AGS-celler - udforskning af gastrisk adenokarcinom AGS-celler i kræftstudier
AGS-celler er en human gastrisk adenokarcinom-cellelinje, som er meget udbredt i biomedicinsk forskning. Den bruges især til at studere mavekræftbiologi, herunder tumorvækst, udvikling, progression og terapeutiske indgreb. Derudover bruges den til at undersøge værts-patogen-interaktioner.
Denne artikel vil diskutere det grundlæggende i gastriske epitelceller AGS. Den vil især dække:
- AGS-cellers generelle egenskaber og oprindelse
- Oplysninger om dyrkning af AGS-cellelinjen
- AGS-cellelinje: Fordele og begrænsninger
- Anvendelser af AGS-celler
- Forskningspublikationer om AGS-cellelinjen
- Ressourcer til AGS-cellelinje: Protokoller, videoer og meget mere
1.aGS-cellers generelle egenskaber og oprindelse
Det er nødvendigt at kende til en cellelinjes oprindelse og generelle karakteristika, før du begynder at arbejde med den. Dette afsnit vil dække følgende: Hvad er AGS-celler? Hvad er AGS-cellens oprindelse? Hvad er AGS-cellelinjens morfologi?
- AGS-cellelinjen stammer fra mavevævet fra en 54-årig kaukasisk kvinde med gastrisk adenokarcinom. Den blev isoleret i 1979 [1].
- AGS-celler har en epitellignende morfologi.
- De gastriske epiteliale AGS-celler er hyperdiploide. Det modale kromosomtal for AGS-celler er 49, hvilket forekommer i næsten 60 % af cellerne. Polyploidi forekommer også i ca. 3,6 % af cellerne.
2.information om dyrkning af AGS-cellelinjen
For at kunne håndtere og styre en cellelinje korrekt skal du kende dens grundlæggende dyrkningskoncepter. Du bør især lære: Hvad er AGS-cellens fordoblingstid? Hvad er AGS-cellemediet? Hvordan subkulturerer man AGS-celler? Hvilke frysemedier bruges til AGS-celler fra gastrisk epitel?
Nøglepunkter for dyrkning af AGS-celler
|
Fordoblingstid: |
AGS-cellernes fordoblingstid varierer mellem 24 og 48 timer. |
|
Vedhæftende eller i suspension: |
AGS-celler er adhærente. De vokser i monolag. |
|
Udsåningstæthed: |
AGS-celler udsås med en celletæthed på 1 x104 celler/cm2. Cellerne danner et sammenflydende monolag ved denne tæthed i løbet af 3 til 5 dage. Efter fjernelse af gamle medier skylles cellerne med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-dissociationsopløsning. Løsrevne celler blev resuspenderet i kulturmedier og centrifugeret. Cellepelleten blev igen resuspenderet, og efter AGS-celletælling blev de fordelt i den nye kolbe til vækst. |
|
Vækstmedie: |
DMEM-medier, der indeholder 10 % FBS, 4 mM L-glutamin, 4,5 g/L glukose, 1,5 g/L NaHCO3 og 1,0 mM natriumpyruvat, anvendes til dyrkning af AGS-celler. Mediet skal udskiftes 2 til 3 gange om ugen. |
|
Vækstbetingelser: |
AGS-celler opbevares i en befugtet inkubator (ved 37 °C) med 5 % CO2-forsyning. |
|
Opbevaring: |
Frosne AGS-celler opbevares i elektriske frysere ved en temperatur på under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen i længere tid. |
|
Fryseproces og medium: |
CM-1- eller CM-ACF-medium bruges til at fryse AGS-celler. Cellefrysningen foregår ved en langsom fryseproces, der kun tillader et temperaturfald på 1 °C pr. minut og beskytter cellernes levedygtighed. |
|
Optøningsproces: |
Frosne gastriske epitelceller omrøres hurtigt i et 37 °C varmt vandbad i 40 til 60 sekunder. Optøede celler resuspenderes i friske dyrkningsmedier og hældes i nye kolber til vækst. Efter 24 timers inkubation fornyes mediet for at fjerne frysende mediekomponenter. I modsætning til dette centrifugeres optøede celler, og elementer fra frysemediet fjernes. Derefter resuspenderes de høstede celler igen og fordeles i kolben med dyrkningsmediet. |
|
Biosikkerhedsniveau: |
Laboratorieindstillinger på biosikkerhedsniveau 2 er afgørende for AGS-celledyrkning. |
3.aGS-cellelinje: Fordele og begrænsninger
Dette artikelafsnit vil belyse nogle af de vigtigste fordele og begrænsninger, der er forbundet med AGS-celler.
