T98G-cellelinje
T98G-celler udgør en human glioblastom-cellelinje, der generelt anvendes i biomedicinsk forskning. Disse celler anvendes især i studier af hjernekræft til at undersøge vigtige celler og molekylære faktorer, der bidrager til sygdommen. Desuden hjælper de forskere med at screene og teste nye kræftlægemidler, hvilket kan bidrage til lægemiddeludviklingen.
Generelle egenskaber og oprindelse af T98G-cellelinjen
Dette afsnit af artiklen vil hjælpe dig med at udforske de grundlæggende egenskaber ved T98G-cellelinjen. Det vil omfatte oplysninger om cellelinjens oprindelse, morfologi, størrelse og ploidi. Desuden vil det give et omfattende indblik i følgende spørgsmål: Hvad er T98G-celler? Hvilken celletype er T98G? Hvor stammer T98G fra? Hvad er kendetegnene ved T98G-cellelinjen? Hvad er glioblastom-cellelinjen T98G U87?
- T98G-cellelinjen blev etableret af GH Stein. Den består af fibroblastlignende celler, der stammer fra hjernevævet hos en 61-årig kaukasisk mand med glioblastoma multiforme [1].
- T98G-celler er ikke-tumorigeniske; de forårsager ikke tumorer, når de injiceres i nude-mus. De har dog en tendens til at formere sig, når de har passende forankring i cellekulturen.
- Disse celler har en morfologi, der ligner fibroblastcellers.
- Glioblastomcellelinjen T98G udviser hyperpentaploidi. Det modale kromosomantal varierer mellem 128 og 132. Højere ploidier kan forekomme hos 1,39 % af cellepopulationen.
T98 vs. T98G
Begge er humane glioblastomcellelinjer og har samme oprindelse. Den eneste forskel mellem disse cellelinjer er antallet af kromosomer. T98G har næsten dobbelt så mange kromosomer som T98. Derfor er T98G kendt som den polyploide variant af T98.
T98G vs. U87
U87 og T98G er begge humane glioblastomcellelinjer, der anvendes i forskning i hjernekræft. U87 udviser en mere aggressiv fænotype sammenlignet med T98G GBM.
2. Oplysninger om dyrkning af T98G-cellelinjen
Det er afgørende at kende oplysninger om dyrkning af en cellelinje, inden du påbegynder dit arbejde med den. Det vil hjælpe dig med nemt og bekvemt at håndtere cellelinjen i laboratoriet. Du bør vide: Hvad er fordoblingstiden for T98G-cellelinjen? Hvilket vækstmedium er bedst til T98G-celler? Hvad er T98G-cellernes vækstkarakteristika? Hvad er udsåningstætheden for T98G-celler? Hvordan fryser man T98G-celler ned?
Vigtige punkter ved dyrkning af T98G-celler
Fordoblingstid:
Den omtrentlige fordoblingstid for T98G-celler er 40 timer. Den kan variere afhængigt af dyrkningsbetingelserne.
Adhærente eller i suspension:
T98G-celler er adhærente. De fæstner sig til bunden af dyrkningsbeholderne og danner monolag.
Opdelingsforhold:
T98G-cellerne subkultiveres med et opdelingsforhold på 1:2 til 1:5. Til dette vaskes cellerne først med 1 X PBS-buffer og inkuberes derefter med passageringsopløsning (Accutase) i 8 til 10 minutter ved stuetemperatur. Efter inkubationen overføres de løsrevne celler til frisk vækstmedium og centrifugeres. Derefter resuspenderes den opsamlede cellepellet omhyggeligt, og cellerne overføres til en dyrkningskolbe indeholdende vækstmedium.
Vækstmedium:
Til dyrkning af T98G-celler anvendes EMEM-medium indeholdende 10 % føtal bovint serum, 2 mM L-glutamin, 2,2 g/L NaHCO₃ og EBSS. Mediet bør udskiftes 3 til 4 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
T98G-celler opbevares i en befugtet inkubator indstillet til 37 °C og tilsluttet en CO₂-forsyning.
