Buňky CAL27 - zaměřený pohled na rakovinu hlavy a krku pomocí buněk CAL27
CAL27 je jednou z nejčastěji používaných buněčných linií spinocelulárního karcinomu ústní dutiny v biomedicínském výzkumu. Je cenným nástrojem pro studium složitostí dlaždicobuněčných karcinomů, včetně růstu a vývoje nádorů a základních buněčných a molekulárních mechanismů. Kromě toho také usnadňuje screening a testování léčiv pro vývoj protinádorových léčiv.
Tento článek vám nabídne cenné informace o buněčné linii CAL27 a bude se zabývat následujícími tématy:
- Původ a obecná charakteristika buněk CAL27
- Informace o kultivaci buněčné linie CAL27
- Buněčná linie CAL27: Výhody a nevýhody
- Použití buněk CAL27 ve výzkumu
- Publikace s buněčnou linií CAL27
- Zdroje pro buněčnou linii CAL27: Protokoly, videa a další zdroje informací o kalciové liště CAL27
1. Původ a obecné vlastnosti buněk CAL27
První věc, kterou je třeba o buněčné linii vědět, je její původ a obecné charakteristiky, které ji odlišují od jiných buněčných linií. Tato část článku zahrnuje základní informace o buňkách CAL27. Dozvíte se: Co je buněčný model CAL27? Co je CAL27 HPV? Jaký je stav HER2 CAL27? Jaký je původ buněčné linie CAL27? Jaká je morfologie buněk CAL27? Jaká je velikost buněk CAL27?
- Buněčná linie dlaždicobuněčného karcinomu ústní dutiny CAL27 byla vyvinuta z tkáně jazyka 56letého bělocha s onemocněním dlaždicobuněčného karcinomu jazyka. Tuto buněčnou linii vytvořil v roce 1982 Gioanni se svými spolupracovníky [1].
- Nádorové buňky CAL27 vykazují morfologii podobnou epitelu.
- Tyto buňky mají aneuploidní karyotyp. Jejich modální počet chromozomů je 43.
2.informace o kultivaci buněčné linie CAL27
Pro snadnou a proveditelnou údržbu buněčné linie je třeba znát její klíčové požadavky na kultivaci. Tato část se zabývá důležitými pojmy týkajícími se kultivace buněčné linie CAL27. Měli byste vědět: Jaká je doba zdvojení buněčné linie CAL27? Co je buněčné médium CAL27? Jaký je poměr subkultivace buněčné linie CAL27? Jaké jsou podmínky kultivace linie CAL27? Jak se kultivují buňky CAL27?
Klíčové body pro kultivaci buněk CAL27
|
Doba zdvojení: |
CAL27 buňky vykazují mírnou rychlost růstu s dobou zdvojení populace přibližně 45 hodin. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
Tyto polygonální buňky CAL27 přilnou k povrchu kultivační nádoby a rostou do monovrstev. |
|
Poměr rozdělení: |
CAL27 buňky se subkultivují v poměru 1:2 až 1:4. Při subkultivaci se adherované buňky promyjí fyziologickým roztokem s fosfátovým pufrem bez hořčíku a vápníku (1x). Poté se buňky inkubují s Accutase (pasážovací roztok) při pokojové teplotě po dobu 8 až 10 minut. Oddělené buňky se doplní čerstvým médiem a odstředí se. Odebraná peleta byla poté opatrně resuspendována a přelita do nových baněk obsahujících růstové médium. |
|
Růstové médium: |
Ke kultivaci buněčné linie CAL27 se používá médium DMEM doplněné 10 % FBS, 4,5 g/l glukózy, 4 mM L-Glutaminu, 1,5 g/l NaHCO3 a 1,0 mM pyruvátu sodného. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
Buněčné kultury CAL27 se uchovávají při teplotě 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s přívodem 5 % CO2. |
