U87MG-celler – Forskning i glioblastom ved hjælp af U87MG og dens betydning for studier af hjernekræft
U-87 MG, den humane primære glioblastomcellelinje, anvendes i vid udstrækning inden for biologisk forskning. Disse celler anvendes især inden for neurovidenskab og immuno-onkologi.
- Vækstmedium
- U-87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsat 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-opløsning. Mediet bør udskiftes hver 2. til 3. dag.
- Fordoblingstid
- U 87 MG-celler har en fordoblingstid på mellem 18 og 38 timer.
- Væksttype
- U 87 MG er en adhærent cellelinje. Cellerne har en aflang form og vokser som monolag.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-1
- Fås hos
- Cytion — Bestil U-87 MG
- Generelle egenskaber og oprindelse af U-87 MG-cellelinjen
- Oplysninger om dyrkning af U-87 MG-celler
- Fordele og ulemper ved U-87 MG-celler
- Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
- Bestil din U87 MG-gliomcellelinje i dag
- U-87 MG-cellelinje: Forskningspublikationer
- Ressourcer til U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mere
- Indblik i U-87 MG-gliomforskning: Ofte stillede spørgsmål
- Referencer
- Ofte stillede spørgsmål
Generelle karakteristika og oprindelse af U-87 MG-cellelinjen
Dette afsnit gennemgår oprindelsen og de generelle egenskaber ved U87-cellelinjen. Du vil lære: Hvad er U-87 MG-celler? Hvor stammer U87-cellen fra? Hvad er den fulde betegnelse for U-87 MG? Hvor store er U87-celler? Hvad er morfologien for U87-cellelinjen?
- U87-cellelinjen er en glioblastom- og astrocytom-cellelinje. Den blev etableret i 1966 ved Uppsala Universitet. Cellerne stammer fra en 44-årig kaukasisk mand, der led af glioblastom. Denne cellelinje kaldes formelt U 87 MG, hvilket står for Uppsala 87 Malignant Glioma.
- U 87 MG-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Størrelsen på U 87 MG-celler varierer mellem 12 og 14 µm i diameter.
- Denne humane glioblastomcellelinje er hypodiploid og har et modalt kromosomantal på 44 i ca. 48 % af cellepopulationen. Der findes dog også højere ploidier i 5,9 % af cellepopulationen.
Oplysninger om dyrkning af U-87 MG-celler
Inden du arbejder med U 87 MG-celler, bør du sætte dig ind i følgende nøglepunkter vedrørende dyrkning af disse glioblastomceller. Du bør især vide: Hvad er populationens fordoblingstid for U 87 MG-celler? Hvilket dyrkningsmedium anvendes til dyrkning af U87-celler? Hvad er udsåningstætheden for U-87 MG-cellelinjen?
Vigtige punkter ved dyrkning af U-87 MG-celler
Populationsfordoblingstid:
U 87 MG-celler har en fordoblingstid på mellem 18 og 38 timer.
Adhærent eller i suspension:
U 87 MG er en adhærent cellelinje. Cellerne har en aflang form og vokser som monolag.
Udsåningstæthed:
Det anbefales at udså glioblastomcellelinjen U 87 MG med en celletæthed på 1 x 104 celler/cm2. Adhærente U87-celler vaskes med 1 x PBS og inkuberes med Accutase-opløsning. Derefter centrifugeres de dissocierede celler og opsamles. Cellerne resuspenderes omhyggeligt og overføres til nye kolber indeholdende vækstmedium.
Vækstmedium:
U 87 MG-cellelinjen dyrkes i EMEM (Eagle's minimal essential medium) tilsat 1,0 g/L L-glukose, 2,0 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO3, 1 % NEAA, 1 mM natriumpyruvat og 10 % FBS-opløsning. Mediet bør udskiftes hver 2. til 3. dag.
Vækstbetingelser:
U-87 MG-celler kræver en befugtet inkubator med 5 % CO₂-tilførsel og en temperatur på 37 °C for optimal vækst.
Opbevaring:
U87-cellerne opbevares enten i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C for at opretholde glioblastomcellernes maksimale levedygtighed.
Fryseproces og medium:
CM-1- eller CM-ACF-frysemedier er egnede til nedfrysning af U87 MG-celler. En langsom nedfrysningsproces anbefales, da den forhindrer cellerne i at få et chok og beskytter cellernes levedygtighed.
Optøningsproces:
Frosne hætteglas med U-87 MG-cellelinjen optøs i et vandbad ved 37 °C. Cellerne tilsættes vækstmedium, resuspenderes og overføres til dyrkning i nye kolber. Alternativt kan U87-cellerne centrifugeres for at fjerne frysemediet og derefter dyrkes.
Biosikkerhedsniveau:
Der kræves biosikkerhedsniveau 1 ved håndtering af U 87 MG-cellekulturer.
