A375-cellelinjen - en guide til melanomforskning

A375 er en human melanomcellelinje, der er meget brugt i toksikologisk og immunonkologisk forskning. Forskere bruger denne cellelinje til at studere kræftbiologi og signalveje, teste eller screene potentielle kræftmidler og udvikle nye og effektive behandlingsformer.

A375-cellernes oprindelse og generelle karakteristika

Viden om en cellelinjes oprindelse og generelle karakteristika kan hjælpe dig med at planlægge brugen af den i forskning. Denne del af artiklen handler om A375-cellelinjens oprindelse og egenskaber. Hvad er A375-cellelinjen for eksempel? Hvad er A375-cellelinjens egenskaber? Hvor kommer A375-cellerne fra? Hvad er A375-melanomcellernes morfologi? Hvad er A375-cellestørrelsen?

Hudkræftcellelinjen A375 stammer fra en eksplorativ kultur af en solid tumor fra en 54-årig kvinde med malignt melanom [1].
A375-celler har en epitellignende morfologi.
A375-cellestørrelsen er relativt mindre sammenlignet med andre cellelinjer. De har en diameter på ca. 12 µm.
A375-melanomcellerne er hypotriploide. Det modale kromosomtal for denne cellelinje er 62. Normalt har hver celle ni markørkromosomer og en kopi af de normale N2-, N6- og N22-kromosomer.

En læge undersøger væksterne på en voksens hud for hudkræft.

A375-celler: Information om cellekulturer

A375-cellekulturer er nemme at vedligeholde. De har ingen krævende krav til celledyrkning. Dette afsnit hjælper dig med at lære de nødvendige oplysninger om celledyrkning. Hvad er f.eks. fordoblingstiden for A375? Hvad er mediet til A375-cellelinjen? Hvad er udsåningstætheden for A375? Er A375-melanomceller adhærente?

Nøglepunkter for dyrkning af A375-celler

Populationens fordoblingstid:	Fordoblingstiden for A375 er 20 timer.
Vedhæftende eller i suspension:	A375 er en adhærent human melanomcellelinje.
Udsåningstæthed:	1 x¹⁰⁴ celler/cm2^celletætheder ideel til A375-cellekulturer. Vedhæftende celler skylles med 1 x phosphatbuffersaltvand (PBS) og inkuberes med passageløsning (Accutase). Bagefter blev cellerne tilsat kulturmedier og centrifugeret. De høstede celler blev resuspenderet i et dyrkningsmedium og fordelt i nye kolber til vækst.
Vækstmedium:	DMEM anbefales som det ideelle A375-medie, når det suppleres med 10 % føtalt kvægserum (FBS), 4,5 g/L glukose, 1,5 g/L NaHCO3, 4 mM L-glutamin og 1,0 mM natriumpyruvat. A375-mediet skal fornyes 2-3 dage om ugen.
Vækstbetingelser:	A375-melanomceller dyrkes i en befugtet inkubator (37 °C) med 5 % CO2-tilførsel.
Opbevaring:	Frosne A375-celler skal opbevares under -150 °C i dampfasen af flydende nitrogen eller i en elektrisk fryser.
Fryseproces og medie:	CM-1- eller CM-ACF-medier bruges til at fryse A375-cellelinjen. En langsom fryseproces, der tillader et gradvist fald i temperaturen på 1 °C, er valgt for at beskytte cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:	Det frosne A375-melanomcelleglas omrøres hurtigt i vandbadet i 40 til 60 sekunder, indtil der kun er en lille isklump tilbage. Cellerne tilsættes friske medier og centrifugeres for at fjerne de frosne medieelementer. Den opnåede cellepellet blev igen resuspenderet og hældt i nye kolber.
Biologisk sikkerhedsniveau:	A375-kulturer håndteres og vedligeholdes i laboratorieindstillinger på biosikkerhedsniveau 1.

Konfluerende lag af klæbende A375-celler ved 20x forstørrelse.

Fordele og begrænsninger ved A375-cellelinjen

Ligesom andre cellelinjer er A375-melanomcellelinjen forbundet med en unik kombination af fordele og begrænsninger, hvilket gør den til et værdifuldt værktøj til forskning i melanomcancer. Dette afsnit har kun listet nogle få væsentlige fordele og ulemper ved A375-cellelinjen.

Fordele og ulemper

De væsentligste fordele ved A375-cellerne er nævnt nedenfor:

Model for melanomtumor: A375-cellelinjen stammer fra en malign melanomtumor og fungerer derfor som en uvurderlig tumormodel til undersøgelse af melanomets biologi og terapeutiske indgreb. Disse celler udviser melanomlignende egenskaber, som f.eks. en høj spredningshastighed og invasivitet.
Tumorigenicitet: A375-celler er meget tumorigeniske, hvilket betyder, at de kan danne tumorer. Det er rapporteret, at A375-celler producerer aggressive amelanotiske melanomer i NIH Swiss-mus, der behandles med anti-thymocyt-serum (et immunsuppressivt middel).
Velkarakteriseret: A375 er en genetisk velkarakteriseret cellelinje. Den har specifikke genetiske mutationer som melanom. A375-mutationer omfatter A375 BRAF-genændring, hvilket gør den følsom over for BRAF-specifikke inhibitorer. Denne genetiske profil gør således A375-celler til et fantastisk kræftforskningsværktøj til at studere underliggende molekylære veje og målrettede terapier.

Begrænsninger

Begrænsningerne i forbindelse med A375-celler er:

In vitro-begrænsninger: A375 er en in vitro-tumormodel. Selvom den efterligner karakteristika ved melanom, kan den ikke fuldt ud repræsentere kompleksiteten i melanomtumorer. Derfor skal der udvises forsigtighed, når resultater in vitro generaliseres til kliniske studier.

