Buněčná linie LNCaP: Klíč k průlomovým objevům v oblasti rakoviny prostaty

Buněčná linie LnCaP je základním kamenem ve výzkumu rakoviny, zejména ve studiu rakoviny prostaty. Její široké uplatnění v této oblasti je dáno její užitečností při pochopení biologických základů rakoviny prostaty a při hodnocení účinnosti potenciálních terapeutických zásahů. Cílem tohoto článku je poskytnout základní informace o buněčné linii LNCaP (karcinom prostaty z lymfatických uzlin) a vybavit výzkumné pracovníky základními informacemi potřebnými k zahájení práce s touto buněčnou linií.

Charakteristika a původ buněk LNCaP

Buněčná linie LNCaP, uznávaná pro svůj význam ve výzkumu rakoviny prostaty, vykazuje jedinečné vlastnosti a původ, které jsou pro výzkumné pracovníky klíčové:

Původ: Buňky LNCaP byly poprvé izolovány v roce 1977 z metastatické lymfatické uzliny 50letého muže kavkazské rasy s karcinomem prostaty, konkrétně z levé nadklíčkové oblasti.
Citlivost na androgeny: Tato vlastnost usnadnila vývoj dvou významných podlinek z původních buněk LNCaP: LNCaP-G4, která je známá svou vysokou citlivostí na androgeny, a LNCaP-E9, která se vyznačuje nízkou citlivostí na androgeny. Tyto sublinie představují univerzální nástroj pro zkoumání nuancí karcinomu prostaty.
Morfologie: Buňky LNCaP mají tvar podobný epitelu a jsou schopny růst buď jako agregáty, nebo jako solitérní buňky, což nabízí univerzální model pro studium interakcí mezi buňkami a morfologií nádorových buněk.
Velikost: Průměrný průměr buněk karcinomu prostaty LNCaP je přibližně 18 µm, což je detail, který usnadňuje mikroskopické zkoumání a charakterizaci těchto buněk.
Chromozomální složení: Tato buněčná linie je aneuploidní, s proměnlivým počtem chromozomů v rozmezí 76 až 91, což odráží genetickou nestabilitu často pozorovanou u nádorových buněk.
Nádorový potenciál: LNCaP buňky vykazují 58% frekvenci tvorby podkožních nádorů, což podtrhuje jejich užitečnost v in vivo modelech karcinomu prostaty.

Podrobné znalosti o původu, vlastnostech a využitelnosti buněk LNCaP ve výzkumu poskytují vědcům, kteří se pouštějí do studií rakoviny prostaty, pevný základ, který usnadňuje informovaný návrh experimentů a interpretaci výsledků.

Buňky prostaty v SEM.

Kultivace buněk LNCaP: Základní pokyny

Pro zahájení výzkumu s LNCaP, významnou buněčnou linií karcinomu prostaty, je nutné důkladně porozumět základům její kultivace. Následující body obsahují kritické aspekty, které je třeba vzít v úvahu pro efektivní kultivaci buněk LNCaP:

Doba zdvojení populace: LNCaP buňky vykazují průměrnou dobu zdvojení 48 až 60 hodin, což udává dobu potřebnou k tomu, aby se buněčná populace za optimálních podmínek zdvojnásobila.
Růstové charakteristiky: Tyto buňky jsou adherentní, mají tendenci růst v monovrstvách a zároveň vytvářet výrazné buněčné shluky, což je vlastnost důležitá pro sledování stavu buněk a jejich konfluence.
Hustota výsevu: Doporučuje se vysévat buňky LNCaP v hustotě 1-2 x 10^4 buněk/cm^2. Protokol zahrnuje promytí buněk PBS, jejich oddělení pomocí Accutase a následnou centrifugaci. Buňky se poté resuspendují a kultivují v čerstvých růstových médiích v nových baňkách.
Optimální růstové médium: Přednostním médiem pro kultivaci LNCaP je EMEM obohacený o 2,5 mM L-glutamin a 10 % fetálního hovězího séra (FBS). Pro udržení optimálních růstových podmínek se doporučuje obnovovat médium každý třetí den.
Kultivační prostředí: LNCaP buňky prospívají ve zvlhčeném inkubátoru nastaveném na 37 °C s 5 % CO2, což jsou podmínky, které věrně napodobují prostředí in vivo.
Skladování buněk: Pro dlouhodobé uchování by měly být buňky LNCaP skladovány v plynné fázi tekutého dusíku, což zajistí jejich životaschopnost pro budoucí experimenty.
Techniky zmrazování a rozmrazování: Při použití mrazicího média CM-1 nebo CM-ACF by měly být buňky LNCaP zmrazovány postupně, aby se minimalizoval teplotní šok. Po rozmrazení, které se nejlépe provádí ve vodní lázni o teplotě 37 °C, dokud nezůstane jen malý ledový chuchvalec, by měly být buňky okamžitě resuspendovány v růstovém médiu, odstředěny, aby se odstranilo mrazicí médium, a poté přeneseny do kultivačních baněk.
Úvahy o biologické bezpečnosti: Kultivace buněk LNCaP vyžaduje dodržování protokolů úrovně biologické bezpečnosti 1, které zajišťují bezpečné a účinné postupy manipulace.