Fordele og ulemper ved U-87 MG-celler
Når vi tænker på en cellelinje, er det første, der falder os ind: Hvad er fordelene ved at bruge U-87 MG-celler? Hvad er ulemperne ved U-87-celler?
Fordele
U-87 MG-cellelinjer anvendes i vid udstrækning inden for forskning. Nogle af fordelene ved denne cellelinje er:
Fordele
- Let at dyrke: U-87 MG-celler er lette at opretholde i kultur. De stiller ikke krævende eller komplicerede krav til cellekultivering.
- Homogenitet: U-87 MG er en homogen cellelinje. De fleste celler i en population har samme genetiske sammensætning og deler derfor lignende egenskaber. Disse celler anvendes til at studere celleprocesser, lægemiddelscreening og testning.
- Velkarakteriseret: Denne glioblastomcellelinje er velkarakteriseret med hensyn til vækstkarakteristika, morfologi og genekspression, hvilket gør den til et værdifuldt forskningsværktøj.
Ulemper
- Begrænset anvendelighed: U-87 MG er en glioblastomcellelinje, så dens anvendelsesmuligheder er primært begrænset til undersøgelse af glioblastomer og de underliggende molekylære mekanismer. Den er muligvis ikke egnet til undersøgelse af andre kræfttyper.
Forskningsanvendelser med U-87 MG-celler
U87MG-glioblastomcellelinjen anvendes i vid udstrækning i kræftstudier, især inden for glioblastomforskning. Nogle af forskningsanvendelserne af U 87 MG-celler er:
- Forskning i kræftbiologi: U87-cellelinjen anvendes til at undersøge kræfts vækst og udvikling, de underliggende molekylære mekanismer, signalveje og tumorens mikromiljø. I en undersøgelse offentliggjort i 2020 blev der anvendt en in vitro-model for glioblastom, U-87 MG-cellelinjen, til at undersøge BMAL1-genet (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) som et terapeutisk mål. Resultaterne viste, at BMAL1-genet hæmmer glioblastomcellers proliferation, migration og invasion ved at undertrykke genekspressionen af cyclin B1, metalloproteinase-9 og phospho-AKT [1]. En anden undersøgelse, der blev gennemført i 2019, anvendte U87-cellelinjen og viste, at nedreguleret ekspression af transkriptionsfaktoren lipopolysaccharid-induceret tumornekrosefaktor-alfa (LITAF) kan øge gliomcellers strålefølsomhed gennem opregulering af FOXO-1-signalvejen. LITAF er også kendt som p53-induceret gen 7 (PIG7) [2].
- Lægemiddelforskning og -udvikling: U-87 MG-celler kan anvendes til screening og testning af lægemidler, hvilket giver forskere mulighed for at identificere nye potentielle kræftlægemidler og vurdere deres effektivitet og toksicitet. I en undersøgelse blev U-87-MG-glioblastomcellelinjen anvendt til at evaluere det kræftbekæmpende og antioxidante potentiale samt de antioxidante og kræftbekæmpende egenskaber ved Inula helenium (L.)-ekstrakt [3]. Tilsvarende nævnte en anden publikation brugen af U-87-cellelinjen til at teste den cytotoksiske og apoptotiske virkning af planteekstrakter [4]. Desuden undersøgte en undersøgelse, der blev offentliggjort i 2018, den cytotoksiske virkning af sesquiterpenalkaloider udvundet af Nuphar-planter på følsomme og lægemiddelresistente U-87-MG-cellelinjer [5].
Bestil din U87 MG-gliomcellelinje i dag
U-87 MG-cellelinje: Forskningspublikationer
Her er nogle fremtrædende forskningspublikationer, der omhandler U-87 MG-cellelinjen.
Denne artikel, der blev offentliggjort i Neuroreport i 2018, fremsatte den hypotese, at hypoxi kan øge migrationen og invasionen af humane glioblastom-U87-celler ved at regulere PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α-signalvejen.
Denne undersøgelse blev offentliggjort i tidsskriftet *Frontiers in Pharmacology* i 2020. Forskningsresultaterne viser, at et flavonoid, Eriodictyol, udøver kræftbekæmpende virkninger på U87-cellelinjen og hæmmer celleproliferation og metastase. Forbindelsen udøver sine antitumoregenskaber ved at modulere PI3K/Akt/NF-κB-signalvejen.
Denne forskning, offentliggjort i *Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine* (2018), tyder på, at en kinesisk urteformel kaldet Xihuang-pillen kan fremkalde apoptose i U87-celler ved at påvirke den ROS-aktiverede Akt/mTOR/FOXO1-kaskade.
LITAF øger strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-signalvejen
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i tidsskriftet *Cellular and Molecular Neurobiology* i 2019. Undersøgelsen foreslog, at en transkriptionsfaktor, LITAF, nedregulerer og øger strålefølsomheden hos gliomceller ved at regulere FOXO-1-signalvejen.
