Buněčná linie KG-1
BuňkyKG-1 představují lidskou leukemickou buněčnou linii, která se široce používá v biomedicínském výzkumu. Nabízejí rozmanité využití v imunologii, rakovině a toxikologickém výzkumu. Vědci tyto buňky využívají ke studiu mechanismů onemocnění a testování potenciálních terapií. V tomto článku naleznete ucelené informace o buněčné linii KG-1, které vám mohou pomoci při vaší práci. Zejména se bude zabývat:
- Obecné charakteristiky a původ buněčné linie KG-1
- Informace o kultivaci buněčné linie KG-1
- Buněčná linie KG-1: Výhody a omezení
- Aplikace buněk KG-1 ve výzkumu
- Publikace o buňkách KG-1
- Zdroje pro buněčnou linii KG-1: Protokoly, videa a další zdroje informací
1. Obecná charakteristika a původ buněčné linie KG-1
Původ buněčné linie a její obecné charakteristiky pomáhají výzkumným pracovníkům při rozhodování o jejím použití v jejich práci. Tyto informace můžete prozkoumat, než s ní začnete pracovat. Tato část článku se zabývá původem a charakteristikou makrofágů KG-1. Dozvíte se zde: Co jsou buňky KG-1? Co je buněčná linie KG-1a? Jaký je původ buněčné linie KG-1? Jaká je morfologie KG-1?
- KG-1 je buněčná linie podobná lymfoblastům odvozená z aspirátu kostní dřeně muže kavkazské rasy (59 let) s akutní myelogenní leukémií. Byla vytvořena Koefflerem a Goldem v roce 1978. Tyto buňky jsou převážně ve stadiu zrání promyelocytů nebo myeloblastů [1].
- Buňky KG-1 mají morfologii podobnou lymfoblastům.
- Karyotyp buněčné linie KG-1 vykazuje pseudodiploidní modální počet chromozomů.
KG-1 a KG-1a
KG-1a je podlinie rodičovských buněk KG-1. Vznikla po 35 pasážích buněčné linie KG1. Ve srovnání s buněčnou linií KG-1 je méně diferencovaná. Tato podlinie je navíc cytochemicky, morfologicky a funkčně méně zralá ve srovnání s mateřskou buněčnou linií (KG-1).
2. Informace o kultivaci buněčné linie KG-1
V této části článku budou uvedeny všechny nezbytné informace o kultivaci buněk KG-1, které vám mohou usnadnit práci. Dozvíte se zde: Jaká je doba zdvojení buněčné linie KG 1? Jaké jsou podmínky kultivace makrofágů KG-1? Jak se kultivují buňky KG-1?
Klíčové body pro kultivaci buněk KG-1
|
Doba zdvojení: |
Doba zdvojení KG-1 je přibližně 45 hodin. Může se však lišit v závislosti na podmínkách kultivace. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
Buňky KG-1 rostou v suspenzi. |
|
Hustota buněk: |
Optimální hustota buněk pro buněčnou linii KG1 je 1 až 3 x105 buněk/ml. Pro subkultivaci se buněčná suspenze přenese do sterilní zkumavky a odstředí. Sebrané buňky se poté doplní čerstvým médiem a opatrně resuspendují. Poté se buňky rozdělí do nových baněk a kultivují se při optimální hustotě buněk. Buňky lze rozdělit, když dosáhnou maximální hustoty 1 - 2 x106 buněk/ml. |
|
Růstové médium: |
Ke kultivaci buněk KG-1 se používá IMDM (Iscove's Modified Dulbecco's Medium) obsahující 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-Glutaminu, 1,0 mM pyruvátu sodného a 3,0 g/l NaHCO3. Médium by se mělo po třech dnech vyměnit. |
|
Růstové podmínky: |
Buněčná linie KG1 AML se kultivuje ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a přívodu 5 % CO2. |
|
Skladování: |
Zmrazené buňky se uchovávají v plynné fázi tekutého dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v elektrickém mrazáku s velmi nízkou teplotou, aby byla chráněna životaschopnost buněk. |
|
Postup zmrazování a médium: |
