Buňky SW-620 - vliv na výzkum a experimenty s rakovinou tlustého střeva
BuňkySW-620 představují buněčnou linii lidského kolorektálního karcinomu stadia Dukes C. Mají vysoký tumorigenní a metastatický potenciál. Proto se hojně využívají v onkologických a toxikologických studiích. Tento článek se zabývá základními aspekty buněčné linie SW-620 pro rakovinu tlustého střeva.
Původ a obecná charakteristika buněk SW-620
Původ a obecné charakteristiky jsou základními informacemi o buněčné linii. Jejich předchozí znalost je pro výzkumné pracovníky, kteří zvažují její zapojení do své výzkumné studie, zásadní. V této části článku budou vysvětleny klíčové vlastnosti a původ buněčné linie SW-620. Dozvíte se především následující informace: Co je buněčná linie SW620? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie SW620? Jaký je původ linie SW620? Jaká je velikost buněk SW-640? A jaký je rozdíl mezi SW620 a SW480?
- SW-620, buněčná linie kolorektálního karcinomu, pochází z mediatizované léze lymfatických uzlin 51letého muže kavkazské rasy s adenokarcinomem tlustého střeva [1]. Tuto buněčnou linii deponoval A. Leibovitz se spolupracovníky.
- Buňky SW-620 mají epiteliální morfologii. Skládá se rovněž z malých kulatých a bipolárních buněk, které odpovídají mikrovilům.
- Velikost buněk SW-620 je 14,4 ± 0,3 μm v průměru.
- Tyto buňky rakoviny tlustého střeva mají hyperdiploidní karyotyp. Modální počet chromozomů u buněk SW-620 je 50, který se může pohybovat od 45 do 53.
SW-480 vs SW-620
SW480 a SW620 jsou buněčné linie kolorektálního karcinomu. SW-480 byla odvozena z primárního nádoru, zatímco SW-620 byla vytvořena z metastáz lymfatické uzliny. Kromě toho se xenografty vytvořené z těchto buněčných linií navzájem liší. Xenografty SW620 vytvářejí nádorové buněčné pláty, zatímco xenografty SW480 tvoří žlázovité struktury [2]. Obě buněčné linie mají shodné mutační profily.
Buňky SW-620: Informace o kultivaci
Základní koncepce kultivace buněčné linie je nezbytná, protože může vést k vhodnému zacházení a údržbě. V této části je uvedeno několik klíčových bodů pro kultivaci SW-620, které vám mohou pomoci: Co je médium SW-620? Jaká je doba zdvojení SW-620? Jak se kultivují buňky SW-620?
Klíčové body pro kultivaci buněk SW-620
|
Doba zdvojení: |
Doba zdvojení SW-620 se pohybuje od 20 do 26 hodin. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
Buněčná linie SW-620 je adherentní. Buňky tvoří monovrstvy na povrchu kultivační nádoby. |
|
Poměr subkultivace: |
Adherentní buňky se oplachují fosfátovým pufrem (1X) bez hořčíku a vápníku. Poté se přidá pasážovací roztok Accutase a buňky se inkubují při pokojové teplotě po dobu 8 až 10 minut. Přidá se čerstvé médium a buňky se odstředí. Poté se sklizené buňky opatrně resuspendují v růstovém médiu a rozdělí se do nových baněk pro růst. |
|
Růstové médium: |
Pro ideální růst buněk SW-620 se používá médium DMEM doplněné 10 % fetálního hovězího séra, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-Glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Médium by se mělo obnovovat dvakrát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
Buňky karcinomu tlustého střeva SW-620 se kultivují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a 5 %CO2. |
|
Skladování: |
Po zmrazení se buňky SW-620 skladují při teplotě nižší než -150 °C v mrazničkách s velmi nízkou teplotou nebo v plynné fázi tekutého dusíku. |
|
Postup zmrazování a médium: |
CM-1 nebo CM-ACF je ideálním mrazicím médiem pro buňky SW-620. Ke zmrazení buněk SW-620 se používá pomalý proces zmrazování. Umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, čímž chrání životaschopnost buněk. |
|
Proces rozmrazování: |
Zmrazené buňky SW-620 se rozmrazují ve vodní lázni nastavené na 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Po rozmrazení se přidá kultivační médium a buňky se odstředí, aby se odstranily prvky zmrazovacího média. Poté se získaná buněčná peleta resuspenduje v růstovém médiu a buňky se přelijí do nové baňky pro růst. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Pro manipulaci s kulturami SW-620 je nutná laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1 (BSL-1). |
Výhody buněk SW-620
Výhody
- Modelování karcinomu tlustého střeva: buňky SW-620 slouží jako kritický model karcinomu tlustého střeva, který umožňuje důkladné studium mechanismů nádoru a metastáz, zejména v xenograftových modelech.
- Výzkum a terapie rakoviny: Tyto buňky usnadňují zkoumání biologie rakoviny, účinnosti chemoterapie a mechanismů buněčné smrti, včetně anoikis.
- Exprese CD133: Exprese CD133 v buňkách SW-620 umožňuje nahlédnout do biologie nádorových kmenových buněk a jejich důsledků pro nádorové bujení a rezistenci na léčbu.
- Aplikace průtokové cytometrie: Průtoková cytometrie: Analýza těchto buněk pomocí průtokové cytometrie umožňuje hodnotit buněčné populace, úroveň apoptózy a proliferaci.
