Buněčná linie MX-1

MX-1 je buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu odvozená z modelu xenotransplantátu rakoviny prsu u athymických myší. Buňky lidského adenokarcinomu prsu byly izolovány z nádoru prsu 29leté ženy kavkazského původu. Buňky MX-1 představují trojnásobně negativní karcinom prsu (TNBC) a jsou široce využívány pro výzkum lékové rezistence, buněčné signalizace, mechanismů reakce na léky atd.

Původ a obecné informace o buňkách MX-1

Než začnete s touto buněčnou linií pracovat, měli byste se seznámit s jejími základními vlastnostmi. Projdeme si téměř všechny obecné informace týkající se buněčné linie MX-1.

Nesmrtelná buněčná linie MX-1 je tumorigenní buněčná linie získaná z xenotransplantátu nádoru. Buňky MX-1 jsou považovány za typ trojnásobně negativního karcinomu prsu (TNBC) [1]. Navíc jsou tyto buňky negativní na estrogenové receptory a p53, protože tyto geny nevyjadřují.

Buňky MX-1 – modelový systém pro trojnásobně negativní karcinom prsu

Podmínky kultivace buněčné linie MX-1 nejsou náročné. Tyto buňky lze snadno množit a využívat v různých výzkumných laboratořích pro studie transfekce. Metoda přechodné transfekce běžně slouží ke studiu základních buněčných mechanismů a vzorců genové exprese v této buněčné linii [2, 3].

Tato buněčná linie představuje spolehlivý modelový systém pro karcinomy prsu. Lze ji využít k pochopení molekulárních mechanismů stojících za progresí onemocnění a k screeningu a vývoji léčiv pro boj s touto chorobou. Konkrétněji řečeno, lidská buněčná linie adenokarcinomu prsu MX-1 může být alternativou k buňkám TNBC, jelikož je negativní na estrogenové receptory [4].

Vydáno: 2023 | Poslední revize: květen 2026

Buněčná linie MX-1: Informace o kultivaci

• Doba zdvojnásobení: Doba zdvojnásobení populace buněk INS-1 je přibližně 44 hodin.
• Adherentní nebo v suspenzi: Buňky INS-1 rostou jak v suspenzi, tak v adherentní formě.
• Poměr subkultivace: Buňky INS-1 se subkultivují v poměru 1:3. Stručně řečeno, buňky v suspenzi se odeberou. Adhezivní buňky se propláchnou PBS a inkubují s roztokem Accutase. Po odloučení se k buňkám přidá čerstvé médium. Následně se jak buňky v suspenzi, tak adhezivní buňky odstředí a shromáždí. Buňky se opatrně resuspendují a rozdělí do nových lahví pro růst.
• Růstové médium: K kultivaci buněčné linie INS-1 z inzulinomu krysy se používá RPMI 1640. Médium je doplněno 10 % tepelně inaktivovaným fetálním bovinním sérem, 2,1 mM stabilním glutaminem, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO₃ a 1 mM pyruvátem sodným.
• Podmínky kultivace: Buňky INS-1 se udržují ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na teplotu 37 °C s nepřetržitým přívodem 5 % CO₂.
• Skladování: Beta buňky INS-1 lze dlouhodobě skladovat v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě pod -150 °C v elektrickém mrazáku.
• Proces zmrazování a médium: K pomalému zmrazování buněk INS-1 se používají média CM-1 nebo CM-ACF. Tento postup umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, aby byla zachována životaschopnost buněk.
• Proces rozmrazování: Zmrazené buňky INS-1 se rozmrazují ve vodní lázni předem nastavené na teplotu 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Po rozmrazení se do buněk přidá čerstvé médium a buňky se přímo přelijí do nové baňky pro růst. Po 24 hodinách se médium vymění, aby se odstranily složky zmrazeného média.
• Úroveň biologické bezpečnosti: K kultivaci buněk INS-1 z inzulinomu krysy je nutná laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Buňky MX-1: Využití ve výzkumu

Tato buněčná linie MX-1 lidského adenokarcinomu prsu se běžně používá ve studiích rakoviny prsu namísto buněk, jako jsou MDA-MB-231 nebo MCF-7. Zde je několik specifických aplikací této buněčné linie ve výzkumu rakoviny.  