Opbevaring:
Frosne celler kan opbevares ved temperaturer under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at bevare cellernes levedygtighed på længere sigt.
Fryseproces og medium:
Det anbefales at nedfryse T98G-celler i CM-1- eller CM-ACF-cellefrysemedier. Til dette formål anbefales en langsom nedfrysningsproces, hvor temperaturen kun sænkes med 1 °C pr. minut. Dette forhindrer cellerne i at få et temperaturchok og bevarer deres levedygtighed.
Optøningsproces:
Frosne celler optøs forsigtigt ved at placere dem i et forvarmet vandbad ved 37 grader Celsius i 40 til 60 sekunder. Derefter resuspenderes de i frisk vækstmedium og overføres til en ny kolbe. Efter 24 timers inkubation skiftes mediet for at fjerne komponenter fra frysemediet.
Biosikkerhedsniveau:
T98G-kulturer opbevares i et biosikkerhedsniveau 1-laboratorium.
Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026
- T98G-cellelinje: Fordele og ulemper
- Anvendelser af T98G-celler
- 2. Oplysninger om dyrkning af T98G-cellelinjen
- Vigtige punkter ved dyrkning af T98G-celler
- Generelle egenskaber og oprindelse af T98G-cellelinjen
- 5. Forskningspublikationer om T98G-celler
- Ressourcer til T98G-celler: Protokoller, videoer og mere
- Ofte stillede spørgsmål
T98G-cellelinjen: Fordele og ulemper
T98G er en meget udbredt glioblastomcellelinje af menneskelig oprindelse. Den har flere fordele og ulemper, der adskiller den fra andre. Nogle af de mest bemærkelsesværdige behandles i dette afsnit af artiklen.
Fordele
Fordelene ved T98G-cellerne er:
-
Velkarakteriseret
Veletableret og velkarakteriseret cellelinje. Omfattende undersøgt og dokumenteret i litteraturen.
-
In vitro-model
Repræsenterer karakteristika ved glioblastom, den mest aggressive hjernetumor. Et værdifuldt redskab til sygdomsundersøgelse, forståelse af biologien og udvikling af behandlinger.
Ulemper
Ulemperne ved T98G-celler er:
-
Heterogenitet
Genetisk heterogenitet i T98G-cellepopulationen kan føre til inkonsekvens i eksperimentelle resultater og komplicere fortolkningen af data.
Anvendelser af T98G-celler
T98G-cellelinjen er et værdifuldt redskab i kræftforskningen. Her følger en oversigt over nogle af de vigtigste anvendelsesområder for T98G-cellerne:
- Kræftforskning: T98G-cellelinjen er et værdifuldt redskab til at undersøge biologien bag glioblastomtumorer. Disse celler bruges hovedsageligt til at studere de komplekse molekylære signalveje, der ligger til grund for udviklingen og progressionen af glioblastom. Desuden anvendes de til at identificere genetiske mutationer, der driver tumorvækst, samt andre mekanismer i kræftceller. Yang Chen og kolleger arbejdede med disse celler og fandt, at overekspression af miRNA-21 nedsætter PDCD4-niveauerne (Programmed cell death protein 4) i T98G-celler. Dette fører til hæmning af PDCD4-medieret apoptose i T98G-celler. Undersøgelsen peger således på miRNA-21 som et potentielt mål for udvikling af behandlinger [2]. I lighed med denne undersøgelse studerede Fanqiang Kong og kolleger mikroRNA-15a’s rolle i T98G-glioblastomcellers proliferation og invasion. De fandt, at miRNA-15a-5p fremmer disse celleprocesser ved at målrette sig mod celleadhæsionsmolekyle 1 (CADM1) [3].