Køb dine A375-celler nu

430,00 €*

Indhold: 1.5 milliliter

Priser ekskl. afgifter plus forsendelsesomkostninger

cryovial

Produktnummer: 300110

Forskningsanvendelser af A375-cellelinjen

A375-cellelinjen har omfattende forskningsanvendelser inden for kræftforskning. Her er nogle af de almindelige områder, hvor A375-celler anvendes.

Kræftforskning: A375-celler anvendes i vid udstrækning inden for melanomforskning. Forskere har brugt disse celler til at undersøge hudkræftbiologi, processer og underliggende cellesignaleringsmekanismer, herunder celleproliferation, migration og invasion. Det kan også hjælpe forskerne med at identificere nye molekylære terapeutiske mål. En undersøgelse udført af Lin Zhu og kolleger i 2019 brugte meget aggressive melanomceller A375 og fandt mikroRNA-3662's rolle i væksten og invasionen af A375-melanomceller. Undersøgelsens resultater viser, at mikroRNA-3662 retter sig mod ZEB1-genet og regulerer væksten af melanomceller in vitro og in vivo i A375-tumormodellen [2]. Tilsvarende viste forskning i 2018, at PI3K/AKT- og MAPK/ERK-veje er involveret i spredning og metastase af A375-cellelinjen [3].
Opdagelse og testning af lægemidler: A375-cellelinjen er en nyttig in vitro-tumormodel til at teste og screene potentielle kræftmidler. Forskere evaluerer toksiciteten og effekten af nye kemoterapeutiske lægemidler, forbindelser og andre terapier ved hjælp af disse A375-melanomceller. For eksempel undersøgte en undersøgelse de kræfthæmmende egenskaber af mikro- og nanovesikler afledt af grapefrugt på A375-melanomkræftceller fra mennesker. Resultaterne viste, at mikro- og nanovesikler inducerer cellecyklusstop og apoptose og hæmmer genekspressionen i celleproliferation, migration og invasion [4].

A375-celler: Publikationer

Nogle vigtige forskningspublikationer med A375-celler er nævnt her.

D-vitamin og dets lavkalkemiske analoger modulerer de kræfthæmmende egenskaber af cisplatin og dacarbazin i den humane melanom A375-cellelinje

Denne undersøgelse blev offentliggjort i Journal of Oncology i 2019. Undersøgelsen foreslog, at samtidig behandling med D-vitamin og analoger forbedrer den kræfthæmmende aktivitet af cisplatin og dacarbazin i A375-melanomceller.

In vitro-evaluering af anti-melanom-effekten (A375-cellelinje) af gel- og helbladsekstrakter fra udvalgte aloe-arter

Denne forskning blev offentliggjort i Journal of Herbal Medicine i 2022. Dette studie undersøgte aloe vera-gelens anti-melanom-effekt i A375-melanomceller.

Fermitin-familiemedlem 2 fremmer melanomprogression ved at øge bindingen af p-α-Pix til Rac1 for at aktivere MAPK-vejen

Denne undersøgelse i Oncogene (2021) foreslog, at fermitin-familiemedlem 2 (FERMT2 eller kindlin-2) fremmer melanomprogression via aktivering af MAPK gennem binding med p-α-Pix og Rac1.

FARP1 fremmer celleproliferation ved at modulere MAPK-signalvejen i kutant melanom

Denne undersøgelse i The American Journal of Dermatopathology (2019) foreslog, at FARP1 kan lette udvikling og progression af kutan melanom. Dermed kan det være et nyttigt terapeutisk mål.

Cytotoksisk og apoptotisk potentiale af Phyllodium elegans-ekstrakter på humane kræftcellelinjer

Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Bioengineered (2019). Denne undersøgelse udforskede den cytotoksiske og apoptotiske aktivitet af et planteekstrakt fra Phyllodium elegans på humane karcinomcellelinjer, herunder A375.

Ressourcer til A375-cellelinjen: Protokoller, videoer og meget mere

Følgende er nogle få online-ressourcer med A375-celler.

Transfektion af A375-celler: Denne videovejledning hjælper dig med at lære A375-celletransfektion trin for trin.
Celledyrkning: Denne video indeholder meget nyttige oplysninger om dyrkning af cellelinjer.

Celledyrkningsprotokollerne for A375-celler er anført her.

A375-cellelinje: Dette link indeholder nyttige oplysninger om dyrkning og vedligeholdelse af A375-cellelinjer, herunder A375-medier og håndtering af frosne og prolifererende A375-kulturer.

Ofte stillede spørgsmål (FAQ) til A375-celler

Referencer

Avram, S., et al., Standardisering af A375 humane melanom-modeller på kyllingembryo chorioallantoic membran og Balb/c nøgenmus. Oncol Rep, 2017. 38(1): p. 89-99.
Zhu, L., et al., MicroRNA-3662 retter sig mod ZEB1 og dæmper invasionen af den meget aggressive melanomcellelinje A375. Cancer Manag Res, 2019. 11: p. 5845-5856.
Peng, X., et al., Oxyfadichalcone C hæmmer melanom A375-celleproliferation og metastase via undertrykkelse af PI3K/Akt- og MAPK/ERK-veje. Biovidenskab, 2018. 206: p. 35-44.
Stanly, C., et al., Grapefrugt-afledte mikro- og nanovesikler viser forskellige metabolomprofiler og anticanceraktiviteter i den menneskelige A375-melanomcellelinje. Cells, 2020. 9(12): p. 2722.