|
Skladování: |
Zmrazené buňky CAL27 se uchovávají buď v plynné fázi tekutého dusíku, nebo při teplotě nižší než -150 °C v mrazničce s velmi nízkou teplotou po delší dobu. |
|
Postup zmrazování a médium: |
Pro zmrazení buněk CAL27 se doporučuje zmrazovací médium CM-1 nebo CM-ACF. Doporučuje se pomalý proces zmrazování, který umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C za minutu, aby byla chráněna životaschopnost buněk. |
|
Postup rozmrazování: |
Zmrazené lahvičky s buňkami se vloží do vodní lázně nastavené na 37 °C na 40-60 sekund, dokud nezůstane malý ledový chuchvalec. Buňky se doplní čerstvým médiem a odstředí se. Poté se mrazicí médium odstraní a buněčná peleta se přidá s čerstvým růstovým médiem a opatrně se resuspenduje. Buňky se poté rozdělí do nových baněk pro růst. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Pro manipulaci s buněčnými kulturami CAL27 a jejich údržbu je nutné laboratorní prostředí úrovně biologické bezpečnosti 1. |
3.buněčná linie CAL27: Výhody a nevýhody
CAL27 je široce používaná buněčná linie spinocelulárního karcinomu dutiny ústní. V této části budou zdůrazněny některé významné výhody a nevýhody související s těmito nádorovými buňkami.
Výhody
Hlavní výhody buněčné linie CAL27 jsou:
|
Nádorová aktivita |
Buněčná linie CAL27 má tumorigenní potenciál. Z těchto buněk se mohou vyvinout nádory, pokud jsou injikovány do nahých nebo imunokompromitovaných myší. To může výzkumným pracovníkům pomoci do hloubky pochopit biologii nádorů a mikroprostředí. |
|
Genetické mutace |
Buňky CAL27 obsahují specifické genomické změny, jako je CAL27 P53, které se běžně vyskytují u spinocelulárního karcinomu dutiny ústní. Použití buněk CAL27 tak může být výhodné pro výzkumné pracovníky, kteří studují vliv těchto mutací na růst, vývoj a progresi rakoviny. |
|
Snadná kultivace |
Ústní dlaždicová buněčná linie CAL27 nemá žádné náročné požadavky na kultivaci buněk. Je tedy snadné ji kultivovat a udržovat ve výzkumných laboratořích. |
Nevýhody
Nevýhody spojené s buněčnou linií CAL27 jsou následující:
|
In vitro model |
Buňky CAL27 slouží jako in vitro model spinocelulárního karcinomu dutiny ústní. Je však důležité poznamenat, že nemusí přesně odrážet vlastnosti a složitost původních dlaždicobuněčných nádorů. |
4.použití buněk CAL27 ve výzkumu
Buněčná linie CAL27 má široké využití v biomedicínském výzkumu. Některé z důležitých využití ve výzkumu jsou uvedeny zde.
- Biologie rakoviny: CAL27 buňky byly široce využívány ke zkoumání molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem vývoje a progrese orálního spinocelulárního karcinomu (OSCC). Vědci také studují genetické mutace, signální dráhy a důležité biomarkery související s dlaždicobuněčnými nádory. Studie provedená v roce 2021 využívala buňky CAL27 a zkoumala roli CD147 při vzniku dlaždicobuněčného karcinomu dutiny ústní. Výsledky studie ukázaly, že knockdown CD147 způsobil inhibici proliferace, migrace a invaze buněk CAL27. Kromě toho jeho downregulace také brání rozvoji lékové rezistence u nádorových buněk [2].
