Buněčná linie MX-1

MX-1 je buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu odvozená z modelu xenograftu karcinomu prsu na athymických myších. Lidské buňky adenokarcinomu prsu byly vytvořeny z nádoru prsu 29leté ženy kavkazské rasy. Buňky MX1 patří mezi buňky triple-negativního karcinomu prsu (TNBC), které jsou hojně využívány pro výzkum rezistence k lékům, buněčné signalizace, mechanismu odpovědi na léky atd.

Původ a obecné informace o buňkách MX-1

Než začnete pracovat s touto buněčnou linií, měli byste se seznámit s jejími základy. Projdeme si téměř všechny obecné informace týkající se buněčné linie MX-1.

Nesmrtelná buněčná linie MX-1 je nádorová buněčná linie vytvořená z nádorového xenograftu. Buňky MX-1 jsou považovány za typ trojitě negativního karcinomu prsu (TNBC) [1]. Tyto buňky jsou navíc estrogenový receptor a p53 negativní, protože tyto geny neexprimují.

Buňky MX-1 - modelový systém pro trojitě negativní karcinom prsu

Podmínky kultivace buněčné linie MX-1 nejsou náročné. Tyto buňky lze snadno množit a používat v různých výzkumných laboratořích pro transfekční studie. Metodou transientní transfekce se běžně studují základní buněčné mechanismy a vzorce genové exprese v této buněčné linii [2, 3].

Tato buněčná linie je vhodným modelovým systémem pro karcinomy prsu. Lze ji využít k pochopení molekulárních mechanismů, které stojí za progresí onemocnění, a ke screeningu a vývoji léčiv pro boj s onemocněním. Konkrétně může být buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu MX-1 alternativou k buňkám TNBC, protože je negativní na estrogenové receptory [4].

Buněčná linie MX-1: Informace o kultivaci

• Doba zdvojení: Doba zdvojení populace buněk INS-1 je přibližně 44 hodin.
• Adherentní nebo v suspenzi: Buňky INS-1 rostou jak v suspenzi, tak v adherentní formě.
• Poměr subkultivace: Buňky INS-1 se subkultivují v poměru 1:3. Krátce, suspenze buněk se odebere. Adherentní buňky se opláchnou PBS a inkubují se s roztokem Accutase. Po odloučení se buňky doplní čerstvým médiem. Poté se suspendované i adherentní buňky odstředí a shromáždí. Buňky se opatrně resuspendují a rozdělí do nových baněk pro růst.
• Růstové médium: Pro kultivaci buněčné linie INS-1 inzulinomu potkana se používá RPMI 1640. Médium je doplněno 10 % tepelně inaktivovaného fetálního hovězího séra, 2,1 mM stabilního glutaminu, 10 mM HEPES, 2,0 g/l NaHCO3 a 1 mM pyruvátu sodného.
• Růstové podmínky: Buňky INS-1 se uchovávají ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s nepřetržitým přívodem 5 % CO2.
• Skladování: Buňky INS-1 beta lze dlouhodobě skladovat v plynné fázi kapalného dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C v elektrické mrazničce.
• Postup zmrazování a médium: Pro zmrazení buněk INS-1 se používá médium CM-1 nebo CM-ACF, a to pomalým zmrazovacím procesem. Umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, aby byla chráněna životaschopnost buněk.
• Proces rozmrazování: Zmrazené buňky INS-1 se rozmrazují ve vodní lázni nastavené na teplotu 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Po rozmrazení se buňky doplní čerstvým médiem a přímo se přelijí do nové baňky pro růst. Po 24 hodinách se médium vymění, aby se odstranily složky zmrazovacího média.
• Úroveň biologické bezpečnosti: Pro kultivaci buněk INS-1 inzulinomu potkana je nutná laboratoř s úrovní biologické bezpečnosti 1.

Buňky MX-1: Použití ve výzkumu

Tato buněčná linie lidského adenokarcinomu prsu MX-1 se běžně používá ve studiích rakoviny prsu místo buněk jako MDA-MB-231 nebo MCF-7. Zde je uvedeno několik speciálních aplikací této buněčné linie ve výzkumu rakoviny.

