NCI-H460-celler – Vejledning i lungekræftforskning med indsigt fra NCI-H460
NCI-H460 er humane ikke-småcellede lungekræftceller, der ofte anvendes i forskning inden for lungekræft og toksikologi. Denne cellelinje er et værdifuldt redskab til at undersøge forskellige aspekter af kræftbiologi, herunder tumorudvikling, vækst og lægemiddelresistens. Desuden er NCI-H460-celler en velegnet model til udvikling af kræftbekæmpende midler.
- Vækstmedium
- RPMI 1640 anvendes som dyrkningsmedium til NCI-H460. Det tilsættes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for NCI-H460 er ca. 33 timer.
- Væksttype
- NCI-H460-lungekræftcellerne er adhærente.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-4
- Kan bestilles hos
- Cytion — Bestil NCI-H460
NCI-H460-celler: Oprindelse og generelle egenskaber
En cellelinjes oprindelse og generelle egenskaber har stor betydning for dens anvendelse i forskning. Dette afsnit af artiklen vil hjælpe dig med at lære om oprindelsen og de vigtigste egenskaber ved NCI-H460-lungekræftceller. Du vil få viden om: Hvad er NCI-H460-celler? Hvilken type cellelinje er NCI-H460? Hvad er morfologien for NCI-H460?
- NCI-H460-cellelinjen stammer fra pleural effusion hos en europæisk mand med storcellet lungekræft. Den blev etableret i 1982 af A.F. Gazdar og kolleger.
- NCI-H460-lungekræftceller har en epitelial morfologi.
- NCI-H460 er en tumorigen cellelinje med en hypotriploid karyotype. Det modale kromosomantal for disse celler er 57. NCI-H460-celler har også 58 modale kromosomantal i sammenlignelige andele.
- Disse lungekræftceller har mange NCI-H460-mutationer, som man også ser i ikke-småcellede lungetumorer, f.eks. NCI-H460 KRAS-mutationen, der er involveret i celleproliferation, vækst, invasion og metastase.
Oplysninger om dyrkning af NCI-H460-celler
Du bør kende følgende vigtige punkter for korrekt håndtering og vedligeholdelse af NCI-H460-cellelinjen. Her finder du oplysninger om NCI-H460-fordoblingstid, NCI-H460-dyrkningsmedium og grundlæggende cellekulturprocedurer for NCI-H460-lungekræftceller.
Vigtige punkter ved dyrkning af NCI-H460-celler
Fordoblingstid:
Fordoblingstiden for NCI-H460 er ca. 33 timer.
Adhærente eller i suspension:
NCI-H460-lungekræftcellerne er adhærente.
Subkultiveringsforhold:
Det anbefalede subkultiveringsforhold for NCI-H460-cellelinjen er 1:2 og 1:4. Efter fjernelse af det gamle medium skylles de adhærente celler med 1 x fosfatbuffersaltvand. Derefter inkuberes cellerne med Accutase-passageringsopløsning i 8 til 10 minutter ved stuetemperatur. De dissocierede celler resuspenderes i et dyrkningsmedium og centrifugeres. De høstede celler resuspenderes igen og hældes over i den nye kolbe til dyrkning.
Vækstmedium:
RPMI 1640 anvendes som NCI-H460-dyrkningsmedium. Det tilsættes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
NCI-H460-kulturer opbevares ved 37 °C i en befugtet inkubator med en kontinuerlig tilførsel af 5 % CO₂.
Opbevaring:
NCI-H460-lungekræftceller kan opbevares i dampfasen af flydende nitrogen eller ved en temperatur under -150 °C i en elektrisk ultralavtemperaturfryser i længere tid.
Fryseproces og medium:
CM-1- eller CM-ACF-medium anvendes til nedfrysning og opbevaring af NCI-H460-celler. En langsom nedfrysningsmetode anbefales for at sikre maksimal celleoverlevelse.
Optøningsproces:
Frosne NCI-H460-celler optøs i et forvarmet vandbad (ved 37 °C) i 40 til 60 sekunder, indtil der kun er en lille isklump tilbage. De optøede celler tilsættes frisk væske og centrifugeres for at fjerne komponenter fra frysemidlet. Den opsamlede cellepellet resuspenderes igen, og cellerne overføres til nye kolber indeholdende væske til vækst. Det kan tage næsten 24 timer, før NCI-H460-cellerne fæstner sig til kolbernes overflade.
Biosikkerhedsniveau:
NCI-H460-lungekræftceller håndteres og opbevares i laboratorier på biosikkerhedsniveau 1.
Udgivet: 2023 | Senest revideret: maj 2026
Fordele og ulemper ved NCI-H460-celler
NCI-H460 er en meget udbredt cellelinje inden for lungekræftforskning. Dette afsnit vil gennemgå de generelle fordele og ulemper ved NCI-H460-lungekræftceller.
