Buňky NCI-H460 - Navigace ve výzkumu rakoviny plic pomocí poznatků o buňkách NCI-H460
NCI-H460 jsou lidské buňky nemalobuněčného karcinomu plic, které se běžně používají ve výzkumu karcinomu plic a v toxikologii. Tato buněčná linie je cenným nástrojem pro studium různých aspektů biologie rakoviny zahrnujících vývoj nádoru, růst a rezistenci vůči lékům. Buňky NCI-H460 jsou navíc vhodným modelem pro vývoj protinádorových činidel.
Buňky NCI-H460: Původ a obecná charakteristika
Původ a obecné vlastnosti buněčné linie významně přispívají k jejímu využití ve výzkumu. Tato část článku vám pomůže seznámit se s původem a hlavními vlastnostmi buněk NCI-H460 pro rakovinu plic. Dozvíte se: Co jsou buňky NCI-H460? Jaký je typ buněčné linie NCI-H460? Jaká je morfologie NCI-H460?
- Buněčná linie NCI-H460 pochází z pleurálního výpotku evropského muže s velkobuněčným karcinomem plic. Byla založena v roce 1982 A. F. Gazdarem a jeho spolupracovníky.
- Buňky plicního karcinomu NCI-H460 mají epiteliální morfologii.
- NCI-H460 je nádorová buněčná linie s hypotriploidním karyotypem. Modální počet chromozomů těchto buněk je 57. Buňky NCI-H460 mají také modální počet chromozomů 58 ve srovnatelné míře.
- Tyto buňky plicního karcinomu mají mnoho mutací NCI-NCI-H460 jako nemalobuněčné plicní nádory, například NCI-H460 mutaci KRAS, které se podílejí na proliferaci, růstu, invazi a metastazování buněk.
Informace o kultivaci buněk NCI-H460
Pro správné zacházení s buněčnou linií NCI-H460 a její údržbu byste měli znát následující klíčové body. Budou vás informovat o době zdvojení NCI-H460, kultivačním médiu NCI-H460 a základních postupech kultivace buněk NCI-H460 pro rakovinu plic.
Klíčové body pro kultivaci buněk NCI-H460
|
Doba zdvojení: |
Doba zdvojení buněk NCI-H460 je přibližně 33 hodin. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
NCI-H460 jsou adherentní. |
|
Poměr subkultivace: |
Doporučený poměr dělení pro buněčnou linii NCI-H460 je 1:2 a 1:4. Po odstranění starého média se adherentní buňky opláchnou 1 x fyziologickým roztokem fosfátového pufru. Poté se buňky inkubují s pasážovacím roztokem Accutase po dobu 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Disociované buňky se resuspendují v kultivačním médiu a odstředí se. Sklizené buňky se opět resuspendují a přelijí do nové baňky pro kultivaci. |
|
Kultivační médium: |
Jako kultivační médium pro NCI-H460 se používá RPMI 1640. Je doplněno 10% fetálním hovězím sérem, 2,1 mM stabilním glutaminem a 2,0 g/l NaHCO3. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
NCI-H460 se udržuje při teplotě 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s trvalým přívodem 5 % CO2. |
|
Skladování: |
Buňky karcinomu plic NCI-H460 lze dlouhodobě skladovat v plynné fázi tekutého dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v elektrické mrazničce s velmi nízkou teplotou. |
|
Proces zmrazování a médium: |
Ke zmrazení a skladování buněk NCI-H460 se používá médium CM-1 nebo CM-ACF. Pro ochranu maximální životaschopnosti buněk se doporučuje pomalý způsob zmrazování. |
|
Postup rozmrazování: |
Zmrazené buňky NCI-H460 se rozmrazují v předehřáté vodní lázni (při teplotě 37 °C) po dobu 40 až 60 sekund, dokud nezůstane malý ledový chuchvalec. Rozmražené buňky se přidají s čerstvým médiem a odstředí se, aby se odstranily složky zmrazovacího média. Odebraná buněčná peleta se znovu resuspenduje a buňky se rozdělí do nových baněk obsahujících médium pro růst. Uchycení buněk NCI-H460 na povrchu baňky může trvat téměř 24 hodin. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
S buňkami NCI-H460 karcinomu plic se manipuluje a jsou udržovány v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1. |
Výhody a nevýhody buněk NCI-H460
NCI-H460 je široce používaná buněčná linie ve výzkumu rakoviny plic. Tento oddíl se zabývá obecnými výhodami a nevýhodami souvisejícími s buňkami NCI-H460 pro rakovinu plic.