Mechanismy lékové rezistence

Buňky MX-1 se používají ke studiu molekulárních faktorů zprostředkujících vývoj rezistence vůči lékům na rakovinu prsu. Studie široce využívají buňky MX-1 k vytvoření modelů rezistence vůči lékům. Studie publikovaná v roce 2021 popsala využití buněk MX-1 k vytvoření buněčné linie rakoviny prsu rezistentní na doxorubicin. Vyvinutý buněčný model potvrdil zapojení ABC transportéru ABCB1 a epiteliálně-mezenchymální transformace (EMT) do získání chemorezistence [5].

Exprese genů/signální dráhy buněk

Buněčnou linii MX-1 lze dočasně transfekovat za účelem objasnění vzorců genové exprese a buněčných signálních drah. Ve studiích byly buňky MX-1 použity pro transfekci shRNA (krátká vlásenková RNA) a nekódující RNA za účelem zkoumání jejich vlivu na proliferaci a růst buněk rakoviny prsu. Dále jsou objasňovány související signální dráhy genů [2, 6].

Screening potenciálních inhibitorů

Buňky MX-1 lze využít ke screeningu potenciálních léčiv proti rakovině prsu, jelikož napodobují mikroprostředí rakovinných buněk. Jedna výzkumná studie prokázala terapeutickou aktivitu vinorelbinu, toxinu mikrotubulů, který v buňkách MX-1 vyvolal buněčnou smrt a polyploidii [4].

Objednejte si buněčnou linii MX-1 ještě dnes

Zdroje k buněčné linii MX-1: protokoly, videa a další

Zdroje týkající se metod kultivace a transfekce jsou omezené, ale shromáždili jsme pro vás co nejvíce informací.

Protokoly pro kultivaci buněk

Buňky MX-1 se používají v mnoha studiích zaměřených na analýzu přechodné transfekce. Zde uvádíme několik zdrojů, které vám pomohou s protokoly transfekce.

• Transfekce buněk MX-1: Tato publikace popisuje protokol pro transfekci siRNA v buňkách MX-1 za účelem vývoje modelu genového knock-outu.
• Transfekce savčích buněk: Tento článek obsahuje všechny podstatné informace o metodách transfekce používaných u savčích buněčných linií.

Doufáme, že vám tento článek poskytl cenné poznatky o buněčné linii MX-1 a že jste získali lepší přehled o tom, jak tyto buňky kultivovat, udržovat a využívat ve svém výzkumu. Pokud máte zájem pracovat s buněčnou linií MX-1, neváhejte si ji u nás objednat a nastartujte tak svou výzkumnou cestu!

Často kladené otázky o buněčné linii karcinomu prsu MX-1

Literatura

1. Stefanski, C.D. a J.R. Prosperi, Boj proti rezistenci na CHK1 u trojnásobně negativního karcinomu prsu: inhibice EGFR jako potenciální kombinovaná terapie. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): s. 229.
2. Vasiyani, H. a kol., Analog cGAMP, c-di-AMP, aktivuje dráhu buněčné smrti zprostředkovanou STINGem v buňkách karcinomu prsu negativním na estrogenové receptory. Apoptosis, 2021. 26: s. 293–306.
3. Xiang, S., et al., Proteomická analýza vlivu proteinu podobného inhibitoru apoptózy 2 na proliferaci buněk karcinomu prsu. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): s. 1–11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa a J. Magae, Vinorelbin, toxin mikrotubulů, indukuje apoptózu a polyploidii v MX-1, lidské buněčné linii trojnásobně negativního karcinomu prsu. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): s. 447–451.
5. Kubiliute, R. a kol., Negenotoxický aktivátor ABCB1, tetrafenylfosfonium, může přispívat k rezistenci na doxorubicin v buněčné linii karcinomu prsu MX-1. Scientific reports, 2021. 11(1): s. 1–11.
6. Jiang, R., a kol., Mixomická analýza karcinomu prsu: Dlouhá nekódující RNA linc01561 působí jako ceRNA podílející se na progresi karcinomu prsu. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: s. 1–9.