Mechanismy rezistence vůči lékům

Buňky MX-1 se používají ke studiu molekulárních faktorů zprostředkujících vznik rezistence vůči lékům proti rakovině prsu. Studie hojně využívají buňky MX-1 k vytvoření modelů rezistentních na léčiva. Studie publikovaná v roce 2021 uvádí použití buněk MX-1 k vytvoření buněčné linie karcinomu prsu rezistentní vůči doxorubicinu. Vytvořený buněčný model potvrdil zapojení ABC transportéru ABCB1 a epiteliálně-mezenchymálního přechodu (EMT) do získávání chemorezistence [5].

Genová exprese / buněčná signální dráha

Buněčnou linii MX-1 lze transientně transfekovat za účelem objasnění vzorců genové exprese a buněčných signálních drah. Studie použily buňky MX-1 pro transfekci shRNA (krátká vlásenková RNA) a nekódující RNA ke zkoumání jejich účinku na proliferaci a růst buněk karcinomu prsu. Kromě toho byly objasněny související genové signální dráhy [2, 6].

Screening potenciálních inhibitorů

Buňky MX-1 lze použít pro screening potenciálních léčiv proti rakovině prsu, protože napodobují mikroprostředí nádorových buněk. Výzkumná studie prokázala terapeutickou aktivitu vinorelbinu, mikrotubulárního toxinu, který v buňkách MX-1 vyvolal buněčnou smrt a polyploidii [4].

Objednejte si buněčnou linii MX-1 ještě dnes

Buněčná linie MX-1 Zdroje: Zdroje: Protokoly, videa a další

Dostupné zdroje týkající se metod kultivace a transfekce jsou omezené, ale shromáždili jsme pro vás co nejvíce informací.

Protokoly pro kultivaci buněk

Buňky MX-1 se používají v mnoha studiích analýzy transientní transfekce. Zde jsme uvedli několik zdrojů, které vám pomohou s transfekčními protokoly.

• Transfekce buněk MX-1: Tato publikace popisuje protokol transfekce siRNA v buňkách MX-1 pro vývoj modelu genového knock-out.
• Transfekce savčích buněk: Tento článek obsahuje všechny podstatné informace o metodách transfekce používaných v savčích buněčných liniích.

Doufáme, že vám tento článek poskytl cenné znalosti o buněčné linii MX-1 a že jste lépe pochopili, jak tyto buňky kultivovat, udržovat a využívat ve svém výzkumu. Pokud máte zájem o práci s buněčnou linií MX-1, neváhejte si ji u nás objednat a odstartovat tak svou výzkumnou cestu!

Často kladené otázky o buněčné linii karcinomu prsu MX-1

Odkazy

1. Stefanski, C.D. a J.R. Prosperi, Boj proti rezistenci CHK1 u triple negativního karcinomu prsu: (1): Inhibice EGFR jako potenciální kombinační léčba. Cancer Drug Resistance, 2022. 5(1): p. 229.
2. Vasiyani, H., et al. analog cGAMP, c-di-AMP, aktivuje dráhu buněčné smrti zprostředkovanou STING v buňkách estrogen-receptor negativního karcinomu prsu. Apoptosis, 2021. 26: p. 293-306.
3. Xiang, S., et al., Proteomická analýza inhibitoru apoptózy proteinupodobnéhoproteinu-2na proliferaci buněk karcinomu prsu. Molecular Medicine Reports, 2022. 25(3): p. 1-11.
4. Nakajima, H., C. Furukawa a J. Magae, Vinorelbin, mikrotubulární toxin, indukuje apoptózu a polyploidii u MX-1, lidské triple-negativní buněčné linie karcinomu prsu. Gan to Kagaku ryoho. Cancer & Chemotherapy, 2019. 46(3): p. 447-451.
5. Kubiliute, R., et al., Nongenotoxický aktivátor ABCB1 tetrafenylfosfonium může přispívat k rezistenci k doxorubicinu u buněčné linie karcinomu prsu MX-1. Vědecké zprávy, 2021. 11(1): p. 1-11.
6. Jiang, R., a další, Mixomická analýza karcinomu prsu: Dlouhá nekódující RNA linc01561 působí jako ceRNA podílející se na progresi rakoviny prsu. The International Journal of Biochemistry & Cell Biology, 2018. 102: p. 1-9.