Fordele
Fordelene ved NCI-H460-cellelinjen for ikke-småcellet lungekræft er:
-
Tumorens oprindelse
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en patient med storcellet lungekarcinom og repræsenterer denne specifikke lungekræfttype. Den anvendes som model til at studere lungekræftbiologi og udvikle nye og effektive behandlinger. NCI-H460-celler har tumorigenisk potentiale og kan injiceres i immundefekte mus for at skabe in vivo-tumormodeller til undersøgelse af tumorvækst, udvikling og effekt af potentielle lægemidler.
-
Høje proliferationshastigheder
NCI-H460 udviser højere vækstrater end andre cellelinjer for ikke-småcellet lungekræft, såsom A549. Denne fordel øger deres tilgængelighed og hjælper forskere med at gennemføre reproducerbare og tidsfølsomme eksperimenter.
Ulemper
Ulemperne ved NCI-H460-lungekræftceller er:
-
Homogenitet
NCI-H460-celler er homogene, da de stammer fra en enkelt patients tumor. De mangler derfor generelt den kompleksitet og heterogenitet, der ses i patienttumorer.
Forskningsanvendelser af NCI-H460-celler
NCI-H460-lungekræftcellerne anvendes i vid udstrækning i studier vedrørende lungekræft. Her er nogle af de vigtige forskningsanvendelser af NCI-H460-celler:
- Forskning i lungekræft: NCI-H460-celler er en uvurderlig model til undersøgelse af de cellulære og molekylære mekanismer, der er involveret i tumorudvikling, vækst og metastase. Desuden anvendes de til at studere vigtige signalveje, molekylære mål og forskellige genetiske mutationer forbundet med udviklingen af lungekræft. Der er gennemført adskillige undersøgelser af NCI-H460-celler for effektivt at undersøge disse faktorer. En undersøgelse fra 2019 foreslog, at overekspresseret nukleært ubiquitært kasein og cyklinafhængigt kinasesubstrat (NUCKS) er involveret i tumorcellernes vækst via regulering af PI3K/AKT-signalvejen [1]. Tilsvarende anvendte en in vitro- og in vivo-undersøgelse NCI-H460-celler til at undersøge eIF4E-genets rolle. Resultaterne afslørede, at eIF4E-genet er involveret i vækst af lungekarcinom og angiogenese, og at det kan udnyttes som mål for udvikling af lovende lægemidler mod lungekræft [2].
- Lægemiddelforskning og -udvikling: NCI-H460, en human lungekræftcellelinje, anvendes i vid udstrækning i studier inden for lægemiddelforskning og -udvikling. Forskere bruger disse celler til at undersøge toksicitet og effektivitet af nye lægemiddelkandidater, målrettede terapier og behandlinger, der primært er rettet mod NCI-H460 KRAS-mutationer. I en undersøgelse udført af Haoyue Hu og kolleger i 2023 blev NCI-H460-celler anvendt til at undersøge lægemidlet anlotinibs kræftbekæmpende virkninger. Resultaterne viste, at anlotinib delvist påvirkede væksten af KRAS-mutante lungekræftceller ved at hæmme MEK/ERK-signalkaskaden [3]. Tilsvarende blev en fenolforbindelse, carnosinsyre, screenet for antiproliferative og proapoptotiske aktiviteter ved hjælp af NCI-H460-celler [4].
- Lægemiddelresistens: NCI-H460-cellelinjen er ideel til at undersøge mekanismen bag lægemiddelresistens ved lungekræft. Forskere bruger disse celler til at udvikle modeller for lægemiddelresistens for at identificere de underliggende gener, molekylære faktorer og signalveje. For eksempel udviklede en undersøgelse NCI-H460-celler, der var resistente over for pemetrexed – et multitargetet antifolatmiddel – for at undersøge de underliggende molekylære mekanismer bag pemetrexed-resistens i ikke-småcellede lungekræftceller [5].
Køb NCI-H460-cellelinjen: Din indgang til forskning i lungekræft
Forskningspublikationer om NCI-H460-celler
Her er nogle interessante forskningspublikationer om NCI-H460-lungekræftcellelinjen.
Denne undersøgelse, offentliggjort i tidsskriftet Molecules (2023), foreslår, at et naturligt α-1,6-glukan, BBWPW, fra sorte bønner hæmmer proliferationen af NCI-H460-celler ved at regulere PI3K/AKT/MAPK-signalvejen.
Denne artikel i tidsskriftet *Phytomedicine* (2019) undersøgte, at dioscin-6′-O-acetat, et nyt naturligt stof, udøver en antiproliferativ virkning på NCI-H460-lungekræftceller.
miRNA-425-5p fremmer væksten af lungekræft via PTEN/PI3K/AKT-signalvejen
Forskning i BMC Pulmonary Medicine (2020) viser, at mikroRNA-425-5p fremmer tumorudviklingen i lungekræft via PTEN/PI3K/AKT-signalvejen.
