Buněčná linie BEWO

BeWo je buněčná linie odvozená od lidského choriokarcinomu, která se široce používá v biomedicínském výzkumu. Slouží jako cenný in vitro model pro zkoumání složitého procesu vývoje placenty a syncytizace lidského trofoblastu. Vědci tyto buňky využívají také ke studiu chování trofoblastových buněk, produkce hormonů a transportu látek přes placentu. Kromě toho se buňky BeWo uplatňují také ve studiích toxikologie, infekcí a přenosu nemocí.

Tento článek zahrnuje základní poznatky o buňkách BeWo, které vám mohou pomoci zabývat se jimi ve vašem výzkumu. Zahrnuje:

  1. Obecnou charakteristiku a původ BeWo buněk
  2. Buněčnou linii BeWo: Informace o kultivaci
  3. Výhody a nevýhody buněčné linie BeWo
  4. Výzkumné aplikace buněk BeWo
  5. Výzkumné publikace s buňkami BeWo
  6. Zdroje pro buněčnou linii BeWo: Protokoly, videa a další zdroje informací o BeoWo

1. Obecná charakteristika a původ buněk BeWo

Předchozí znalost původu buněčné linie a jejích obecných charakteristik je pro její použití ve vašem výzkumu zásadní. Tato část článku se zabývá původem buněčné linie BeWo, jejími charakteristickými rysy a mnoha dalšími informacemi. Dozvíte se zde: Co je buněčná linie BeWo choriocarcinoma? Co je to syncytizace BeWo? Odkud pocházejí buňky BeWo? Jaká je morfologie buněk BeWo? Jaká je ploidie BeWo?

  • Placentární buněčná linie BeWo pochází z maligního gestačního choriokarcinomu mužské fetální placenty z roku 1968 [1]. Slouží tedy jako neocenitelný model pro placentární výzkum.
  • Buňky BeWo vykazují morfologii podobnou epitelu.
  • Buňky BeWo jsou relativně malé, jejich velikost se pohybuje mezi 20 a 30 µM [2].
  • Buňky BeWo vykazují stabilní karyotyp. Jejich počet kmenových linií je hypo-tetraploidní. Modální počet chromozomů buněk BeWo je 86. Může se pohybovat od 71 do 178.
  • Buňky BeWo produkují několik hormonů, tj. lidský choriový somatomamotropin, lidský choriový gonadotropin (hCG) a steroidní hormony.
  • Buňky BeWo exprimují molekulární markery, včetně CK 7, E-kadherinu a VE-kadherinu.

Podlinie B30

B30 je sublinie buněk BeWo. Používá se ke zkoumání příjmu a transportu živin. To se připisuje jejich živému růstu na porézních membránách.

BeWo a JEG-3

Buněčné linie BeWo JEG-3 jsou odvozeny z choriových klků a používají se ve výzkumu placenty. Buňky BeWo produkují hormony v nižších hladinách než JEG-3, například lidský choriový gonadotropin (hCG) a estradiol.

Časosběrná vizualizace oplození lidského vajíčka znázorňující fáze tvorby blastocysty pozorované pod mikroskopem.

2. Buněčná linie BeWo: Informace o kultivaci

Udržování buněčné kultury může být složité, pokud neznáte klíčové detaily. Například: Jaká je doba zdvojení BeWo? Jaké je buněčné médium BeWo? Jak se kultivuje buněčná linie BeWo a Jak se zmrazují buňky BeWo?

Klíčové body pro kultivaci buněk BeWo

Doba zdvojení:

Doba zdvojení populace buněk BeWo je přibližně 30 hodin.

Adherentní nebo v suspenzi:

BeWo je adherentní buněčná linie.

Hustota výsevu buněk:

Doporučená hustota výsevu pro buňky BeWo je 1 x104 buněk/cm2. Při výsevu se z buněk odstraní staré médium a buňky se opláchnou 1 x PBS. Poté se přidá Accutase (pasážovací roztok) a buňky se inkubují 8 až 10 minut při pokojové teplotě. Poté se oddělené buňky doplní kultivačním médiem a odstředí se. Sebrané buňky se resuspendují a přelijí do nové baňky.

Růstové médium:

Pro pěstování buněk BeWo se používá médium Ham's F12K obsahující 10 % FBS, 2,0 mM L-Glutamin, 2,0 mM pyruvát sodný a 2,5 g/l NaHCO3. Médium pro buňky BeWo by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně.

Růstové podmínky:

Buňky BeWo se udržují ve zvlhčeném inkubátoru při teplotě 37 °C a s přívodem 5 % CO2.

Skladování:

Zmrazené buňky BeWo se skladují při teplotě nižší než -150 °C v elektrické mrazničce s velmi nízkou teplotou nebo v plynné fázi kapalného dusíku.

Postup zmrazování a médium:

Buňky BeWo se doporučuje zmrazovat v mrazicím médiu CM-1 nebo CM-ACF. Buňky se zmrazují metodou pomalého zmrazování. Tato metoda umožňuje pokles teploty pouze o 1 stupeň za minutu, čímž zabraňuje jakémukoli šoku a chrání životaschopnost buněk.

Proces rozmrazování:

Zmrazené buňky se rozmrazují ponořením do předem nastavené vodní lázně o teplotě 37 °C na 40 až 60 sekund, dokud nezůstane malý ledový chuchvalec. Poté se přidá čerstvé růstové médium a buňky se odstředí, aby se odstranily složky zmrazovacího média. Odebraná buněčná peleta se resuspenduje a dávkuje se do kultivační baňky k růstu.