Tyto pokyny slouží jako základ pro založení a udržování buněčných kultur LNCaP, což usnadňuje spolehlivé a reprodukovatelné výsledky ve výzkumu rakoviny prostaty.

Buňky LNCaP při nízké a vysoké konfluenci.

Výhody a nevýhody použití buněčné linie LNCaP

Buněčná linie LNCaP, která je základním kamenem výzkumu rakoviny prostaty, představuje jedinečný soubor vlastností, které přinášejí výhody i problémy při jejím použití. Tento oddíl popisuje hlavní výhody a potenciální nevýhody spojené s buňkami LNCaP.

Výhody

Snadná kultivace: LNCaP buňky jsou z hlediska kultivace a udržování v laboratorním prostředí uživatelsky velmi přívětivé. Díky této přístupnosti se staly preferovanou volbou pro různé aplikace, včetně screeningu léčiv a farmakologického testování.
Citlivost na androgeny: Pro buňky LNCaP je charakteristická jejich závislost na androgenech, která je charakterizována expresí androgenních receptorů (AR). Tato vlastnost z nich činí neocenitelný in vitro model pro zkoumání dynamiky karcinomu prostaty závislého na androgenech, který umožňuje nahlédnout do progrese onemocnění a potenciálních terapeutických cílů.

Nevýhody

Rychlost růstu: Jedním z omezení buněk LNCaP je jejich relativně nízká rychlost proliferace. Tato vlastnost může představovat problém při experimentálních návrzích, které vyžadují rychlý růst buněk nebo vysokou výkonnost v omezeném časovém rámci.
Agregace buněk: LNCaP buňky mají sklon vytvářet agregáty nebo shluky, což může vnášet variabilitu a komplikovat interpretaci údajů v některých buněčných testech, zejména v těch, které jsou založeny na rovnoměrném rozložení buněk nebo analýze jednotlivých buněk.

Pochopení těchto vlastností buněčné linie LNCaP je pro výzkumné pracovníky zásadní, aby mohli využít jejích výhod a zároveň zmírnit dopad jejích omezení, a optimalizovat tak potenciál buněčné linie pro pokrok ve výzkumu rakoviny prostaty.

Výzkumné aplikace buněk LNCaP citlivých na androgen

Buňky LNCaP odvozené z lidského karcinomu prostaty slouží jako důležitý nástroj v různých oblastech výzkumu. Jejich užitečnost vyplývá z jejich androgen-dependentní povahy a schopnosti modelovat specifické aspekty biologie rakoviny prostaty. Mezi klíčové aplikace patří:

Výzkum rakoviny prostaty

Studie androgenních receptorů

Buňky LNCaP, stejně jako mnoho jiných nádorových buněk prostaty, vykazují citlivost na androgeny, které jsou rozhodujícími faktory růstu rakoviny prostaty. Tato citlivost se terapeuticky využívá prostřednictvím strategií androgenní deprivace, jako je ablace androgenů nebo použití antiandrogenů, jako je flutamid. Účinnost těchto terapií se často sleduje prostřednictvím potlačení specifických antigenů a potlačení buněčné proliferace. Významným problémem je však vznik rezistentního karcinomu prostaty, často po vysazení antiandrogenů, což může vést k metastatickému onemocnění.

V adaptačních a rezistentních mechanismech buněk LNCaP hrají klíčovou roli mutace. Bodové mutace, zejména v genu pro androgenní receptor, byly identifikovány a studovány pomocí technik, jako je polymerázová řetězová reakce (PCR) a transkriptomické analýzy. Tyto mutace mohou ovlivnit odpověď buněk na androgenní deprivaci a antiandrogenní terapii, což přispívá ke složitosti léčby pokročilého karcinomu prostaty.

Objevování léků

Terapeutický screening

Výzkum využívající buňky LNCaP se rozšířil nad rámec tradičních hormonálních terapií a zkoumá nové způsoby léčby. Předmětem zájmu se stalo nitrobuněčné podávání léčiv zaměřené na specifické dráhy v těchto buňkách, cytotoxicita sloučenin, jako je ripl, a účinky látek, jako je amygdalin a klorgylin. Cílem těchto studií je odhalit nové metody zastavení metastatického procesu, kontroly progrese buněčného cyklu a vyvolání zástavy buněčného cyklu v buňkách karcinomu prostaty, což nabízí naději na účinnější léčbu pokročilých a rezistentních forem tohoto onemocnění.

