Endoteliální buňky lidské pupečníkové žíly (HUVEC)

HUVEC jsou primární endotelové buňky, které slouží jako klíčový nástroj v biomedicínském výzkumu. Pomáhají vědcům studovat angiogenezi, cévní biologii a nemoci, jako je ateroskleróza a rakovina. HUVEC se používají ke zkoumání chování endoteliálních buněk, mechanismů buněčné signalizace a testování léčiv, což nabízí cenné poznatky o potenciálních terapiích nebo léčbě kardiovaskulárních onemocnění a rakoviny. Slouží také jako modelový systém pro studie cévní biologie.

Tento článek obsahuje všechny základní informace, které potřebujete před prací s buňkami HUVEC. Zahrnuje:

  1. Původ a obecné vlastnosti buněk HUVEC
  2. Informace o kultivaci buněčné linie HUVEC
  3. Buněčnou linii HUVEC: Výhody a omezení
  4. Aplikace buněk HUVEC ve výzkumu
  5. Publikace s buňkami HUVEC
  6. Zdroje pro buněčnou linii HUVEC: Protokoly, videa a další zdroje informací

1. Původ a obecné vlastnosti buněk HUVECs

Znalost původu a obecných vlastností buněčné linie je klíčová při rozhodování o její vhodnosti pro vaši studii. Tato část vám pomůže dozvědět se tyto zásadní informace o endoteliálních buňkách HUVEC: K čemu se buňky HUVEC používají? Jaká je úplná podoba buněk HUVEC? Jaké jsou charakteristické vlastnosti HUVEC? Jaká je morfologie HUVEC? Jaký je průměr HUVEC? Jaká je velikost buněk Huvec?

  • Buňky HUVEC se získávají z endotelu lidské pupečníkové žíly.
  • Morfologie HUVEC je podobná endotelu. Obvykle mají polygonální tvar a kulaté jádro uprostřed.
  • Velikost buněk HUVEC je 17 μm v průměru.
  • Tyto endotelové buňky jsou diploidní. Mají modální počet chromozomů 46.

HUVEC TERT2

HUVEC TERT2 je imortalizovaná buněčná linie odvozená z primárních endoteliálních buněk lidské pupečníkové žíly (HUVEC). Byla vyvinuta zavedením genu pro lidskou telomerázovou reverzní transkriptázu (TERT) do genomu buněk HUVEC. Tato modifikace pomohla prodloužit jejich životnost v kultuře, což umožnilo provádět dlouhodobější experimenty bez omezení spojených s primárními HUVEC.

Jaký je rozdíl mezi HUVEC a HMEC-1?

Struktura a složitost endoteliálních buněčných linií HUVEC a HMEC-1 jsou srovnatelné. Buňky HMEC-1 však vykazují homogennější populaci než HUVEC v kontextu velikosti a zrnitosti buněk. To může snížit odchylky v experimentálních údajích.

Vysoce kvalitní mikroskopická cesta při několika zvětšeních - plynulý pohyb a soustředěné zkoumání skutečného vzorku lidské žíly.

2.informace o kultivaci buněčné linie HUVEC

Tato část článku je zaměřena na to, abyste získali důležité znalosti o kultivaci buněk HUVEC. To vám výrazně pomůže při práci s nimi. Najdete zde odpovědi na následující často kladené otázky: Jaká je doba zdvojení HUVEC? Jaká je hustota výsevu HUVEC? Kolik pasáží mají HUVEC? Co je buněčné médium HUVEC? Jak se kultivují HUVEC?

Klíčové body pro kultivaci buněk HUVEC

Doba zdvojení:

Doba zdvojení buněk HUVEC je zhruba 23,5 hodiny. Nicméně se může lišit v závislosti na podmínkách kultivace buněk a počtu pasáží.

Adherentní nebo v suspenzi:

HUVEC je adherentní buněčná linie. Buňky rostou a vytvářejí monovrstvy.

Poměr rozdělení:

Dělící poměr pro HUVEC je 1:2 až 1:4. Pro nasazení; buňky se promyjí fyziologickým roztokem 1x fosfátový pufr a přidá se k nim disociační roztok (Accutase) na 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Poté se přidá kultivační médium a oddělené buňky se odstředí. Supernatant se zlikviduje a buněčná peleta se opatrně resuspenduje. Buňky se dávkují do nové kultivační baňky pro růst.