- Lægemiddelafprøvning og udvikling af behandlinger: T98G fungerer som en fremragende in vitro-model for glioblastom til screening af nye lægemidler og udgør en platform til at evaluere effektiviteten af potentielle kræftbehandlinger. Forskere tester også en række forskellige forbindelser og behandlinger for at identificere og opdage lægemiddelkandidater med de mest lovende egenskaber mod glioblastom. Dette fører til udvikling af nye lægemidler og behandlingsstrategier, hvilket giver håb for glioblastom-patienter. En sådan undersøgelse undersøgte det kræftbekæmpende potentiale af et naturligt stof kaldet corilagin i den temozolomid-resistente T98G GBM-cellelinje. Undersøgelsens resultater tyder på, at corilagin i kombination med temozolomid fremkalder stærkere antiproliferative og antiapoptotiske effekter i cellerne [4].
5. Forskningspublikationer om T98G-celler
Nedenfor følger nogle interessante og ofte citerede forskningspublikationer om T98G, glioblastomcellelinjen.
Kemoterapeutisk virkning af SR9009, en REV-ERB-agonist, på humane T98G-glioblastomceller
Denne publikation i ASN Neuro (2019) undersøgte de kræftbekæmpende virkninger af en REV-ERB-agonist kaldet SR9009 på T98G-glioblastomceller.
Denne forskningsartikel i *Neurochemical Research* (2019) fremsatte den hypotese, at natriumbutyrat og quercetin synergistisk hæmmer den beskyttende autofagi i T98G-celler og øger celleapoptosen.
Denne undersøgelse i tidsskriftet *Genes* (2023) underkastede den hypoxi-tilpassede T98G-cellelinje RNA-sekventering og foreslog IRE1 (Inositol-requiring enzyme 1) som et lovende terapeutisk mål.
MikroRNA-548c-3p hæmmer T98G-gliomcellers proliferation og migration ved at nedregulere c-Myb
Denne artikel blev offentliggjort i *Oncology Letters* (2017). Undersøgelsen viste, at miRNA-548c-3p retter sig mod T98G-onkogener (c-Myb) for at hæmme T98G-cellernes proliferation og migration.
Denne artikel i *Journal of Medicinal Plants Research* (2011) fremlagde, at kloroformekstrakt af *Dracocephalum tanguticum* udøver antiproliferative virkninger på T98G-celler ved at modulere caspase-3-, Bax- og P21-generne.
Ressourcer til T98G-celler: Protokoller, videoer og mere
De tilgængelige ressourcer vedrørende protokoller for dyrkning og transfektion af T98G-celler er nævnt her.
- T98G-transfektion: Denne forskningsartikel indeholder protokollen for T98G-transfektion. Den forklarer kortfattet metoden og de nødvendige reagenser.
Følgende links vil være til stor hjælp, når du skal lære T98G-cellekulturprotokollen at kende og gøre dit arbejde med den lettere.
- T98G-celler: Denne hjemmeside indeholder vigtige oplysninger om protokoller til T98G-cellekultivering, herunder subkultivering og håndtering af proliferative og kryopræserverede kulturer. Desuden vil den også hjælpe dig med at lære om cellevækstmedier, betingelser og fordoblingstid.
Referencer
- Haehl, E., Endotelcelleinduceret stråleresistens i glioblastom. 2021, Universität Tübingen.
- Chen, Y., et al., MicroRNA-21 nedregulerer ekspressionen af tumorsuppressoren PDCD4 i den humane glioblastomcelle T98G. Cancer Letters, 2008. 272(2): s. 197-205.
- Kong, F., et al., MicroRNA‑15a‑5p fremmer proliferation og invasion af T98G-glioblastomceller ved at målrette sig mod celleadhæsionsmolekyle 1. Oncology Letters, 2021. 21(2): s. 1-1.
- Milani, R., et al., Corilagin inducerer høje niveauer af apoptose i den temozolomidresistente T98G-gliomcellelinje. Oncol Res, 2018. 26(9): s. 1307-1315.