Buněčná linie MG-63: Podrobný průvodce buňkami MG-63 ve výzkumu osteosarkomu
Buňky MG-63 jsou fibroblastům podobné lidské osteosarkomové buňky, které nabízejí širokou škálu výzkumných aplikací v biomedicíně. To může zahrnovat studium procesů souvisejících s kostmi, jako je vývoj kostí, diferenciace atd. Buněčná linie MG-63 navíc slouží jako vhodný in vitro model pro studium životaschopnosti, proliferace a adheze kostních buněk.
Obecná charakteristika a původ buněčné linie MG-63
Tato část článku se zabývá původem a obecnými charakteristikami buněčné linie MG-63. Dozvíte se: Co je buněčná linie MG-63? Jaký je původ buněčné linie MG63? Jaká je morfologie buněk MG-63? Jaká je velikost buněk MG-63?
- MG-63 je typ buněčné linie osteoblastů pocházející z kostí 14letého pacienta s osteosarkomem (běloch). A. Billiau a jeho kolegové uložili tuto buněčnou linii v roce 1977.
- Buněčná linie MG-63 má morfologii podobnou fibroblastům.
- Lidské osteosarkomové buňky (MG-63) vykazují hypo-triploidii. Modální počet chromozomů těchto buněk je 66, což se vyskytuje přibližně u 44 % buněčné populace. Vyšší ploidie je rovněž zaznamenána u téměř 2 % buněčné populace. Kromě toho je ve všech buňkách hojně zastoupeno 18-19 markerových chromozomů.
Informace o kultivaci buněčné linie MG-63
Důležité informace o požadavcích na kultivaci buněčné linie vám mohou usnadnit práci. V této části článku jsou uvedeny všechny klíčové body důležité pro kultivaci a udržování buněk MG-63. Dozvíte se zde: Jaká je doba zdvojení buněk MG-63? Jaká růstová média se používají pro buňky MG-63? Jaká je hustota výsevu buněk MG-63?
Klíčové body pro kultivaci buněk MG-63
|
Doba zdvojení |
Doba zdvojení populace buněk MG-63 se pohybuje v rozmezí 28-38 hodin v závislosti na kultivačních podmínkách. |
|
Růstové vlastnosti |
MG-63 je adherentní buněčná linie. |
|
Hustota výsevu |
probuňky MG-63 se doporučuje hustota 1 x104 buněk/cm2. Adherentní buňky se promývají 1 x fosfátovým pufrem (PBS) bez hořčíku a vápníku. Tyto buňky se poté inkubují s disociačním roztokem (Accutase), přidá se k nim čerstvé médium a odstředí se. Odebraný buněčný granulát se resuspenduje v čerstvém médiu a dávkuje se do nové baňky pro růst. |
|
Růstové médium |
Ke kultivaci buněk MG-63 se používá médium DMEM nebo Ham's F12. Tato média lze pro optimální růst buněk rozšířit o 5 % fetálního hovězího séra (FBS), 3,0 g/l glukózy, 2,5 mM L-glutaminu a 1,2 g/l NaHCO3. Médium by se mělo vyměňovat 2-3krát týdně. |
|
Růstové podmínky |
Ke kultivaci buněk MG-63 je zapotřebí zvlhčený inkubátor při teplotě 37 °C a 5% přívod CO2. |
|
Skladování |
Tyto buňky podobné osteoblastům lze skladovat v plynné fázi tekutého dusíku nebo při teplotě nižší než -150 °C, aby se zachovala životaschopnost buněk. |
|
Postup zmrazování a médium |
Pro zmrazení buněk MG-63 se používají média CM-1 nebo CM-ACF. Obecně se doporučuje pomalý proces zmrazování, aby se zabránilo šoku buněk a ochránila se jejich životaschopnost. |
|
Postup rozmrazování |
Zmrazené buňky se inkubují po dobu 40 až 60 sekund v předehřáté vodní lázni (37 °C). Buňky se resuspendují v čerstvém růstovém médiu a přelijí se do nové baňky. Po 24 hodinách inkubace se médium vymění, aby se odstranily složky zmrazovacího média. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti |
Pro manipulaci s kulturami MG-63 a jejich udržování je nutné laboratorní prostředí na úrovni biologické bezpečnosti jedna. |
Buněčná linie MG-63: Výhody a nevýhody
MG-63 je široce používaná buněčná linie osteoblastů. Je s ní spojeno několik výhod a nevýhod. Zde uvedeme několik hlavních výhod a nevýhod buněčné linie MG-63.
Výhody
Výhody buněk MG-63 jsou následující:
-
Vlastnosti podobné osteoblastům
Buněčná linie MG-63 vykazuje vlastnosti podobné osteoblastům, takže je vhodná pro studium procesů a onemocnění souvisejících s kostmi. Lze ji také použít ke zkoumání adheze, proliferace a životaschopnosti buněk na titanových površích [1].
-
Možnost transfekce
Buňky MG-63 se hojně využívají při transfekčních studiích, což umožňuje výzkum genové exprese, funkce a buněčných procesů.
-
Vysoká úroveň produkce interferonu
Buňky MG-63 jsou schopné produkovat interferon na vysoké úrovni. Při indukci cykloheximidem, kyselinou polyinosinovou, kyselinou polycytidylovou a aktinomycinem mohou poskytnout 3,7krát vyšší výtěžek interferonu na cm² než diploidní fibroblasty [2].
Nevýhody
Nevýhody spojené s MG-63 B buňkami jsou:
-
Heterogenita
Buňky MG-63 vykazují heterogenitu v rámci buněčné populace, což může ovlivnit reprodukovatelnost.