Denne artikel i Molecular Medicine Reports (2017) beskriver quinalizarins antitumorpotentiale og de underliggende mekanismer i NCI-H460-celler og andre lungekræftceller.
Denne forskning i Food and Function (2019) fremhæver den potentielle antikræfteffekt af Eucalyptus globulus Labill.-ekstrakt ved anvendelse af NCI-H460-celler. Resultaterne viste, at planteekstraktet udviste disse effekter ved at øge p53-ekspressionen i NCI-H460-cellerne og modulere cellecyklusprofilen.
Ressourcer til NCI-H460-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Her er nogle online ressourcer om NCI-H460-lungekræftcellerne.
- Transfektion af NCI-H460-celler: Denne videovejledning er en trin-for-trin-guide til transfektion af NCI-H460-celler med plasmid-DNA.
Følgende links indeholder vigtige oplysninger om cellekultur for H460-celler.
- NCI-H460-celler: Denne hjemmeside indeholder vigtige oplysninger om NCI-H460-cellemedier samt procedurer for subkultivering, nedfrysning og optøning.
- Passering af NCI-H460-celler: Dette dokument vil vejlede dig om passering og subkultivering af NCI-H460-cellelinjen. Desuden vil det også hjælpe dig med at lære transfektionsprotokollen for NCI-H460-celler.
En nærmere undersøgelse af NCI-H460-cellelinjen: Ofte stillede spørgsmål og indblik
NCI-H460-cellelinjen stammer fra en patient med storcellet lungekarcinom, hvilket gør den til en værdifuld model for studier af denne type lungekræft.
NCI-H460-celler bruges til at undersøge lungekræftbiologi, udvikle nye behandlinger og vurdere effekten af potentielle lægemidler. De kan også indsprøjtes i immundefekte mus for at skabe in vivo-tumormodeller til undersøgelse af tumorvækst og -udvikling.
Både NCI-H460- og A549-cellelinjerne stammer fra lungekarcinomer, men NCI-H460 repræsenterer storcellet karcinom, mens A549 repræsenterer adenokarcinom. Denne forskel i histologisk subtype påvirker deres egenskaber og adfærd.
Yeees, NCI-H460-celler har tumorigenisk potentiale og kan implanteres i immundefekte mus for at skabe xenograftmodeller, hvilket letter undersøgelsen af storcellet lungekarcinom in vivo.
Ved at kombinere paclitaxel med andre stoffer kan man øge dets cytotoksiske virkning på NCI-H460-celler og potentielt forbedre behandlingsresultaterne for lungekræft.
Yeees, NCI-H460-celler udtrykker hypoxanthin guanin phosphoribosyltransferase, som er vigtig for nukleotidmetabolismen og celleproliferationen.
NCI-H460-celler bruges ofte i kræft- og toksikologiforskning til at studere tumorvækst, vurdere cytotoksiske virkninger af stoffer og undersøge mekanismer for lægemiddelresistens.
NCI-H460-celler udtrykker typisk neurofilament-tripletproteiner, som er involveret i at opretholde cytoskeletal struktur og kan spille en rolle i kræftcellers migration og invasion.
Blandt andet κB-stien er involveret i reguleringen af NCI-H460-cellers spredning og overlevelse, hvilket giver potentielle mål for terapeutisk indgriben i lungekræft.
Yeees, NCI-H460-celler er almindeligt anvendte in vitro-modeller til at vurdere de cytotoksiske virkninger af kemoterapeutiske midler, herunder paclitaxel og carboplatin, hvilket bidrager til udviklingen af effektive kræftbehandlinger.
Referencer
- Hu, C., et al., NUCKS fremmer proliferation, migration og invasion af lungekræftceller gennem Pi3k/Akt-signalvejen. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): s. E55-61.
- Qi, X., et al., EGPI-1, en ny hæmmer af interaktionen mellem eIF4E og eIF4G, hæmmer væksten af lungekræftceller og angiogenese via Ras/MNK/ERK/eIF4E-signalvejen. Chemico-Biological Interactions, 2022. 352: s. 109773.
- Hu, H., et al., Anlotinib udøver kræftbekæmpende virkninger på KRAS-muterede lungekræftceller ved at hæmme MEK/ERK-signalvejen. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosinsyre udviser antiproliferative og proapoptotiske effekter i tumorale NCI-H460- og ikke-tumorale IMR-90-lungeceller. Journal of Toxicology and Environmental Health, del A, 2020. 83(10): s. 412–421.
- Xu, Y.-L., et al., Etablering og karakterisering af pemetrexed-resistente NCI-H460/PMT-celler. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (tidligere Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): s. 731-739.