4T1-celler – Vigtig viden om forskning i brystkræftceller og anvendelsesmuligheder
4T1 er en transplanterbar musebrystkræftcellelinje. Den anvendes i vid udstrækning som en genetisk identisk in vitro-tumormodel til undersøgelse af brystkræft hos mennesker. 4T1-celler er meget invasive og tumorigeniske; de har tendens til at metastasere fra det primære tumorsted i mælkekirtlen til andre steder, herunder lever, lymfeknuder, lunger, knogler og hjerne, og er derfor ideelle til at studere metastaser ved brystkræft [1].
- Vækstmedium
- RPMI 1640-medium anvendes til dyrkning af 4T1-celler. 10 % føtal bovint serum (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 og 2,1 mM stabilt glutamin tilsættes til dyrkningsmediet for at opnå optimal cellevækst.
- Fordoblingstid
- Den gennemsnitlige fordoblingstid, der er rapporteret for 4T1-brystkræftceller, er 14 timer.
- Væksttype
- 4T1 er en adhærent cellelinje.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-1
- Fås hos
- Cytion — Bestil 4T1
- Generelle egenskaber og oprindelse af 4T1-celler
- Oplysninger om dyrkning af 4T1-cellelinjen
- T1-cellelinje: Fordele og ulemper
- Køb 4T1-cellelinje: Højkvalitetsmodel for brystkræft
- T1-cellelinje: Anvendelser inden for kræftforskning
- 4T1-celler: Forskningspublikationer
- Ressourcer til 4T1-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
- Ofte stillede spørgsmål om 4T1-cellelinjen
- Referencer
- Ofte stillede spørgsmål
Generelle egenskaber og oprindelse af 4T1-celler
Det er vigtigt at kende en cellelinjes oprindelse og generelle egenskaber, før man arbejder med den. I dette afsnit har vi beskrevet det grundlæggende om 4T1-brystkræftceller. Hvad er 4T1-celler for eksempel? Hvad er 4T1-cellelinjens egenskaber? Hvad er 4T1-cellelinjens oprindelse? Hvad er morfologien for 4T1-cellelinjen?
- 4T1 er en brysttumorcellelinje, der stammer fra en brysttumor, der spontant opstod i musestammen BALB/c. Disse meget invasive og tumorigeniske celler ligner i høj grad menneskelig brystkræfts adfærd med hensyn til vækst og metastatisk spredning. Konkret undersøger 4T1-tumormodellen tredobbelt-negativ brystkræft (TNBC).
- 4T1-celler er adhærente og har en epitelcellelignende morfologi.
4T1 kontra EMT-6-cellelinjen
4T1 og EMT-6 er ikke-immunogene, murine cellemodeller til studier af tredobbelt negativ brystkræft. Her er 4T1 mere aggressive og invasive tumorceller end EMT-6, som har mindre invasive egenskaber [2].
4T1 vs. 4T07-celler
4T07 er også en musecelle-linje. Den største forskel mellem 4T1- og 4T07-celler er, at 4T1-celler kan forlade det primære tumorsted og sprede sig til at danne synlige sekundære metastaser, mens 4T07-celler ikke kan danne synlige metastaser, selvom de forlader det primære sted [3].
Oplysninger om dyrkning af 4T1-cellelinjen
4T1-brystkræftcellelinjen tilbyder omfattende forskningsanvendelser inden for det biomedicinske felt. Til dyrkning af disse celler bør du gennemgå følgende nøglepunkter, der beskriver: Hvad er 4T1-fordoblingstiden? Hvordan dyrkes 4T1-celler? Hvad er celleudsåningstætheden for 4T1?
Vigtige punkter ved dyrkning af 4T1-celler
Fordoblingstid:
Den gennemsnitlige fordoblingstid, der er rapporteret for 4T1-brystkræftceller, er 14 timer.
Adhærent eller i suspension:
4T1 er en adhærent cellelinje.
Subkultiveringsforhold:
Et opdelingsforhold på 1:6 og 1:8 anbefales for den triple-negative 4T1-brystkræftcellelinje. Til opdeling skylles cellerne med PBS og inkuberes med Accutase-enzymet i 8 til 10 minutter. De adskilte celler opsamles ved centrifugering og resuspenderes i et frisk medium. De resuspenderede celler overføres til en ny kolbe til vækst.
