BxPC-3-cellelinje
BxPC-3 er en cellelinje fra menneskelig bugspytkirtelkræft. Den anvendes bredt i kræftforskning. Forskere bruger hovedsageligt disse celler til at undersøge bugspytkirtelkræftens biologi, identificere terapeutiske mål og udvikle kræftmedicin.
- Vækstmedium
- RPMI 1640-medie anvendes til dyrkning af BxPC-3-cellelinjen. Det tilsættes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3 for at opnå optimal cellevækst. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
- Fordoblingstid
- Fordoblingstiden for BxPC-3-celler ligger mellem 48 og 60 timer.
- Væksttype
- BxPC-3 er en adhærent cellelinje.
- Biosikkerhedsniveau
- BSL-3
- Fås hos
- Cytion — Bestil BxPC-3
Denne artikel indeholder vigtige oplysninger om BxPC-3-cellelinjen, som kan være til stor hjælp i dit arbejde med den. Den vil hovedsageligt omhandle:
- Generelle oplysninger og oprindelse af BxPC-3-cellelinjen
- Dyrkning af BxPC-3-celler
- BxPC-3-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
- Anvendelser af BxPC-3-celler i forskning
- Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
- Ressourcer til BxPC-3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
Generel information og oprindelse af BxPC-3-cellelinjen
Det er afgørende at kende en cellelinjes oprindelse for at kunne anvende den i forskning. Kendskab til dens egenskaber, herunder morfologi, cellestørrelse og ploidi, gør brugen af den mere ligetil og praktisk. Her kan du læse om oprindelsen og de generelle egenskaber ved BxPC-3-celler: Hvad er BxPC-3-celler? Hvad er BxPC-3-cellelinjen? Hvad er oprindelsen til BxPC-3-cellelinjen? Hvad er BxPC-3-morfologien?
- BxPC-3, humane bugspytkirtelkarcinomceller, stammer fra en 61-årig europæisk kvinde med adenokarcinom i bugspytkirtlen i 1986. Disse celler blev bekræftet som tumorigeniske, selv efter at patienten havde gennemgået flere stråle- og kemoterapibehandlinger. Den etablerede cellelinje er således en uvurderlig model til at studere kræftudvikling og -progression.
- BxPC-3-celler har en epitelcellelignende morfologi.
- Det modale kromosomantal for BxPC-3 er 59. Disse celler har en homozygot deletion på kromosom 18q, som koder for SMAD4/DPC4-proteinet. Desuden mangler cellelinjen den BxPC-3-kras-mutation, der er almindelig blandt bugspytkirteltumorer. BxPC-3-braf-deletion findes også i disse bugspytkirtelkræftceller.
Hvad er forskellen mellem BxPC3 og PANC-1?
BxPC-3 PADC (pankreatisk duktalt adenokarcinom) og PANC-1-celler er primære bugspytkirtelkræftcellelinjer med en epitelial morfologi. Her har de førstnævnte celler flere epitel-lignende egenskaber, mens de sidstnævnte udviser flere mesenkymale egenskaber [1].
Dyrkning af BxPC-3-celler
BxPC-3-cellelinjen er meget udbredt i kræftforskningslaboratorier. Du skal kende følgende nøglepunkter for at kunne dyrke denne bugspytkirtelkræftcellelinje effektivt. Du vil lære: Hvad er fordoblingstiden for BxPC-3? Hvordan dyrker man BxPC-3-cellelinjen?
Vigtige punkter ved dyrkning af BxPC-3-celler
Populationsfordoblingstid:
Fordoblingstiden for BxPC-3-celler ligger mellem 48 og 60 timer.
Adhærent eller i suspension:
BxPC-3 er en adhærent cellelinje.
Opdelingsforhold:
BxPC-3-celler subkultiveres i et forhold på 1:2 til 1:4. Cellerne vaskes med 1 x PBS og inkuberes med en passageringsopløsning kaldet accutase. Efter 8-10 minutter tilsættes frisk medie til cellerne, og cellerne centrifugeres. Pelleten resuspenderes igen i medie, og cellerne hældes i et nyt dyrkningskar til vækst.