Pro zmrazování buněk KG-1 je vhodný CM-1 nebo CM-ACF. Buňky se zmrazují pomalým zmrazovacím procesem, aby byly chráněny před jakýmkoli šokem. Tato metoda umožňuje postupný pokles teploty o 1 °C za minutu. |
|
Postup rozmrazování: |
Buňky se rozmrazují v předehřáté vodní lázni při teplotě 37 °C, dokud nezůstane malý ledový chuchvalec. Rozmražené buňky se přidají k čerstvému médiu a odstředí se, aby se odstranily složky zmrazovacího média. Buněčná peleta se opatrně resuspenduje a přelije do nových baněk obsahujících růstové médium. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Pro udržování buněčných kultur KG-1 je nezbytná laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1. |
3. Buněčná linie KG-1: Výhody a omezení
Stejně jako jiné buněčné linie je i buněčná linie myeloidní leukemie KG-1 spojena s mnoha výhodami a omezeními. V tomto oddíle se dozvíme o některých významných z nich, které mohou být rozhodující při rozhodování o jejím použití ve vašem výzkumu.
Výhody
Hlavní výhody buněk KG-1 jsou:
-
Snadná kultivace
Buňky KG-1 se snadno kultivují ve výzkumných laboratořích a mají nekomplikované požadavky na kultivaci buněk. Jejich snadná údržba a růstové podmínky zajišťují dostupnost pro široké spektrum výzkumných pracovníků se základním vybavením pro kultivaci buněk.
-
Model akutní myeloidní leukémie (AML)
Buněčná linie KG-1 AML, odvozená od pacienta s akutní myeloidní leukémií (AML), slouží jako cenný nástroj pro zkoumání biologie AML a provádění výzkumu potenciálních terapeutik, který nabízí pohled na základní mechanismy tohoto onemocnění a strategie léčby.
omezení
Omezení spojená s buněčnou linií KG1 jsou následující:
-
In vitro model
Buňky KG-1 jsou cenným modelem in vitro pro výzkum AML; je však důležité si uvědomit, že nemusí plně kopírovat složitost onemocnění in vivo, slouží jako zjednodušený buněčný model, který nemusí zahrnovat všechny aspekty biologie AML.
4. Použití buněk KG-1 ve výzkumu
KG-1 nabízí několik slibných aplikací v biomedicínském výzkumu. Některé z důležitých výzkumných využití makrofágů KG1 zahrnují:
- Výzkum rakoviny: Buňky KG-1 byly odvozeny od pacienta s akutní myeloidní leukémií, a proto jsou považovány za cenný výzkumný nástroj pro zkoumání biologie AML. Vědci tyto buňky využívají ke studiu buněčných a molekulárních mechanismů, které řídí vývoj AML, růst a rezistenci vůči lékům. To zahrnuje také identifikaci a objevování nových biomarkerů, genetických mutací a signálních drah spojených s AML. Například studie provedená v roce 2019 zkoumala, že dlouhá nekódující RNA linc00239 usnadňuje rezistenci vůči doxorubicinu a maligní chování buněk akutní myeloidní leukemie KG-1. Další studie odhalila, že tato lncRNA aktivuje signalizaci PI3K/Akt/mTOR, která tyto účinky u buněk AML vyvolává [2].
- Toxikologie: Buněčná linie KG1 je široce využívána v toxikologickém výzkumu. Výzkumníci testují toxicitu a účinnost potenciálních terapeutických látek, včetně chemoterapeutik a cílených terapií, na buňkách KG1 myeloidní leukemie, aby identifikovali slibné kandidáty na léčiva pro budoucí preklinické a klinické hodnocení. Výzkum prováděný v roce 2018 analyzoval toxicitu nano-niosomů obsahujících doxorubicin na buněčné linii KG1 AML. Studie navrhla, že nano-niosomy jsou vhodným nosičem pro podávání léčiv, protože zvyšují účinnost léčby [3]. V dalším šetření vědci zkoumali léčebné účinky kopřivového čaje připraveného z listů rostliny Urtica dioica. Studie odhalila, že tento vodný extrakt z listů rostliny působí protinádorově na buňky akutní myeloidní leukémie KG-1 a U937 [4].