Růstové médium:

Ke kultivaci buněk HUVEC se používá růstové médium pro endoteliální buňky. Médium se vyměňuje každé 2 až 3 dny. HUVEC lze použít až na 8-10 pasáží.

Růstové podmínky:

Lidská endoteliální buněčná linie (HUVEC) se udržuje ve zvlhčeném inkubátoru s 5 % CO2 při 37 °C.

Skladování:

HUVEC buňky se obvykle skladují při teplotě nižší než -150 °C v mrazničce s velmi nízkou teplotou nebo v plynné fázi tekutého dusíku. Tím je chráněna životaschopnost buněk po delší dobu.

Postup zmrazování a médium:

Pro uchování buněk HUVEC se doporučuje mrazicí médium CM-1 nebo CM-ACF. Obecně se doporučuje pomalý proces zmrazování, protože umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, což zabraňuje šoku buněk a zachovává jejich životaschopnost.

Proces rozmrazování:

Pro rozmrazení zmrazených buněk je umístěte do předehřáté vodní lázně o teplotě 37 °C na 40 až 60 sekund, dokud nezůstane jen malý shluk ledu. Poté do buněk přidejte čerstvé médium a odstřeďte. Tento krok je nutný k odstranění buněk, aby se odstranily veškeré zbytky zmrazovacího média. Resuspendujte buněčnou peletu a přeneste buňky do nové baňky s kultivačním médiem.

Úroveň biologické bezpečnosti:

Pro správnou manipulaci s buněčnými kulturami HUVEC je nutná laboratoř na úrovni biologické bezpečnosti 1.

Detailní mikroskopický pohled na endotelové buňky lidské pupečníkové žíly při různých hustotách a zvětšeních.

3. Výhody a omezení

Stejně jako jiné lidské buněčné linie mají i buňky HUVEC své výhody a omezení. V této části se budeme zabývat některými významnými, které významně ovlivňují jejich použití ve výzkumu.

Výhody

Hlavní výhody buněk HUVEC jsou:

  • Model endoteliálních buněk

    Vysoce relevantní modely pro studium angiogeneze, cévní biologie a onemocnění souvisejících s funkcí endotelu.

  • Snadná kultivace

    Relativně snadná izolace z lidských pupečníků. Nemají náročné požadavky na kultivaci buněk a lze je snadno udržovat ve výzkumných laboratořích.

Omezení

Omezení spojená s endoteliální buněčnou linií HUVEC jsou následující:

  • Omezená životnost

    HUVEC mají omezenou životnost, obvykle 8 až 10 pasáží, což je omezení pro dlouhodobé experimenty. S rostoucím počtem pasáží mohou podléhat senescenci.

4. Použití buněk HUVEC ve výzkumu

Buňky HUVEC mají významný potenciál pro různé aplikace v biomedicíně. V tomto článku upozorníme na některá důležitá využití buněk HUVEC ve výzkumu.

  • Studie kardiovaskulárních onemocnění: Buněčná linie HUVEC je cenným modelem endoteliálních buněk, a poskytuje tak vhled do mechanismů, které jsou základem kardiovaskulárních onemocnění, jako je ateroskleróza, trombóza a hypertenze. Výzkumníci využívají tyto buňky ke zkoumání mechanismů, které jsou základem endoteliální dysfunkce, oxidačního stresu a zánětu. Například studie provedená v roce 2020 použila HUVECs a zkoumala, že dlouhá nekódující RNA TTTY15 hraje klíčovou roli při zmírňování hypoxií zprostředkovaného poškození cévních endoteliálních buněk tím, že se zaměřuje na osu miRNA-186-5p [1].
  • Výzkum rakoviny: HUVEC jsou ideální pro studium cévní biologie. Proto se používají ke zkoumání nádorové angiogeneze a interakcí endoteliálních buněk. To pomáhá výzkumníkům pochopit, jak nádory získávají nadbytečné zásobování krví a jak se množí. Hui Wang a jeho kolegové například zjistili, že exozomy uvolňované buňkami orálního dlaždicobuněčného karcinomu (OSCC) zvyšují hladinu miRNA-210-3p a snižují expresi efrinu A3 v buňkách HUVEC a podporují tvorbu trubic prostřednictvím regulace kaskády PI3K/AKT, jak bylo potvrzeno pomocí testu tvorby trubic HUVEC [2].
  • Testování léčiv: Endoteliální buňky HUVEC se široce používají k testování léčiv. Výzkumníci mohou pomocí HUVEC in vitro hodnotit účinnost, toxicitu a potenciální vedlejší účinky přírodních sloučenin, nanočástic a dalších terapeutických látek. Například studie hodnotila toxicitu extraktu Rheum ribes syntetizovaných nanočástic stříbra pomocí buněk HUVEC [3].

