undersøge rollen af langt ikke-kodende RNA, LncRNA MEG3, i dannelsen, væksten og metastaseringen af melanom. Denne forskning fandt, at det ikke-kodende RNA modulerer miRNA-21/E-Cadherin-aksen for at stimulere disse cellulære begivenheder [2]. På samme måde blev der udført forskning for at undersøge den potentielle rolle af Notch1-signalering i tumorinduceret immunsuppression ved hjælp af B16-celler [3].
Lægemiddelforskning: B16-celler anvendes til at validere og teste de potentielle terapeutiske effekter af lægemiddelkandidater. En undersøgelse evaluerede den antitumorvirkning, som neogamboginsyre, et naturligt stof, har, ved hjælp af en B16-cellelinje. Undersøgelsens resultater afslørede, at dette stof modulerer PI3K/Akt/mTOR-signalvejen for at forårsage kræftcelledød [4]. En anden undersøgelse undersøgte den antimalomne effekt af ginsenosid Rg3, et saponin, ved hjælp af B16-cellelinjen. Forskningen foreslog, at dette naturlige stof forårsagede antitumoraktivitet ved at nedregulere ERK- og Akt-signalveje [5].

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 305154

5. Forskningspublikationer om B16-celler

Her er nogle vigtige forskningspublikationer om B16-melanomcellelinjen.

LncRNA MEG3 fremmer vækst, metastase og dannelse af melanom gennem modulering af miR-21/E-cadherin-aksen

Denne publikation i tidsskriftet Cancer Cell International (2020) foreslår, at det lange ikke-kodende RNA MEG3 fremmer dannelsen, væksten og metastaseringen af B16-melanomceller ved at modulere miRNA-21/E-cadherin-aksen.

Et nyt psoralen-derivat – MPFC – fremmer melanogenese via aktivering af p38 MAPK- og PKA-signalveje i B16-celler

Denne artikel blev offentliggjort i tidsskriftet International Journal of Molecular Medicine i 2018. Denne undersøgelse undersøgte den melanogene virkning og mekanismerne af et psoralen-derivat – 4-methyl-6-phenyl-2H-furo[3,2-g]chromen-2-on (MPFC) – i B16-celler. Undersøgelsen foreslog, at dette derivat fremmer melanogenese ved at stimulere PKA- og p38 MAPK-cellesignalering.

Notch1-signalering i melanomceller fremmede tumorinduceret immunsuppression via opregulering af TGF-β1

Denne forskning blev offentliggjort i 2018 i Journal of Experimental & Clinical Cancer Research. Undersøgelsens resultater tyder på, at aktivering af Notch1-signalering i B16-celler kan forhindre antitumorimmunitet ved at øge ekspressionen af TGF-β1-genet.

Neogamboginsyre inducerer apoptose af melanom-B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvejen

Denne undersøgelse blev udført af Chunlan Wu og hans kolleger i 2020 og offentliggjort i tidsskriftet Acta Biochimica Polonica. Denne forskning fastslår, at neogamboginsyre, et naturligt stof, kan forårsage B16-melanomcelledød ved at modulere PI3K/Akt/mTOR-signalkaskaden.

Et iridium (III)-kompleks som potent kræftbekæmpende middel inducerer apoptose og autofagi i B16-celler gennem hæmning af AKT/mTOR-vejen

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i European Journal of Medicinal Chemistry i 2018. I denne undersøgelse undersøgte forskerne den kræftbekæmpende virkning af en forbindelse, et iridium(III)-kompleks, ved hjælp af B16-melanomceller.

Ailanthon inducerer cellecyklusstop og apoptose i melanomcellerne B16 og A375

Denne undersøgelse foreslog, at et plantebaseret bioaktivt stof, Ailanthone, har kræftbekæmpende potentiale, da det kan fremkalde apoptose og cellecyklusstop i B16- og A375-melanomceller. Denne artikel blev offentliggjort i Biomolecules i 2019.

Ressourcer til B16-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere

Der findes begrænsede ressourcer om B16-cellelinjen, der forklarer dens dyrknings- og transfektionsprotokoller.

Dyrkning af melanomceller: Denne video giver værdifulde tips til dyrkning af melanomcellelinjer.
Subkultivering af en cellelinje: Denne video forklarer en generel subkultiveringsprotokol for en cellelinje.
Transfektion af B16F10-cellelinjen: Denne video forklarer transfektionsprotokollen for en sublinje af B16-melanomceller. Den kan hjælpe dig med at optimere transfektionsprotokollen for B16-celler.

Nedenfor følger nogle cellekulturprotokoller for B16-celler.

Dyrkning af B16-celler: Denne hjemmeside indeholder alle de nødvendige oplysninger til dyrkning af B16-celler, herunder vækstmedier, subkultivering, optøning og nedfrysning af celler.

Referencer

Danciu, C., et al., Adfærd hos fire forskellige B 16-musemelanomcelle-sublinjer: C57 BL/6J-hud. International journal of experimental pathology, 2015. 96(2): s. 73-80.
Wu, L., et al., LncRNA MEG3 fremmer vækst, metastase og dannelse af melanom gennem modulering af miR-21/E-cadherin-aksen. Cancer cell international, 2020. 20: s. 1-14.
Yang, Z., et al., Notch1-signalering i melanomceller fremmede tumorinduceret immunsuppression via opregulering af TGF-β1. Journal of Experimental & Clinical Cancer Research, 2018. 37(1): s. 1-13.
Wu, C., et al., Neogamboginsyre inducerer apoptose af melanom B16-celler via PI3K/Akt/mTOR-signalvejen. Acta Biochimica Polonica, 2020. 67(2): s. 197-202.
Meng, L., et al., Antitumoraktivitet af ginsenosid Rg3 i melanom gennem nedregulering af ERK- og Akt-signalveje. International Journal of Oncology, 2019. 54(6): s. 2069-2079.