Vækstmedium:
RPMI 1640-medium anvendes til dyrkning af 4T1-celler. 10 % føtal bovint serum (FBS), 2,0 g/l NaHCO3 og 2,1 mM stabilt glutamin tilsættes til dyrkningsmediet for at opnå optimal cellevækst.
Vækstbetingelser:
4T1-tumorceller opbevares i en befugtet inkubator ved 37 °C med en CO2-tilførsel på 5 %.
Opbevaring:
4T1-celler skal opbevares ved en temperatur under -150 °C, dvs. i en elektrisk fryser eller i flydende nitrogens dampfase, for at opretholde cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:
CM-1 eller CM-ACF anbefales til 4T1-cellelinjen. En langsom frysemetode foretrækkes, da den beskytter cellernes levedygtighed ved at tillade et gradvist temperaturfald på 1 °C.
Optøningsproces:
Hætteglasset med frosne celler holdes i et vandbad ved 37 °C i nogle få sekunder, indtil cellerne er optøet, og der kun er en lille isklump tilbage. Disse celler resuspenderes i det friske medium og hældes i kolben til dyrkning. Efter 24 timers inkubation udskiftes mediet for at fjerne komponenter fra frysemediet.
Biosikkerhedsniveau:
Et laboratorium med biosikkerhedsniveau 1 anbefales til dyrkning af 4T1-brystkræftceller.
T1-cellelinje: Fordele og ulemper
Dette afsnit af artiklen vil omhandle fordele og ulemper forbundet med 4T1-metastase-modellen.
Fordele
De vigtigste fordele ved 4T1-cellelinjen er:
- Tumorigenicitet:
4T1 er en meget tumorigenisk cellelinje. Disse celler har evnen til at danne en 4T1-syngen musemodel til brystkræftforskning, når de injiceres i en mus. Derfor er 4T1-modellen ideel til at studere tumorudvikling, vækst og metastase. Derudover er den nyttig til screening og evaluering af terapeutiske lægemidler.
- In vitro-metastase-model:
4T1-modellen har en naturlig tendens til metastase, hvilket giver forskere mulighed for effektivt at undersøge de underliggende mekanismer og signalveje, der er involveret i metastaseprocessen. Desuden er 4T1-celler resistente over for 6-thioguanin. Dette bidrager til en effektiv påvisning af mikrometastatiske celler med forbedret nøjagtighed sammenlignet med andre modeller, da det eliminerer behovet for at veje målorganer og tælle knuder.
Ulemper
Ulempen ved 4T1-cellelinjen er:
- Aggressivitet/hurtig væksthastighed:
4T1-cellelinjen er en meget aggressiv triple-negativ brystkræftcellelinje. På grund af den hurtige væksthastighed bliver det en udfordring at anvende denne cellelinje i langvarige eksperimenter og kontrollere eksperimentelle variabler.
Køb 4T1-cellelinjen: En brystkræftmodel af høj kvalitet
T1-cellelinjen: Anvendelser inden for kræftforskning
4T1-musemodelcellelinjen er et værdifuldt forskningsværktøj til at studere kræftbiologi og evaluere nye behandlinger. De vigtigste anvendelser af 4T1-celler er angivet her:
Kræftbiologi
4T1-cellelinjen bruges i vid udstrækning til at studere kræftudvikling og -vækst. Den er en ideel in vitro-model til at undersøge og udforske forskellige cellulære og molekylære mekanismer, der er involveret i tumorprogression og metastase. Derudover kan den afsløre rollen af cellesignalveje, mikromiljøet og genekspression i disse processer. I en undersøgelse fra 2019 blev 4T1-celler anvendt til at afdække de mekanismer, der driver kræftcellers invasion og migration. Resultaterne viste, at STAT3-, MMP2- og MMP9-generne er involveret, og at hæmning af disse gener markant kan begrænse migration og invasion i kræftceller [4]. Lignende studier har også påvist flere andre signalveje, der er involveret i tumorudvikling og metastase.