5. Publikace o buňkách KG-1
V této části článku je uvedeno několik zajímavých výzkumných publikací o buňkách KG-1.
Kvercetin senzibilizuje buňky lidské myeloidní leukemie KG-1 proti apoptóze vyvolané TRAILem
Tento článek byl publikován v časopise Journal of Cellular Physiology (2019). Studie navrhla, že sloučenina kvercetinu senzibilizuje buněčnou linii KG1 AML proti ligandu indukujícímu apoptózu související s TNF (TRAIL) a může zvýšit účinek cytotoxicity vyvolané TRAIL v buňkách.
KLF8 zvyšuje růst buněk akutní myeloidní leukemie a glykolýzu prostřednictvím dráhy AKT/mTOR
Tento článek v časopise Tropical Journal of Pharmaceutical Research (2022) navrhl, že downregulace transkripčního faktoru 8 podobného krüppelu potlačuje proliferaci a glykolýzu buněk AML a podporuje apoptózu prostřednictvím regulace signální dráhy AKT/mTOR.
Účinky sorafenibu a oxidu arsenitého na buněčné linie U937 a KG-1: Apoptóza nebo autofagie?
Tato studie v časopise Cell Journal (Yakhteh) (2020) zkoumala potenciální účinky oxidu arsenitého a sorafenibu na buňky U937 a KG-1.
Tato studie publikovaná v časopise Medical Oncology (2020) hodnotila OXPHOS a glykolýzu jako terapeutické cíle u buněčné linie AML KG-1.
V této publikaci o navrhování, vývoji a terapii léčiv z roku 2020 se navrhuje, aby sloučeniny kurkuminu a thalidomidu synergicky působily apoptoticky na buňky KG-1 prostřednictvím snížení exprese STAT3 a Bcl-xL.
6. Zdroje pro buněčnou linii KG-1: Zdroje: Protokoly, videa a další
Níže je uvedeno několik dostupných online zdrojů o buňkách KG-1.
- Subkultivace suspenzních buněk: Toto video popisuje protokol subkultivace suspenzních buněčných kultur, jako je KG-1.
Následující odkaz obsahuje protokol o kultivaci buněk KG-1:
- KG-1: Buněčná linie KG-1: Tato webová stránka obsahuje základní informace o buněčných kulturách buněčné linie KG-1. Obsahuje informace o médiích buněčné linie a protokoly pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferačními kulturami.
Odkazy
- Pelliccia, F., V. Ubertini a N. Bosco, Význam molekulárně cytogenetické analýzy před použitím buněčných linií ve výzkumu: KG-1a. Oncol Lett, 2012. 4(2): p. 237-240.
- Yang, Y., et al., Long non-codingRNA linc00239 promotes malignant behaviors and chemoresistance against doxorubicin partially via activation of the PI3K/Akt/mTOR pathway in acute myeloid leukaemia cells ( DlouhánekódujícíRNA linc00239 podporuje maligní chování a chemorezistenci vůči doxorubicinu částečně prostřednictvím aktivace dráhy PI3K/Akt/mTOR u buněk akutní myeloidní leukémie). Oncology Reports, 2019. 41(4): p. 2311-2320.
- Bahrami-Banan, F., et al. příprava a studium nano-niosomů obsahujících doxorubicin a hodnocení jejich toxicity na buněčné linii akutní myeloblastické leukemie KG-1. Payavard Salamat, 2018. 12(4): p. 309-323.
- Hodroj, M.H., et al., Kopřivový čaj inhibuje růst buněk akutní myeloidní leukemie in vitro podporou apoptózy. Nutrients, 2020. 12(9): p. 2629.