Klinické důsledky

Metastatický potenciál buněk LNCaP, zejména jejich schopnost napodobovat metastatický proces v místech, jako je nadklíčková lymfatická uzlina, z nich činí neocenitelný nástroj pro studium šíření rakoviny prostaty. Pochopení genomického a transkriptomického prostředí těchto buněk, včetně úlohy lidské genomové DNA v jejich chování, je zásadní pro vývoj strategií prevence nebo léčby metastazujícího karcinomu prostaty.

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300265

Zlepšete svůj výzkum pomocí našíbuněčné linie LnCaP a jejího derivátuLnCaP klonu FGC

Zdroje a poznatky o výzkumu buněk LNCaP

Získání přístupu k vysoce kvalitním buněčným liniím LNCaP a jejich podrobným genetickým a fenotypovým údajům je pro výzkumné pracovníky klíčové. Tyto důležité zdroje nabízí řada biorepozitářů a vědeckých institucí, které výzkumníkům umožňují provádět důkladné a významné studie v oblasti rakoviny prostaty a příbuzných oborech.

Pozoruhodné výzkumné publikace zahrnující buňky LNCaP

Buněčná linie LNCaP byla ústředním prvkem mnoha významných studií v oblasti výzkumu rakoviny prostaty. Níže jsou uvedeny některé významné publikace, které využívaly buňky LNCaP jako klíčový výzkumný model:

CRISPR/Cas9 cílení na androgenní receptor potlačuje růst lidských buněk karcinomu prostaty LNCaP: Tato studie, publikovaná v časopise Molecular Medicine Reports v roce 2018, zdůrazňuje potenciál CRISPR/Cas9 jako terapeutického nástroje k potlačení růstu buněk LNCaP pomocí cílení na androgenní receptor.
Fytochemická analýza stonků Daphne pontica L. s jejich proapoptotickými vlastnostmi proti buňkám karcinomu prostaty DU-145 a LNCaP: Tato publikace DARU Journal of Pharmaceutical Sciences uvádí protinádorové schopnosti Daphne pontica L. vůči buňkám LNCaP a DU-145.
Synergické protinádorové účinky liraglutidu, agonisty receptoru pro glukagonu podobný peptid-1, spolu s docetaxelem na buněčnou linii karcinomu prostaty LNCaP: Tento výzkum, který byl v roce 2020 představen v časopise European Journal of Pharmacology, zkoumá silnou protinádorovou synergii liraglutidu a docetaxelu na buňkách LNCaP.
Stanovení potenciálních protinádorových účinků Coriandrum sativum u buněčných linií karcinomu prostaty PC-3 a LNCaP: Podle této publikace z roku 2018 v časopise Journal of Cellular Biochemistry vykazuje extrakt z Coriandrum sativum slibné protinádorové účinky na buňky LNCaP prostřednictvím modulace klíčových genů buněčného cyklu.
Knockdown STEAP1 inhibuje růst buněk a indukuje apoptózu u buněk karcinomu prostaty LNCaP, čímž působí proti účinku androgenů: Tento článek v časopise Molecular Oncology Journal z roku 2018 pojednává o tom, jak může umlčení nadměrně exprimovaného genu STEAP1 v buňkách LNCaP zmařit růst buněk karcinomu prostaty a vyvolat apoptózu.

Buňky LNCaP: V článku jsou uvedeny protokoly, návody a další informace

LNCaP, široce používaná buněčná linie karcinomu prostaty, je podpořena množstvím zdrojů, včetně podrobných protokolů kultivace a transfekce:

Transfekce buněčné linie LNCaP: Tento dokument nabízí komplexního průvodce protokoly pasážování a transfekce buněk LNCaP

Často kladené otázky týkající se buněk LNCaP

Odkazy

Castanares, M.A., et al., Charakterizace nové buněčné linie metastatického karcinomu prostaty původu LNCaP. The Prostate, 2016. 76(2): p. 215-225.
Iguchi, K., et al., Isolation and characterization of LNCaP sublines differing in hormone sensitivity [Izolace a charakterizace podlinie LNCaP lišící se citlivostí na hormony ]. Journal of andrology, 2007. 28(5): p. 670-678.
Wei, C., et al., CRISPR/Cas9 targeting of the androgen receptor supresses the growth of LNCaP human prostate cancer cells (CRISPR/Cas9 cílený na androgenní receptor potlačuje růst lidských buněk karcinomu prostaty ). Molecular medicine reports, 2018. 17(2): p. 2901-2906.
Gomes, I.M., et al., Knockdown STEAP1 inhibuje buněčný růst a indukuje apoptózu u buněk karcinomu prostaty LNCaP působením proti účinkům androgenů. Lékařská onkologie, 2018. 35: p. 1-10.
Tousi, M.S., et al., Evaluation of apoptotic effects of mPEG-b-PLGA coated iron oxide nanoparticles as a eupatorin carrier on DU-145 and LNCaP human prostate cancer cell lines [Hodnocení apoptotických účinků nanočástic oxidu železa potažených mPEG-b-PLGA jako nosiče eupatorinu na buněčné linie lidského karcinomu prostaty ]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021. 11(1): p. 108-121.