Výhody
Výhody buněčné linie nemalobuněčného karcinomu plic NCI-H460 jsou následující:
-
Nádorový původ
Buněčná linie NCI-H460 byla odvozena od pacienta s velkobuněčným karcinomem plic, který reprezentuje tento konkrétní typ rakoviny plic. Používá se jako model pro studium biologie rakoviny plic a vývoj nových a účinných léčebných postupů. Buňky NCI-H460 mají nádorový potenciál a lze je aplikovat imunodeficitním myším a vytvořit tak in vivo nádorové modely pro studium růstu nádorů, jejich vývoje a účinnosti potenciálních léčiv.
-
Vysoká míra proliferace
NCI-H460 vykazuje vyšší rychlost růstu než jiné buněčné linie nemalobuněčného karcinomu plic, například A549. Tato výhoda zvyšuje jejich dostupnost a pomáhá výzkumníkům provádět reprodukovatelné a časově náročné experimenty.
Nevýhody
Nevýhody spojené s buňkami karcinomu plic NCI-H460 jsou následující:
-
Homogenita
Buňky NCI-H460 jsou homogenní, protože byly získány z nádoru jednoho pacienta. Proto obecně postrádají komplexnost a heterogenitu pozorovanou v nádorech pacientů.
Výzkumné využití buněk NCI-H460
Buňky NCI-H460 pro karcinom plic se hojně používají ve studiích týkajících se karcinomu plic. Zde jsou uvedeny některé z důležitých výzkumných aplikací buněk NCI-H460:
- Výzkum rakoviny plic: Buňky NCI-H460 jsou neocenitelným modelem pro zkoumání buněčných a molekulárních mechanismů, které se podílejí na vývoji, růstu a metastazování nádorů. Kromě toho se používají ke studiu nezbytných signálních drah, molekulárních cílů a různých genetických mutací spojených s progresí rakoviny plic. Na buňkách NCI-H460 bylo provedeno několik studií, které tyto faktory účinně studují. Studie provedená v roce 2019 navrhla, že nadměrně exprimovaný nukleární všudypřítomný kasein a substrát cyklin-dependentních kináz (NUCKS) se podílí na růstu nádorových buněk prostřednictvím regulace signální dráhy PI3K/AKT [1]. Podobně studie in vitro a in vivo využívala buňky NCI-H460 ke studiu úlohy genu eIF4E. Výsledky ukázaly, že gen eIF4E se podílí na růstu plicního karcinomu a angiogenezi a lze se na něj zaměřit při vývoji slibných léků proti rakovině plic [2].
- Objevování a vývoj léčiv: NCI-H460, buněčná linie lidského karcinomu plic, se široce používá při objevování a vývoji léčiv. Vědci tyto buňky používají ke zkoumání toxicity a účinnosti nových kandidátů na léčiva, cílených terapií a léčby zaměřené především na mutace KRAS v NCI-H460. Studie provedená Haoyue Hu a jeho kolegy v roce 2023 využívala buňky NCI-H460 ke studiu protinádorových účinků léčiva anlotinib. Výsledky ukázaly, že anlotinib částečně ovlivňuje růst buněk plicního karcinomu s mutací KRAS inhibicí signalizační kaskády MEK/ERK [3]. Podobně byla na antiproliferační a proapoptotické aktivity testována fenolická sloučenina, kyselina karnosová, s použitím buněk NCI-H460 [4].
- Rezistence vůči léčivům: Buněčná linie NCI-H460 je ideální pro studium mechanismu rezistence plicního karcinomu vůči lékům. Vědci tyto buňky používají k vývoji modelů lékové rezistence, aby identifikovali základní geny, molekulární faktory a signální dráhy. Například studie vyvinula buňky NCI-H460 rezistentní k pemetrexedu, multitargetovému antifolátovému činidlu, za účelem studia základních molekulárních mechanismů rezistence k pemetrexedu u buněk nemalobuněčného karcinomu plic [5].