Fordele og begrænsninger
De vigtigste fordele ved AGS-celler fra gastrisk epitel er:
|
Nemme at dyrke |
AGS-cellelinjen til gastrisk karcinom er let at vedligeholde i cellekulturlaboratorier. Den har ingen komplicerede og besværlige krav til celledyrkning. Desuden udviser den gode vækstegenskaber, hvilket gør den til et ideelt valg til studier af mavekræftbiologi. |
|
Relevans for mavekræft |
AGS-celler stammer fra humant gastrisk adenokarcinom, hvilket gør dem meget anvendte til at studere gastrisk karcinoms biologi og terapeutiske indgreb. |
Begrænsninger
Begrænsningen i forbindelse med AGS-cellelinjen er:
|
In vitro-cellemodel |
AGS-celler dyrkes i biomedicinske forskningslaboratorier under kunstige forhold. Derfor replikerer de måske ikke fuldt ud in vivo-mikromiljøet for mavekræft og andre celle- og molekylære interaktioner. |
4.anvendelser af AGS-celler
AGS-celler bruges specifikt til at studere gastrisk cancerbiologi. De har mange andre lovende anvendelser inden for det biomedicinske område. Nogle af de interessante forskningsanvendelser af AGS-celler er:
- Undersøgelse af mavekræft: AGS-celler er et fremragende forskningsværktøj til at undersøge celle- og molekylære mekanismer, der ligger til grund for vækst, metastase og invasion af mavekræft. Forskere bruger også AGS-celler fra gastrisk epitel til at undersøge forskellige cellulære processer, genetiske mutationer og signalveje i udviklingen af gastrisk cancer. En undersøgelse i Oncology Reports (2019) viste, at microRNA-183-5p.1 fremmer spredning, migration og invasion af tumorceller ved at hæmme Bcl 2/P53-signalkaskaden. Derudover nedregulerer det også TPM1-genet for at udøve disse effekter. Derfor foreslås både mikroRNA og TPM1 som effektive molekylære mål for udvikling af målrettede behandlinger mod mavekræft [2].
- Screening af lægemidler: AGS-celler er ofte blevet brugt til at screene nye og effektive lægemidler mod mavekræft. Forskere evaluerer cytotoksiciteten og effekten af potentielle lægemidler ved hjælp af AGS-cellelinjen. Der er også udført undersøgelser for at identificere nye molekylære mål og udvikle nye målrettede terapier til bekæmpelse af mavekarcinomer. Forskning udført i 2021 brugte AGS-mavekræftceller og undersøgte den terapeutiske effekt af lægemidlet paclitaxel. Resultaterne afslørede, at paclitaxel inducerer en mitotisk katastrofe, en integreret mekanisme for apoptose eller celledød i AGS-celler. Derudover fremmede det også autofagi i mavekræftceller [3].
- Interaktioner mellem vært og patogen: AGS-cellelinjen studerer også interaktioner mellem vært og patogen. Det hjælper forskere med at forstå de cellulære mekanismer og reaktioner, der er involveret i en infektion. I en undersøgelse fra 2020 blev det f.eks. observeret, at små ikke-kodende RNA'er i Helicobacter pyloris ydre membranvesikler reducerer udskillelsen af interleukin 8 i humane AGS-celler [4].
5.forskningspublikationer om AGS-cellelinjen
Denne del af artiklen dækker et par interessante og mest citerede forskningspublikationer med AGS-celler.
Denne undersøgelse i Biomedicine & Pharmacotherapy (2020) foreslog, at salidroside, en naturlig forbindelse, inducerer beskyttende autofagi og celledød i gastriske epitelceller AGS via modulering af PI3K/AKT/mTOR-signalvejen.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i Biomedicine & Pharmacotherapy (2018). Den undersøgte de synergistiske anticancer-effekter af astragalus polysaccharid og lægemidlet apatinib i AGS-celler. Resultaterne af undersøgelsen viste, at astragalus forbedrer apatinibs antitumoreffekt ved at undertrykke AKT-signalering.
Denne forskning i Journal of Ethnopharmacology (2018) foreslog, at curcuzedoalide, en naturlig forbindelse fra Curcuma zedoaria Roscoe-planten, bidrager til dens cytotoksiske potentiale mod AGS-celler.
Overekspression af FOXA1 hæmmer celleproliferation og EMT i AGS-celler fra human gastrisk cancer
Denne publikation i Gene (2018) foreslog, at opregulering af FOXA1 undertrykker AGS gastriske adenokarcinomcellers spredning og epitelial til mesenchymal transition (EMT) og invasion.
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i International Journal of Medical Microbiology i 2020. I denne undersøgelse blev AGS-celler brugt til at studere interaktioner mellem vært og patogen. Resultaterne afslørede, at Helicobacter pylori indeholder noget ikke-kodende RNA i sine ydre membranvesikler, der påvirker IL-8-niveauerne i AGS-celler.
6.ressourcer til AGS-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere
Følgende er nogle få ressourcer med AGS-celler.
- Protokol for transfektion af AGS-celler: Denne video er en trinvis guide til at lære transfektionsprotokollen for AGS-celler fra gastrisk epitel.
Følgende link indeholder AGS-celledyrkningsprotokollen.
- Protokol for AGS-celledyrkning: Dette websted indeholder nyttige oplysninger om AGS-cellemedier og celledyrkningsprotokoller. Kort fortalt indeholder den en protokol til subkulturering af gastriske epiteliale AGS-celler og håndtering af prolifererende og kryopræserverede AGS-kulturer.
- Subdyrkning af AGS-celler: Denne side forklarer subkultureringsproceduren for AGS-celler i detaljer.
Referencer
- Phuc, B.H., et al., Comparative genomics of two Vietnamese Helicobacter pylori strains, CHC155 from a non-cardia gastric cancer patient and VN1291 from a duodenal ulcer patient. Videnskabelige rapporter, 2023. 13(1): p. 8869.
- Lin, J., et al, miRNA-183-5p. 1 fremmer migration og invasion af mavekræft AGS-celler ved at målrette TPM1 Corrigendum in/10.3892/or. 2020.7902. Onkologiske rapporter, 2019. 42(6): p. 2371-2381.
- Khing, T.M., et al., Effekten af paclitaxel på apoptose, autofagi og mitotisk katastrofe i AGS-celler. Videnskabelige rapporter, 2021. 11(1): p. 23490.
- Zhang, H., et al., sncRNA'er pakket af Helicobacter pyloris ydre membranvesikler dæmper IL-8-sekretion i humane celler. International Journal of Medical Microbiology, 2020. 310(1): p. 151356.