5. Publikace s buňkami HUVEC

V této části článku bude uvedeno několik často citovaných a zajímavých výzkumných publikací s buňkami HUVEC.

Nový mechanismus ochrany endoteliálních buněk lidské pupečníkové žíly (HUVEC) před oxidačním poškozením vyvolaným H2O2 pomocí kyseliny gama-aminomáselné (GABA)

Tato studie byla publikována v časopise Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology (2019). Uvádí, že kyselina gama-aminomáselná (GABA), neurotransmiter, inhibuje oxidační stresvyvolanýH2O2 v buňkách HUVEC; mohla by tak být účinným farmakologickým prostředkem proti kardiovaskulárním onemocněním souvisejícím s oxidačním poškozením.

Estrogen snižuje expresi gp130 v HUVEC regulací ADAM10 a ADAM17 prostřednictvím estrogenového receptoru

Tato studie v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2020) zkoumala, jak estrogen reguluje přenašeč signálu, glykoprotein130 (gp130) v buňkách HUVEC.

Tuhost substrátu reguluje migraci a potenciál angiogeneze buněk A549 a HUVEC

Tento výzkumný článek v časopise Journal of Cellular Physiology (2017) zkoumal vliv různé tuhosti substrátu na migraci a angiogenezi endoteliálních buněk (A549 a HUVEC). K vyhodnocení těchto účinků provedli testy migrace HUVEC a angiogeneze HUVEC.

Lysozomální ukládání nanočástic oxidu měďnatého vyvolává smrt buněk HUVEC

Tento výzkum v časopise Biomaterials (2018) zkoumá potenciální mechanismy zodpovědné za toxicitu nanočástic oxidu měďnatého v cévních endoteliálních buňkách.

Kvercetin inhibuje TNF-α indukovanou apoptózu a zánět HUVEC prostřednictvím downregulace signální dráhy NF-kB a AP-1 in vitro

Tato studie v časopise Medicine (2020) navrhla, že přírodní sloučenina kvercetin potlačuje apoptózu a zánět HUVEC zprostředkovaný TNF-alfa regulací signálních drah AP-1 a NF-kB.

6. Zdroje pro buněčnou linii HUVEC: Zdroje: Protokoly, videa a další

Níže je uvedeno několik dostupných online zdrojů o buňkách HUVEC.

  • Transfekce HUVEC: Tento odkaz na webové stránky poskytne komplexní informace o transfekci HUVEC. Obsahuje například informace o transfekčních činidlech a protokol pro in vitro transfekci HUVEC.

Následující odkaz obsahuje protokol o kultivaci buněk HUVEC.

  • Buněčná kultura HUVEC: Tento dokument vám pomůže seznámit se s protokoly buněčné kultury HUVEC pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými kulturami.

Odkazy

  1. Zheng, J., et al., LncRNA TTTY15 reguluje hypoxií indukované poškození cévních endoteliálních buněk prostřednictvím cílení miR-186-5p u kardiovaskulárních onemocnění. European Review for Medical & Pharmacological Sciences, 2020. 24(6).
  2. Wang, H., et al., OSCC exosomy regulují miR-210-3p cílený na EFNA3 k podpoře angiogeneze karcinomu dutiny ústní prostřednictvím dráhy PI3K/AKT. BioMed research international, 2020. 2020.
  3. Unal, İ. a S. Egri, Biosyntéza nanočástic stříbra pomocí vodného extraktu Rheum ribes, charakterizace a hodnocení jeho toxicity na HUVECs a Artemia salina. Anorganická a nanokovová chemie, 2022: s. 1-14.

Zjistili jsme, že se nacházíte v jiné zemi nebo používáte jiný jazyk prohlížeče, než je aktuálně zvolený. Chcete přijmout navrhované nastavení?

Zavřít