KG-1-cellelinjen
Generelle karakteristika og oprindelse af KG-1-cellelinjen
En cellelinjes oprindelse og generelle egenskaber hjælper en forsker med at beslutte, hvordan den skal anvendes i sit arbejde. Du kan undersøge disse oplysninger, inden du begynder at arbejde med den. Dette afsnit handler om KG-1-makrofagernes oprindelse og egenskaber. Her vil du lære: Hvad er KG-1-celler? Hvad er KG-1a-cellelinjen? Hvad er KG-1-cellelinjens oprindelse? Hvad er KG-1-morfologien?
- KG-1 er en lymfoblastlignende cellelinje, der stammer fra knoglemarvsaspirat fra en kaukasisk mand (59 år) med akut myeloid leukæmi. Den blev etableret af Koeffler og Golde i 1978. Disse celler befinder sig hovedsageligt i modningsstadiet som promyelocytter eller myeloblaster [1].
- KG-1-celler har en lymfoblastlignende morfologi.
- Karyotypen for KG-1-cellelinjen udviser et pseudodiploidt modalt antal kromosomer.
KG-1 og KG-1a
KG-1a er en sublinje af de oprindelige KG-1-celler. Den blev udviklet efter 35 passager af KG-1-cellelinjen. Den er mindre differentieret sammenlignet med KG-1-cellelinjen. Desuden er denne sublinje cytokemisk, morfologisk og funktionelt mindre moden sammenlignet med den oprindelige cellelinje (KG-1).
Oplysninger om dyrkning af KG-1-cellelinjen
Dette afsnit af artiklen vil dække alle de vigtige oplysninger om dyrkning af KG-1-celler, der kan lette dit arbejde. Her vil du lære: Hvad er fordoblingstiden for KG-1-cellelinjen? Hvad er dyrkningsbetingelserne for KG-1-makrofager? Hvordan dyrker man KG-1-celler?
Vigtige punkter ved dyrkning af KG-1-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for KG-1 er ca. 45 timer. Den kan dog variere afhængigt af dyrkningsbetingelserne.
Adhærent eller i suspension:
KG-1-cellerne vokser i suspension.
Celledensitet:
Den optimale celletæthed for KG-1-cellelinjen er fra 1 til 3 x 105 celler/ml. Ved subkultivering overføres cellesuspensionen til et sterilt rør og centrifugeres. De opsamlede celler tilsættes derefter frisk medium og resuspenderes omhyggeligt. Derefter fordeles cellerne i nye kolber og dyrkes ved en optimal celletæthed. Cellerne kan deles, når de når en maksimal celletæthed på 1–2 × 10⁶ celler/ml.
Vækstmedium:
IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) indeholdende 10 % FBS, 4,5 g/L glukose, 4 mM L-glutamin, 1,0 mM natriumpyruvat og 3,0 g/L NaHCO₃ anvendes til dyrkning af KG-1-celler. Mediet bør udskiftes efter tre dage.
Vækstbetingelser:
KG1 AML-cellelinjen dyrkes i en befugtet inkubator ved 37 °C og med en CO₂-tilførsel på 5 %.
Opbevaring:
Frosne celler opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk ultralavtemperaturfryser for at beskytte cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:
CM-1 eller CM-ACF er egnet til nedfrysning af KG-1-celler. Cellerne nedfryses ved hjælp af en langsom nedfrysningsproces for at beskytte dem mod temperaturchok. Denne metode muliggør et gradvist temperaturfald på 1 °C pr. minut.
Optøningsproces:
Cellerne optøs i et forvarmet vandbad ved 37 °C, indtil der kun er en lille isklump tilbage. De optøede celler tilsættes frisk medium og centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemediet. Cellepelleten resuspenderes omhyggeligt og hældes i nye kolber, der indeholder vækstmedium.
Biosikkerhedsniveau:
Et laboratorium på biosikkerhedsniveau 1 er afgørende for opretholdelsen af KG-1-cellekulturer.
Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026
KG-1-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
Ligesom andre cellelinjer er KG-1-cellelinjen for myeloid leukæmi også forbundet med mange fordele og begrænsninger. I dette afsnit vil vi se nærmere på nogle af de vigtigste, som kan være afgørende for beslutningen om at anvende den i din forskning.
Fordele
De vigtigste fordele ved KG-1-celler er:
-
Nem dyrkning
KG-1-celler kan nemt dyrkes i forskningslaboratorier og har ukomplicerede krav til cellekulturen. De enkle vedligeholdelses- og vækstbetingelser gør dem tilgængelige for et bredt spektrum af forskere med grundlæggende faciliteter til cellekultur.
-
Model for akut myeloid leukæmi (AML)
KG-1 AML-cellelinjen stammer fra en mandlig patient med akut myeloid leukæmi (AML) og fungerer som et værdifuldt redskab til at undersøge AML's biologi og udføre forskning i potentielle behandlingsformer, hvilket giver indsigt i sygdommens underliggende mekanismer og behandlingsstrategier.
Begrænsninger
Begrænsningerne forbundet med KG1-cellelinjen er:
-
In vitro-model
KG-1-celler er en værdifuld in vitro-model til AML-forskning; det er dog vigtigt at bemærke, at de muligvis ikke fuldt ud gengiver sygdommens kompleksitet in vivo, men fungerer som en forenklet cellemodel, der muligvis ikke omfatter alle aspekter af AML-biologien.