Zakupte si buněčnou linii NCI-H460: Brána k výzkumu rakoviny plic
Výzkumné publikace s buňkami NCI-H460
Zde je několik zajímavých výzkumných publikací o buněčné linii plicního karcinomu NCI-H460.
Tato studie v časopise Molecules (2023) navrhla, že přírodní α-1,6-glukan, BBWPW, z černých fazolí inhibuje proliferaci buněk NCI-H460 prostřednictvím regulace dráhy PI3K/AKT/MAPK.
Tento článek v časopise Phytomedicine (2019) studoval, že dioscin-6′-O-acetát, nová přírodní sloučenina, působí antiproliferačně na buňky rakoviny plic NCI-H460.
miRNA-425-5p zvyšuje růst rakoviny plic prostřednictvím signální osy PTEN/PI3K/AKT
Výzkum BMC Pulmonary Medicine (2020) uvádí, že mikroRNA-425-5p zvyšuje nádorové bujení karcinomu plic prostřednictvím dráhy PTEN/PI3K/AKT.
Tento článek v časopise Molecular Medicine Reports (2017) navrhl protinádorový potenciál a základní mechanismy sloučeniny chinalizarinu u buněk NCI-H460 a dalších buněk rakoviny plic.
Tento výzkum v časopise Food and Function (2019) poukazuje na potenciální protirakovinný účinek extraktu z Eucalyptus globulus labill. s využitím buněk NCI-H460. Zjištění ukázala, že rostlinný extrakt tyto účinky vykazuje zvýšením exprese p53 u NCI-H460 a úpravou profilu buněčného cyklu.
Zdroje pro buněčnou linii NCI-H460: Další zdroje: protokoly, videa a další
Zde je několik online zdrojů, které se týkají buněk rakoviny plic NCI-H460.
- Transfekce buněk NCI-H460: Tento videonávod je průvodcem krok za krokem pro transfekci buněk NCI-H460 plazmidovou DNA.
Následující odkazy obsahují nezbytné informace o buněčných kulturách pro buňky H460.
- Buňky NCI-H460: Tyto webové stránky poskytují důležité informace o médiích pro buňky NCI-H460, subkultivaci, zmrazování a rozmrazování.
- Pasážování buněk NCI-H460: Tento dokument vám poskytne informace o pasážování a subkultivaci buněčné linie NCI-H460. Kromě toho vám také pomůže seznámit se s transfekčním protokolem pro buňky NCI-H460.
Zkoumání buněčné linie NCI-H460: Často kladené otázky a poznatky
Odkazy
- Hu, C., et al., NUCKS podporuje proliferaci, migraci a invazi buněk rakoviny plic prostřednictvím signální dráhy Pi3k/Akt. Clinical and Investigative Medicine, 2021. 44(2): p. E55-61.
- Qi, X., et al, EGPI-1, nový inhibitor interakce eIF4E/eIF4G, inhibuje růst buněk rakoviny plic a angiogenezi prostřednictvím signální dráhy Ras/MNK/ERK/eIF4E. Chemicko-biologické interakce, 2022. 352: p. 109773.
- Hu, H., a další, Anlotinib působí protinádorově na buňky karcinomu plic s mutací KRAS prostřednictvím potlačení dráhy MEK/ERK. Cancer Management and Research, 2020: s. 3579-3587.
- Corveloni, A.C., et al., Carnosic acid exhibits antiproliferative and proapoptotic effects in tumoral NCI-H460 and nontumoral IMR-90 lung cells. Journal of Toxicology and Environmental Health, část A, 2020. 83(10): p. 412-421.
- Xu, Y.-L. a další, Vytvoření a charakterizace buněk NCI-H460/PMT rezistentních vůči pemetrexedu. Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry (dříve Current Medicinal Chemistry-Anti-Cancer Agents), 2019. 19(6): p. 731-739.