-
Nádorová buněčná linie
MG-63 je nádorová buněčná linie a nemusí plně reprezentovat normální chování a fyziologii buněk, což omezuje její použití v některých laboratorních experimentech.
Objednejte si buňky MG-63 ještě dnes
Aplikace buněk MG-63
Buňky MG-63 jsou vynikajícím výzkumným nástrojem. Nabízejí mnoho slibných aplikací v oblasti výzkumu. Zde je uvedeno několik hlavních výzkumných aplikací buněk MG-63.
- Studium procesů/nemocí souvisejících s kostmi: Buňky MG-63 jsou buňky podobné osteoblastům (tvořící kosti). Proto se tyto buňky hojně využívají ke studiu kostních chorob a buněčných procesů, včetně vývoje, diferenciace a mineralizace. Kromě toho se tyto buňky hojně využívají ke screeningu terapeutických léků na podporu hojení kostí. Výzkum použil buňky MG-63 ke studiu terapeutického potenciálu zeleně syntetizovaných nanočástic oxidu zinečnatého ze Scutellaria baicalensis na proliferaci, mineralizaci a diferenciaci kostních buněk [3].
- Výzkum rakoviny: MG-63 buňky se hojně využívají ve výzkumu rakoviny. Několik studií použilo tyto osteosarkomové buňky k pochopení signálních drah rakoviny a k hodnocení cytotoxického a terapeutického potenciálu léčiv. Studie provedená v roce 2019 zkoumala protinádorové vlastnosti přírodní sloučeniny tomentosinu s využitím buněk MG-63. Výsledky ukázaly, že tomentosin vykazuje protinádorové účinky tím, že spouští intracelulární produkci reaktivních forem kyslíku (ROS) [4].
Výzkumné publikace s buňkami MG-63
Níže jsou uvedeny některé výzkumné publikace týkající se buněčné linie MG-63, která je podobná osteoblastům.
miR-192 zvyšuje citlivost léku metotrexátu na buňky osteosarkomu MG-63
Tento článek byl publikován v časopise Pathology - Research and Practice v roce 2020. V tomto výzkumu byly použity buňky MG-63 ke studiu molekulárních mechanismů podílejících se na rezistenci k lékům u buněk rakoviny osteosarkomu (MG-63). Výsledky ukázaly, že miRNA-192 by mohla být užitečným cílem při překonávání rezistence osteosarkomu vůči léku metotrexátu.
Tento výzkum byl publikován v časopise Journal of Photochemistry and Photobiology B: Biology (2020). Studie uvádí protinádorový potenciál zeleně syntetizovaných nanočástic oxidu zinečnatého (ZnONPs) z Rehmanniae Radix proti buňkám rakoviny kostí (MG-63).
Tento výzkumný článek byl publikován v roce 2021 v časopise Materials Science and Engineering. Tato studie navrhla vlastnosti biosyntetizovaných nanočástic oxidu zinečnatého z rostliny Scutellaria baicalensis pro hojení kostí s využitím buněčné linie MG-63.
Kurkumin inhibuje proliferaci a invazi buněk MG-63 prostřednictvím inaktivace dráhy p-JAK2/p-STAT3
Tato studie byla publikována v časopise Onco Targets and Therapy v roce 2021. Výzkum navrhl protinádorové vlastnosti sloučeniny kurkuminu proti buňkám osteosarkomu. Sloučenina tyto terapeutické účinky uplatňovala prostřednictvím inaktivace signální dráhy p-JAK2/p-STAT3 pro nádorová onemocnění.
Tento výzkum byl publikován v roce 2018 v časopise International Journal of Biomedical Engineering and Clinical Science. Studie zjistila, že vitamin D3 ošetřený energií biopole pozitivně ovlivňuje proliferaci, zrání a diferenciaci kostních buněk a zlepšuje parametry zdraví kostí.
Zdroje pro buněčnou linii MG-63: Další zdroje: protokoly, videa a další informace
K dispozici je několik zdrojů o buněčné linii MG-63, které objasňují její protokoly kultivace a transfekce buněk.
- Transfekce buněk MG-63: Toto video komplexně vysvětluje protokol transfekce buněk MG-63.
- Pasážování adherentních buněk: Toto video popisuje subkultivaci nebo pasážování adherentních buněčných linií. Pomůže vám naučit se základní protokoly kultivace buněk.
Následující odkaz vám poskytne kultivační protokol pro buňky MG-63.
- Kultivace buněk MG-63: Tato webová stránka poskytuje snadný a podrobný protokol pro subkultivaci nebo dělení buněčné linie MG-63.
Časté dotazy týkající se buněk MG-63
Odkazy
- Wandiyanto, J.V., et al., The Fate of Osteoblast-Like MG-63 Cells on Pre-Infected Bactericidal Nanostructured Titanium Surfaces. Materials (Basel), 2019. 12(10).
- Billiau, A., et al., Human interferon: mass production in a newly established cell line, MG-63 (Lidský interferon: masová produkce v nově vytvořené buněčné linii MG-63 ). Antimicrob Agents Chemother, 1977. 12(1): p. 11-5.
- Tang, Y., et al., Osteogenic differentiation and mineralization potential of zinc oxide nanoparticles from Scutellaria baicalensis on human osteoblast-like MG-63 cells (Osteogenní diferenciace a mineralizační potenciál nanočástic oxidu zinečnatého ze Scutellaria baicalensis na lidských buňkách podobných osteoblastům MG-63). Materials Science and Engineering: C, 2021. 119: p. 111656.
- Lee, C.M., a další, Tomentosin vykazuje antikarcinogenní účinek u lidských osteosarkomových buněk MG-63 prostřednictvím indukce intracelulárních reaktivních forem kyslíku. International journal of molecular sciences, 2019. 20(6): p. 1508.