Desuden er 4T1-modellen afgørende for forståelsen af brystkræftens mikromiljø, herunder immuncelleinfiltration og primær tumorvækst. Undersøgelser med fokus på 4T1-tumormikromiljøet har givet vigtig indsigt i immunceller og cytokiners rolle, såsom CXCL13-ekspression, i tumorprogression. Modellen hjælper også med at undersøge metastatiske nicher og tumormetastaser, især i brystkræft i sent stadium, hvor kolonisering af brystkarcinom er udbredt.
Forskning i kræftbehandling
4T1-cellelinjen anvendes i vid udstrækning i kræftterapiforskning til screening og evaluering af nye behandlinger. En undersøgelse undersøgte det cytotoksiske potentiale af grønne syntetiserede jernnanopartikler fra rosmarinekstrakt (Rosemary-FeNPs) og rent rosmarinekstrakt på 4T1-cellelinjen. Forskningsresultaterne tyder på, at Rosemary-FeNPs er mere lovende end det rene ekstrakt [5]. Tilsvarende undersøgte en undersøgelse gennemført i 2021 det antitumorpotentiale, som ingefærekstrakt har i 4T1-brystkræftceller og en 4T1-musemodel [6].
Ud over naturlige ekstrakter anvendes 4T1-cellelinjen til at evaluere effektiviteten af traditionelle kemoterapeutiske midler. Forskning, der involverer kombinationen af cisplatin med andre behandlinger, har for eksempel vist øget tumorcelledød og reduceret tumorprogression i 4T1-modellen. Indførelsen af ildflue-luciferase i 4T1-celler har muliggjort realtidsbilleddannelse af tumorvækst og metastatisk fænotype, hvilket gør det lettere at vurdere virkningen af forskellige behandlinger.
Desuden har 4T1-cellelinjens resistens over for 6-thioguanin lettet studier af mikrometastatiske celler, hvilket har forbedret påvisningen og analysen af metastaser. Denne cellelinje spiller også en afgørende rolle i studiet af antitumorimmunitet og virkningerne af immunterapi, især i forbindelse med ortotopiske musemodeller, hvor forskere kan efterligne kræft hos mennesker meget nøjagtigt.
Samlet set er 4T1-cellelinjen fortsat et uundværligt redskab i onkologisk forskning, lige fra forståelsen af de grundlæggende mekanismer i kræftbiologi til udvikling og afprøvning af nye terapeutiske strategier.
4T1-celler: Forskningspublikationer
Dette afsnit af artiklen vil omhandle nogle få interessante og mest citerede publikationer om 4T1-celler.
Denne artikel blev offentliggjort i 2018 i Journal of Photochemistry and Photobiology. Forskningen foreslog, at sølvnanopartikler syntetiseret fra Madhuca longifolia udøver en antiproliferativ effekt i 4T1-tumorceller via nedbrydning af cellevæggen og dannelse af ROS.
Verbascosids cytotoksiske og apoptotiske virkninger på 4T1-brystkræftcellelinjen
Denne undersøgelse i tidsskriftet BMC Pharmacology and Toxicology (2021) foreslog, at verbascosid, et naturligt stof, inducerede apoptotiske effekter i 4T1-brystkræftceller via TLR4-signalering.
Eupatorin hæmmede tumorprogression og styrkede immunforsvaret i en 4T1-musemodel for brystkræft
Denne forskning blev offentliggjort i Integrative Cancer Therapies i 2020. Denne undersøgelse anvendte 4T1-celler til at udvikle en 4T1-syngen musemodel og undersøgte Eupatorins kræftbekæmpende potentiale ved hjælp af denne. Eupatorin forsinkede tumorudviklingen i 4T1-musemodellen.
Hæmmende virkning af Viola odorata-ekstrakt på tumorvækst og metastase i 4T1-brystkræftmodellen
Denne forskning, der blev offentliggjort i Iranian Journal of Pharmaceutical Research (2018), foreslog, at en medicinsk urt, Viola odorata, har potentielle cytotoksiske virkninger på 4T1-celler.
Denne undersøgelse foreslog, at docetaxel-ladede faste lipidnanopartikler (DTX-ladede SLN'er) kan være et lovende middel til behandling af brystkræft og forebyggelse af metastaser, da de begrænser kræftvækst og lungemetastaser af 4T1-celler.
Ressourcer til 4T1-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Her følger nogle ressourcer om 4T1-celler:
- Vejledning i transfektion af 4T1: Denne video er en trinvis vejledning i udførelse af transfektion af 4T1-cellelinjen.