- Vývoj léků: CAL27 slouží jako cenný nástroj pro screening a testování protinádorových léčiv. Vědci tyto buňky využívají k testování účinnosti různých chemoterapeutik, cílených terapií a experimentálních léčiv při inhibici proliferace, růstu a životaschopnosti rakovinných buněk dutiny ústní. Kromě toho byl hodnocen také modulační účinek potenciálních protinádorových látek na dysregulované signální dráhy nádorových buněk. To může pomoci při vývoji účinné a personalizované léčby v boji proti onemocnění. Studie zkoumala protinádorový potenciál nanočástic oxidu zinečnatého s využitím buněk CAL27. Výsledky studie odhalily, že nanočástice oxidu zinečnatého vyvolaly cytotoxické účinky a také indukovaly mitofágii zprostředkovanou dráhou PINK1/Parkin u buněk rakoviny jazyka CAL27 [3]. Podobně vědci pozorovali protinádorový potenciál doxorubicinu a jeho nanoformy (Doxil) na CAL27 dlaždicobuněčném karcinomu dutiny ústní [4].
5.publikace s buněčnou linií CAL27
V této části článku se budeme věnovat několika zajímavým a nejcitovanějším publikacím o nádorových buňkách CAL27:
Tento výzkum byl publikován v časopise Frontiers in Oncology (2020). Studie zkoumala účinky vismodegibu nebo itrakonazolu proti orálnímu dlaždicobuněčnému karcinomu pomocí buněk CAL27.
Tento článek v časopise Frontiers in Genetics (2021) navrhl, že protein aktivátoru plazminogenu, urokinázy (PLAU), podporuje proliferaci, migraci a přechod buněk CAL27 z epitelu na mezenchym (EMT).
MikroRNA-145-5p zhoršuje apoptózu buněk a oxidační stres u dlaždicobuněčného karcinomu jazyka
Tento článek v Experimental and Therapeutic Medicine (2021) zjistil, že miRNA-145-5p zhoršuje oxidační stres a smrt buněk CAL27 a potlačuje signální dráhu PI3K/AKT.
Protinádorová aktivita rostlinného extraktu morinu v buňkách dlaždicobuněčného karcinomu jazyka
Tato studie v časopise Oncology Reports (2018) zkoumala protinádorovou aktivitu bioflavonoidu zvaného morin s využitím buněk CAL27.
Tento článek v časopise Journal of Ethnopharmacology (2023) zkoumal terapeutický potenciál extraktů Rosmarinus officinalis L. a Taraxacum officinale na buňky CAL27.
6.zdroje pro buněčnou linii CAL27: Protokoly, videa a další zdroje informací pro kalciovou skupinu CAL27
Dostupné zdroje o buněčné linii CAL27 jsou omezené. V této části jsme uvedli několik obecných protokolů, které vám mohou pomoci i při práci s buňkami CAL27:
- Transfekce buněk CAL27: Toto video vám pomůže naučit se obecný protokol pro transfekci plazmidové DNA.
- Subkultivace adherentních buněk: Toto video vás komplexně seznámí se subkultivaci adherentních buněčných linií.
Následující odkaz obsahuje protokol kultivace buněk CAL27.
- Buněčná linie CAL27: Tato webová stránka obsahuje informace o médiích CAL27, hustotě výsevu, době zdvojení atd. Kromě toho obsahuje protokol pro subkultivaci a manipulaci s proliferujícími a kryokonzervovanými kulturami.
Odkazy
- Liu, X., et al., LINC00472 potlačuje růst orálního dlaždicobuněčného karcinomu zacílením na osu miR-455-3p/ELF3. Bioengineered, 2022. 13(1): p. 1162-1173.
- Pan, S., et al., Knockout CD147 inhibuje proliferaci, invazi a rezistenci k lékům u lidských buněk karcinomu ústní dutiny CAL27 in Vitro a in Vivo. International Journal of Biological Macromolecules, 2021. 181: p. 378-389.
- Wang, J., et al. nanočástice oxidu zinečnatého vyvolávají toxicitu u buněčných linií rakoviny ústní dutiny CAL27 aktivací mitofágie zprostředkované PINK1/Parkinem. International Journal of Nanomedicine, 2018: s. 3441-3450.
- Abd El-Hamid, E.S., A.M. Gamal-Eldeen, and A.M.S. Eldeen, Liposome-coated nano doxorubicin induces apoptosis on oral squamous cell carcinoma CAL-27 cells. Archives of oral biology, 2019. 103: p. 47-54.