Vækstmedium:
RPMI 1640-medie anvendes til dyrkning af BxPC-3-cellelinjen. Det tilsættes 10 % føtal bovint serum, 2,1 mM stabilt glutamin og 2,0 g/L NaHCO3 for at opnå optimal cellevækst. Mediet bør udskiftes 2 til 3 gange om ugen.
Vækstbetingelser:
BxPC-3-cellekulturer opbevares i en befugtet inkubator ved 37 °C, der er tilsluttet en 5 % CO2-forsyning.
Opbevaring:
Frosne celler opbevares generelt ved en temperatur under -150 °C eller i dampfasen af flydende nitrogen for at beskytte cellernes levedygtighed.
Fryseproces og medium:
CM-1 eller CM-ACF kan anvendes til nedfrysning af BxPC-3-cellekulturer. Der anvendes en langsom nedfrysningsproces, hvor temperaturen kun sænkes med 1 °C ad gangen for at forhindre, at cellerne udsættes for et temperaturchok.
Optøningsproces:
Frosne BxPC-3-celler optøs i et forindstillet vandbad ved 37 °C i 40 til 60 sekunder. Når der kun er en lille isklump tilbage, tilsættes der frisk dyrkningsmedium til cellerne, og de centrifugeres for at fjerne elementer fra frysemediet. Derefter resuspenderes cellepelleten, og cellerne overføres til kolben med henblik på vækst.
Biosikkerhedsniveau:
BxPC-3-cellekulturer opbevares i laboratorier med biosikkerhedsniveau 1.
BxPC-3-cellelinjen: Fordele og begrænsninger
BxPC-3 er en velkendt cellelinje for adenokarcinom i bugspytkirtlen, der er forbundet med flere fordele og begrænsninger. De vigtigste fordele og ulemper ved cellelinjen er angivet her.
Fordele
De vigtigste fordele ved BxPC-3-celler er:
-
In vitro-model for bugspytkirtelkræft
BxPC-3-celler, der stammer fra patienter med adenokarcinom i bugspytkirtlen, udviser relevante egenskaber, hvilket gør dem til en velegnet model til at studere bugspytkirtelkræfts adfærd in vitro.
-
Tumorigen cellelinje
BxPC-3-celler har tumorigeniske egenskaber og kan danne tumorer, når de injiceres i nude-mus eller immunkompromitterede mus. Disse tumorer ligner i høj grad primære adenokarcinomtumorer i bugspytkirtlen, hvilket gør BxPC-3-xenotransplantatmodellen ideel til at studere kræftvækst og -progression.
Begrænsninger
Begrænsningerne forbundet med BxPC-3-cellelinjen er:
-
Krydsforurening
BxPC-3-cellelinjen medfører, som alle andre, en risiko for krydskontaminering. Forskere bør udvise forsigtighed og overholde strenge protokoller til forebyggelse af kontaminering, når de håndterer disse celler.
-
Langsom væksthastighed
BxPC-3-celler udviser en relativt langsom proliferationshastighed med en fordoblingstid på mellem 48 og 60 timer. Denne egenskab kan kræve længere inkubationsperioder for specifikke eksperimenter, hvilket potentielt kan forårsage forsinkelser i forskningsforløbet.
Anvendelser af BxPC-3-celler i forskning
BxPC-3-celler har mange anvendelsesmuligheder inden for kræftforskning. De mest almindelige anvendelser er:
- Forskning i bugspytkirtelkræft: BxPC-3-celler efterligner adenokarcinom i bugspytkirtlen og bruges derfor til at undersøge de genetiske og molekylære mekanismer, der ligger til grund for tumorudvikling og -vækst. Derudover afdækker forskere nye biomarkører og terapeutiske mål ved hjælp af disse celler. Desuden udtrykker BxPC-3-celler i betydelig grad angiogene faktorer, dvs. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) og vaskulær endotelvækstfaktor (VEGF), hvilket gør dem velegnede til at studere angiogenese. Her er angiogenese en afgørende proces forbundet med kræftvækst og metastase. En undersøgelse offentliggjort i 2022 viste, at overekspression af laminin-5 gamma-2 (LAMC2) i BxPC3 PDAC (pankreatisk duktalt adenokarcinom) forstærker tumorigenesen via regulering af BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/mTOR-signalvejen [2].