Výzkumné aplikace buněčné linie SW-620
Níže jsou popsány oblasti výzkumu, v nichž buňky SW-620 nacházejí slibné využití:
- Výzkum rakoviny: SW-620 je neocenitelným buněčným modelem pro studium biologie kolorektálního karcinomu. Vědci tento in vitro model využívají ke zkoumání molekulárních mechanismů, které řídí růst, invazi a migraci nádorových buněk. Kromě toho jej lze využít ke studiu mutací buněčné linie SW620, tj. p53, APC a KRAS. Výzkum prováděný v roce 2021 zkoumal vliv mutace KRAS buněčné linie SW620 na citlivost nového léčiva FL118. Pozorovali, že nadměrná exprese KRAS zvyšuje apoptózu kolorektálních buněk vyvolanou FL118, zatímco její umlčení ji snižuje. Tyto výsledky mohou pomoci předpovědět použití FL118 u pacientů s karcinomem tlustého střeva s mutací KRAS [3].
- Screening a vývoj léčiv: Buněčná linie SW-620 se široce používá ke screeningu a testování potenciálních kandidátů na léčiva proti karcinomu tlustého střeva. Vědci využívají tyto buňky k hodnocení cytotoxicity a účinnosti léčiv, což může vést k vývoji cílených léčebných postupů. Například studie zkoumala antikolorektální rakovinu jednotlivých sloučenin esenciálních olejů skořice a hřebíčku pomocí buněčné linie SW-620 [4].
- Studie metastáz: Vzhledem k vysokému metastatickému potenciálu lze buňky SW-620 použít ke zkoumání molekulárních drah, které jsou základem metastazování nádorových buněk. Například Zhou Yang a jeho kolegové zjistili roli genu GRHL2 (Grainy-head-like 2) v progresi a metastazování rakoviny tlustého střeva. Navrhli, že exprese genu GRHL2 inhibuje progresi a metastazování kolorektálního karcinomu prostřednictvím potlačení epiteliálně-mezenchymálního přechodu (EMT) [5].
Zabezpečení buněčné linie SW620
Buňky SW-620: Publikace
V této části najdete některé zajímavé a nejcitovanější výzkumné publikace o buňkách SW-620.
Tato studie publikovaná v časopise Molecular Carcinogenesis (2017) navrhla, že léčba polyfenolem, urolitinem A, indukuje autofagii v buněčné linii kolorektálního karcinomu SW620. Rovněž potlačil metastazování nádorových buněk.
Tento článek v časopise Oncology Letters (2018) zkoumal antimetastatický potenciál tetrandrinu, bis-benzylisochinolinového alkaloidu, za použití buněk SW-620.
CDCA3 podporuje proliferaci buněk aktivací signální dráhy NF-κB/cyklin D1 u kolorektálního karcinomu
Tento článek byl publikován v časopise Biochemical and Biophysical Research Communications (2018). Navrhuje, že gen CDCA3 (Cell division cycle associated 3) je v buňkách kolorektálního karcinomu regulován a podporuje jejich proliferaci prostřednictvím aktivace signalizace NF-κB.
Studie v časopise International Journal of Molecular Sciences (2021) zkoumala synergický účinek bispecifické protilátky (ABL001) a chemoterapeutik na progresi nádoru u xenograftů SW620.
Tento článek byl publikován v časopise Cells (2018). V tomto článku byla zkoumána protinádorová aktivita extraktu Bacopa monnieri, Bacopaside II, u buněk kolorektálního karcinomu SW-620 a dalších buněk.
Zdroje pro buněčnou linii SW-620: Další zdroje: protokoly, videa a další
Níže je uvedeno několik online zdrojů týkajících se buněk karcinomu tlustého střeva SW-620.
- Transfekce SW-620: Tento článek stručně popisuje protokol pro stabilní transfekci buněčné linie SW-620.
Následující odkaz obsahuje protokol kultivace buněk SW620.
- Protokol o kultivaci buněk SW-620: Tento odkaz poskytne základní informace o buněčné linii SW-620. Pomůže vám také naučit se protokol pro subkultivaci buněk SW-620 a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferujícími kulturami SW620.
- Protokoly buněčných kultur: Toto video je skvělým zdrojem informací o protokolech pasážování, zmrazování a rozmrazování adherentních buněk.
Často kladené otázky o buňkách SW620
Odkazy
- Siekmann, W., et al., Vliv lidokainu a ropivakainu na primární (SW480) a metastatické (SW620) buněčné linie karcinomu tlustého střeva. Oncol Lett, 2019. 18(1): p. 395-401.
- Hewitt, R.E., a další, Validace modelu progrese rakoviny tlustého střeva. J Pathol, 2000. 192(4): p. 446-54.
- Thangaiyan, R., et al., Kras mutation subtypes distinctly affect colorectal cancer cell sensitivity to FL118, a novel inhibitor of survivin, Mcl-1, XIAP, cIAP2 and MdmX. American Journal of Translational Research, 2021. 13(7): p. 7458.
- Petrocelli, G., a další, Molekuly přítomné v rostlinných esenciálních olejích pro prevenci a léčbu kolorektálního karcinomu (CRC). Molecules, 2021: Molecules, 2021. 26(4): p. 885.
- Yang, Z., et al., GRHL2 inhibuje progresi a metastazování kolorektálního karcinomu prostřednictvím potlačení epiteliálně-mezenchymálního přechodu. Cancer biology & therapy, 2019. 20(9): p. 1195-1205.