- Subkultivering af en cellelinje: Denne video forklarer subkultiveringsprotokollen for adhærente cellelinjer.
Følgende link indeholder cellekulturprotokollen for 4T1-celler:
- 4T1-cellelinje: Dette webstedslink indeholder alle nyttige oplysninger om håndtering af 4T1-kulturer. Det indeholder oplysninger om dyrkningsmedier samt håndteringsprotokoller for kryopræserverede kulturer og prolifererende kulturer.
Ofte stillede spørgsmål om 4T1-cellelinjen
4T1-bloggen indeholder indblik, opdateringer om forskning og eksperimentelle teknikker vedrørende 4T1-brystkræftcellelinjen, som ofte anvendes i undersøgelser af brystkræfts vækst og spredning.
Brystkræftcellelinjer, herunder 4T1-modellen, er af afgørende betydning for undersøgelsen af tumorvækst og metastase samt immuncelleinfiltration i brystkræftens mikromiljø.
Udtrykket af CXCL13 spiller en afgørende rolle i brystkræftforskningen, da det er involveret i immuncelleinfiltration og dannelsen af metastatiske nicher, hvilket giver indsigt i tumorprogression og metastase.
Kirteltumormodeller, såsom 4T1-modellen, anvendes til at simulere brystkræft i fremskredet stadium og spredning af brystkræft, hvilket hjælper forskerne med at forstå sygdommens forløb og mulige behandlingsformer.
Væksten i primærtumoren er en afgørende faktor i undersøgelser af kræftmetastaser og danner grundlag for at undersøge, hvordan tumorer spreder sig til andre organer, f.eks. i den intraduktale musemodel.
Musemodellen 4T1 til brystkræft anvendes til at undersøge antitumorimmunitet, kombinationsbehandlinger med cisplatin og tumorcelledød, hvilket giver et samlet overblik over effektiviteten af behandlingen af brystkræft.
Ortotopiske musemodeller, herunder 4T1-modellen, er afgørende for undersøgelsen af tumorens mikromiljø, immunresponsen og metastasering i et miljø, der nøje efterligner brystkræft hos mennesker.
En billeddannelsesmodel af 4T1-tumoren giver forskerne mulighed for at visualisere tumorvækst og spredning i realtid, hvilket letter undersøgelser af knoglemetastaser, 4T1-tumorers volumen og effektiviteten af behandlinger som f.eks. cisplatin.
Immunterapi mod kræft retter sig mod metastatiske nicher ved at styrke immunsystemets evne til at bekæmpe kræftceller, ofte i kombination med andre behandlinger som f.eks. cisplatin for at øge den samlede effektivitet.
Firefly-luciferase anvendes ved introduktionen i 4T1-celler til overvågning af tumorvækst og metastatisk fænotype, hvilket giver forskerne et effektivt redskab til at undersøge kræftprogression og terapeutiske indgreb.
Referencer
- Pulaski, B.A. og S. Ostrand-Rosenberg, Musemodel for 4T1-brysttumor. Curr Protoc Immunol, 2001. Kapitel 20: s. Enhed 20.2.
- Maxwell, K.G., Immunmodulering af brystkræftceller til hel-tumorvaccination. 2016.
- Walker, I., et al., Brysttumorer inducerer central proinflammatorisk cytokinudtryk, men ikke adfærdsmæssige mangler hos Balb/C-mus. Scientific Reports, 2017. 7(1): s. 1-13.
- Li, Y., et al., Hæmning af Stat3-signalvejen ved hjælp af naturproduktet pectolinarigenin dæmper metastaser ved brystkræft. Frontiers in Pharmacology, 2019. 10: s. 1195.
- Farshchi, H.K., et al., Grøn syntese af jernnanopartikler ved hjælp af rosmarinekstrakt og evaluering af cytotoksisk effekt på kræftcellelinjer. Biocatalysis and agricultural biotechnology, 2018. 16: s. 54-62.
- Gholizadeh, A.P., et al., Effekt af ingefærekstrakt på 4T1-brystkræftcellelinjen i Balb/c-mus. Clinical Cancer Drugs, 2021. 8(1): s. 43-49.