Denne artikel blev offentliggjort i tidsskriftet *Biointerface Research in Applied Chemistry* (2019). Forskerne anvendte U87MG-celler til at undersøge den cytotoksiske virkning af curcumin-ladede PLGA-nanopartikler.
Ressourcer til U-87 MG-celler: Protokoller, videoer og mere
U87MG-glioblastomcellelinjen anvendes i mange kræftforskningslaboratorier. Her er nogle ressourcer vedrørende denne cellelinje:
- Transfektion af U87-cellelinjen: Dette dokument beskriver en transfektionsprotokol for U87MG-celler.
- Transfektion af U 87 MG-cellelinjen: Denne video er en vejledning, der trin for trin forklarer transfektionsprotokollen for U87-celler.
Ressourcerne til cellekulturprotokollen for U87-celler er angivet nedenfor:
- U87MG-celler: Dette link indeholder grundlæggende oplysninger om U87MG-cellelinjen. Det omfatter korte protokoller for celledeling, nedfrysning og optøning af celler.
Indsigt i U87 MG-gliomforskning: Ofte stillede spørgsmål
Gliomcellelinjer, som f.eks. U87 glioblastomceller, er dyrkede celler fra humane gliomer, der bruges i vid udstrækning i kræftforskning til at studere tumorbiologi, genetik og lægemiddelrespons. De fungerer som modeller til at forstå tumoradfærd og teste terapeutiske strategier.
En isogen cellelinje refererer til celler, der stammer fra en enkelt celle, hvilket sikrer genetisk ensartethed. I gliomforskning giver isogene linjer en konsistent model til at studere genetiske ændringer og deres indvirkning på tumorvækst og respons på behandlinger.
DNA-profilen af gliomcellelinjer er afgørende for at identificere genetiske ændringer, forstå tumorudvikling og udvikle målrettede terapier. Det hjælper med at klassificere tumorer baseret på genetiske markører som IDH1-mutationer.
Serum i cellekulturmedier giver vigtige vækstfaktorer, hormoner og næringsstoffer til gliomceller. Men dets sammensætning kan påvirke forsøgets reproducerbarhed, og derfor bruges der i stigende grad serumfri eller definerede serumforhold.
Cellecytotoksicitet i gliomcellelinjer vurderes ved hjælp af analyser som flowcytometri, der måler cellernes sundhed, levedygtighed og død efter behandling med lægemidler eller immunceller som naturlige dræberceller (NK-celler).
NK-cellecytotoksicitet spiller en afgørende rolle i forskningen i gliombehandling, da NK-celler kan genkende og dræbe tumorceller uden forudgående sensibilisering. Undersøgelse af NK-cellers interaktion med gliomceller hjælper med at udvikle strategier til at forbedre NK-cellemedieret tumorclearance.
Oprindelsestumoren giver kontekst om det oprindelige biologiske miljø og tumorens egenskaber. Forståelse af dette hjælper med at korrelere resultater fra cellelinjeundersøgelser med faktisk tumoradfærd og patientprognose.
Elektronmikroskopi giver detaljeret visualisering af cellulære og subcellulære strukturer i gliomcellelinjer, hvilket er afgørende for at undersøge cellemorfologi, organellers sundhed og ændringer efter behandlinger.
NKG2D-liganden udtrykkes på tumorceller og binder sig til NKG2D-receptoren på NK-celler, hvilket udløser et cytotoksisk respons. At studere denne interaktion hjælper med at forstå og potentielt forbedre immunresponsen mod gliom.
3D-cellekulturmodeller efterligner mere præcist tumormikromiljøet og giver bedre indsigt i gliomers vækst, migration og lægemiddelresistens. Denne teknik er afgørende for mere relevante translationelle onkologiske studier.
Referencer
- Gwon, D.H., et al., BMAL1 hæmmer proliferation, migration og invasion af U87MG-celler ved at nedregulere cyclin B1, phospho-AKT og metalloproteinase-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., et al., LITAF øger strålefølsomheden hos humane gliomceller via FoxO1-signalvejen. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): s. 871-882.
- Koc, K., et al., Antioxidant- og antikræftvirkninger af ekstrakt af Inula helenium (L.) i den humane U-87 MG-glioblastomcellelinje. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): s. 658-661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh og A. Ghasempour, Cytotoksicitet og induktion af apoptose i brystkræft-, hudkræft- og glioblastomceller ved hjælp af planteekstrakter. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): s. 5131-5142.
- Fukaya, M. m.fl., Cytotoksicitet af sesquiterpenalkaloider fra Nuphar-planter over for følsomme og lægemiddelresistente cellelinjer. Food Funct, 2018. 9(12): s. 6279-6286.