Anvendelser af KG-1-celler i forskning
KG-1 tilbyder flere lovende anvendelsesmuligheder inden for biomedicinsk forskning. Nogle af de vigtige forskningsområder, hvor KG1-makrofagerne anvendes, omfatter:
- Kræftforskning: KG-1-celler stammer fra en patient med akut myeloid leukæmi og betragtes derfor som et værdifuldt forskningsværktøj til at undersøge AML-biologien. Forskere anvender disse celler til at studere de cellulære og molekylære mekanismer, der driver udviklingen, væksten og lægemiddelresistensen ved AML. Dette indebærer også identifikation og opdagelse af nye biomarkører, genetiske mutationer og signalveje forbundet med AML. For eksempel undersøgte en undersøgelse fra 2019, at det lange ikke-kodende RNA linc00239 fremmer doxorubicinresistens og malign adfærd i KG-1-celler fra akut myeloid leukæmi. Yderligere undersøgelser afslørede, at lncRNA'et aktiverer PI3K/Akt/mTOR-signalvejen for at udøve disse effekter i AML-celler [2].
- Toksikologi: KG1-cellelinjen anvendes i vid udstrækning i toksikologisk forskning. Forskere tester potentielle terapeutiske midlers toksicitet og effektivitet, herunder kemoterapeutiske lægemidler og målrettede terapier, på KG1-myeloide leukæmiceller for at identificere lovende lægemiddelkandidater til fremtidige prækliniske og kliniske vurderinger. I en undersøgelse fra 2018 blev toksiciteten af doxorubicin-holdige nano-niosomer analyseret på KG1-AML-cellelinjen. Undersøgelsen pegede på, at nano-niosomer er en egnet bærer til lægemiddelafgivelse, da de øger behandlingens effektivitet [3]. I en anden undersøgelse undersøgte forskerne de terapeutiske virkninger af brændenældete tilberedt af blade fra planten Urtica dioica. Undersøgelsen afslørede, at dette vandige bladekstrakt fra planten udøver antitumorvirkninger i celler fra akut myeloid leukæmi, KG-1 og U937 [4].
Publikationer om KG-1-celler
Dette afsnit af artiklen oplister nogle få interessante forskningspublikationer om KG-1-celler.
Quercetin øger følsomheden hos humane myeloide leukæmi-KG-1-celler over for TRAIL-induceret apoptose
Denne artikel blev offentliggjort i Journal of Cellular Physiology (2019). Undersøgelsen foreslog, at quercetin-forbindelsen gør KG1-AML-cellelinjen mere følsom over for TNF-relateret apoptose-inducerende ligand (TRAIL) og muligvis forstærker effekten af TRAIL-induceret cytotoksicitet i cellerne.
KLF8 fremmer vækst og glykolyse i celler fra akut myeloid leukæmi via AKT/mTOR-signalvejen
Denne artikel i Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) foreslår, at nedregulering af krüppel-lignende transkriptionsfaktor 8 hæmmer AML-celleproliferation og glykolyse og fremmer apoptose via regulering af AKT/mTOR-signalvejen.
Effekter af sorafenib og arsen(III)oxid på U937- og KG-1-cellelinjer: Apoptose eller autofagi?
Denne undersøgelse i Cell Journal (Yakhteh) (2020) undersøgte de potentielle effekter af arseniktrioxid og sorafenib på U937- og KG-1-celler.
Denne undersøgelse, der blev offentliggjort i Medical Oncology (2020), evaluerede OXPHOS og glykolyse som terapeutiske mål i AML-cellelinjen KG-1.
Denne artikel fra tidsskriftet Drug Design, Development, and Therapy fra 2020 foreslog, at curcumin og thalidomid i kombination synergistisk udøver apoptotiske effekter i KG-1-celler ved at nedsætte ekspressionen af STAT3 og Bcl-xL.
6. Ressourcer til KG-1-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Her følger nogle online ressourcer om KG-1-celler.
- Subkultivering af suspensionsceller: Denne video beskriver protokollen for subkultivering af suspensionscellekulturer som KG-1.
Følgende link indeholder protokollen for KG-1-cellekulturer:
- KG-1-cellelinjen: Denne hjemmeside indeholder en masse grundlæggende information om cellekulturer vedrørende KG-1-cellelinjen. Den omfatter oplysninger om medier til cellelinjen samt protokoller til subkultivering og håndtering af kryopræserverede og proliferative kulturer.
Referencer
- Pelliccia, F., V. Ubertini og N. Bosco, Betydningen af molekylærcytogenetisk analyse forud for anvendelse af cellelinjer i forskning: Eksemplet med KG-1a-leukæmicellelinjen. Oncol Lett, 2012. 4(2): s. 237-240.
- Yang, Y., et al., Det lange ikke-kodende RNA linc00239 fremmer malign adfærd og kemoresistens over for doxorubicin delvist via aktivering af PI3K/Akt/mTOR-signalvejen i celler fra akut myeloid leukæmi. Oncology Reports, 2019. 41(4): s. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al., Fremstilling og undersøgelse af nano-niosomer indeholdende doxorubicin samt vurdering af dets toksicitet på den akutte myeloblastiske leukæmicellelinje KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): s. 309–323.
- Hodroj, M.H., et al., Brændenældete hæmmer væksten af celler fra akut myeloid leukæmi in vitro ved at fremme apoptose. Nutrients, 2020. 12(9): s. 2629.