- Lægemiddelforskning og -udvikling: BxPC-3-cellelinjen fungerer som en uvurderlig testmodel for kræftlægemidler. Forskere undersøger potentielle lægemidlers cytotoksiske, antimetastatiske og apoptotiske effekter på BxPC3 PDAC. En undersøgelse foretaget af Alexandria Turner og kolleger i 2020 undersøgte de apoptotiske egenskaber ved frugtekstrakter fra Elaeocarpus reticulatus i BxPC-3-celler fra bugspytkirtelkræft [3]. Tilsvarende blev der i 2020 gennemført forskning, der fastslog det kræftbekæmpende potentiale af et metanoliskt ekstrakt af en plante kaldet Oxialis obtriangulata i BxPC-3-celler. Desuden undersøgte forskerne også den cellulære mekanisme, gennem hvilken planteekstraktet udøvede terapeutiske virkninger [4].
5. Forskningspublikationer om BxPC-3-celler
Dette afsnit indeholder en liste over nogle af de mest citerede og interessante publikationer om BxPC-3-cellelinjen.
Licocoumarone inducerer celledød i BxPC-3-adenokarcinomceller i bugspytkirtlen ved at hæmme DYRK1A
Denne publikation i Chemico-Biological Interactions (2020) undersøgte de apoptotiske effekter af et naturprodukt, licocoumarone, på BxPC-3-celler fra bugspytkirtelkræft.
Hydroxychloroquin fremmer Bcl-xL-hæmningsinduceret apoptose i BxPC-3 humane bugspytkirtelkræftceller
Denne forskningsartikel blev offentliggjort i Anticancer Research (2022). Undersøgelsen foreslog, at hydroxychloroquin forårsager BxPC3-celle død ved at hæmme BCL-XL-genet.
Denne forskning blev offentliggjort i 2020 i Journal of Cellular Biochemistry. Undersøgelsen fastslår, at et naturligt stof, salidrosid, udviser kræftbekæmpende virkninger i BxPC-3-celler ved at regulere HIF-1α (hypoxiinducerbar faktor) og LOXL2-signalkaskaden.
Denne artikel i Biomedicine & Pharmacotherapy antyder, at ibrutinib kan anvendes som en effektiv strålefølsomhedsfremmende middel hos patienter med bugspytkirtelkræft. In vitro-undersøgelser i BxPC-3-celler indikerer, at det nedsætter BxPC3 EGFR-fosforylering og ekspressionen af pAKT samt nedstrømsgener, der opreguleres ved strålebehandling.
Chelidonin inducerer apoptose via GADD45a-p53-regulering i humane bugspytkirtelkræftceller
Denne undersøgelse i Integrative Cancer Therapies foreslår, at et naturprodukt, chelidonin, udøver apoptotisk aktivitet i humane bugspytkirtelceller BxPC-3 via regulering af BxPC3 p53- og GADD45a-signalering.
Ressourcer til BxPC-3-cellelinjen: Protokoller, videoer og mere
BxPC-3-cellelinjen har mange fascinerende fordele, der gør den velegnet til forskningsbrug. Mange online ressourcer om BxPC-3-cellelinjen nævner dens håndtering, vedligeholdelse og transfektionsprotokoller.
- BxPC3-transfektion: Denne video er en trin-for-trin-vejledning til at lære transfektionsprotokollen for BxPC-3-celler.
Dette afsnit af artiklen indeholder nogle links, der forklarer BxPC3-cellekulturprotokoller.
- BxPC3-cellekultur: Denne hjemmeside hjælper dig med at lære protokoller for subkultivering og håndtering af kryopræserverede og proliferative BxPC-3-kulturer.
Referencer
- Kim, Y., et al., Komparativ proteomisk profilering af cellelinjer fra duktalt adenokarcinom i bugspytkirtlen. Mol Cells, 2014. 37(12): s. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overekspression af laminin-5 gamma-2 fremmer tumorigenese af duktalt adenokarcinom i bugspytkirtlen gennem EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR-kaskaden. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): s. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus-frugtekstrakter reducerer levedygtigheden og inducerer apoptose i bugspytkirtelkræftceller in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: s. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-kræftpotentiale af Oxialis obtriangulata i bugspytkirtelkræftceller gennem regulering af den ERK/Src/STAT3-medierede vej. Molecules, 2020. 25(10): s. 2301.