Úroveň biologické bezpečnosti:

Pro manipulaci s buněčnými kulturami BeWo a jejich údržbu je nutná laboratoř na úrovni biologické bezpečnosti 1.

Zachycení epiteliální, polygonální morfologie a ostrůvkovitého růstu buněčné linie lidského choriokarcinomu BEWO při zvětšení 10x a 20x pod mikroskopem.

3. Výhody a nevýhody buněčné linie BeWo

Buňky BeWo vykazují jedinečné vlastnosti a mají specifické výhody a nevýhody. V této části se budeme zabývat některými z nich.

Výhody

Hlavní výhody buněčné linie BeWo pro choriokarcinom jsou:

  • In vitro model placentárních buněk

    Buňky BeWo poskytují in vitro model pro studium chování buněk trofoblastu a syncytizace placenty, který replikuje procesy náročné na pozorování in vivo.

  • Produkce hormonů

    Buňky BeWo vylučují hormony, jako je hCG a placentární laktogen, což je činí cennými pro studium hormonální regulace a výzkum reprodukční biologie.

Nevýhody

Nevýhody buněk trofoblastu BeWo jsou následující:

  • Rakovinná buněčná linie

    Buňky BeWo byly odvozeny z choriokarcinomu, což je nádor placenty. Tento původ nemusí plně reprezentovat normální funkci placentárních buněk.

4. Výzkumné využití buněk BeWo

Buněčná linie BeWo se hojně využívá ve výzkumu placenty. Zde je uvedeno několik konkrétních aplikací této buněčné linie:

  • Placenta a výzkum související s těhotenstvím: Buňky BeWo jsou klíčové pro výzkum placenty a těhotenství. Vědci je například využívají ke studiu transportu látek, včetně léčiv, živin a toxinů, přes placentární bariéru. Kromě toho také zkoumají produkci a regulaci hormonů, včetně lidského choriového gonadotropinu (hCG), placentárního laktogenu a steroidních hormonů. To je důležité pro pochopení hormonálních změn během těhotenství. Výzkum prováděný v roce 2018 zkoumal vliv bromovaných zpomalovačů hoření (BFR) na aktivitu sulfotransferázy v lidské trofoblastické buněčné linii (BeWo). Tento enzym se podílí na regulaci intracelulární hladiny hormonu štítné žlázy [3].
  • Výzkum infekcí a nemocí: Buňky BeWo se také používají ke zkoumání interakce mezi patogeny a placentárními buňkami. Tento výzkum je cenný pro pochopení nemocí, které se mohou přenášet z matky na plod, a pro vývoj strategií na ochranu zdraví plodu. Kromě toho tato buněčná linie pomáhá vědcům zkoumat komplikace, které vznikají během těhotenství, jako je například preeklampsie. Například studie provedená Michalinou Bralewskou v roce 2023 využila buněčný model trofoblastu BeWo a zjistila, že jak chromogranin A (CgA), tak z něj odvozený peptid katestatin (CST) mohou hrát roli ve složitém procesu patogeneze preeklampsie (PE) [4]. Další studie zkoumala protinádorový potenciál trichosanthinu s využitím buněčné linie choriokarcinomu BeWo. Výzkum také vyvinul dodatečné úsilí k objevení biomarkerů provedením srovnávací proteomické analýzy před a po experimentu [5].

5. Výzkumné publikace s buňkami BeWo

Zde jsou uvedeny některé významné výzkumné publikace, v nichž se objevují buňky trofoblastu BeWo.

Signalizace AMPK reguluje mitofágii a produkci mitochondriálního ATP v lidské trofoblastové buněčné linii BeWo

Tato studie v časopise Frontiers in Bioscience-Landmark (2022) navrhla, že signalizace AMPK aktivuje mitofágii v buňkách trofoblastu BeWo prostřednictvím FUNDC1 a PRKN-facilitovaných cest mitofágie. V důsledku toho mitofagie pomáhá udržovat produkci ATP a mitochondriální membránový potenciál.

Etylparaben indukuje apoptotickou buněčnou smrt v buňkách lidské placenty BeWo prostřednictvím dráhy kaspázy-3

Tento článek byl publikován v časopise Animal Cells and Systems (2020). Studie navrhuje, že ethylparaben zprostředkovává apoptózu buněk BeWo prostřednictvím regulace dráhy kaspázy 3.

Charakterizace potenciálu lidské placentární tkáně a buněčných linií (BeWo, JEG-3, JAR a HTR-8/SVneo) k nakládání s xenobiotiky a steroidy pomocí kvantitativní proteomiky

V této studii v časopise Metabolism and Disposition (2023) byly ke zkoumání ukládání xenobiotik a steroidů v buňkách využity placentární buněčné linie, včetně BeWo, JAR, JEG-3 a HTR-8/SVneo.

Apelin a apelinový receptor v lidské placentě: Exprese, signální dráha a regulace proliferace a buněčného cyklu trofoblastových buněk JEG-3 a BeWo

Tento výzkumný článek v časopise International Journal of Molecular Medicine (2020) navrhl, že apelin, ligand receptoru APJ, podporuje proliferaci buněk BeWo prostřednictvím signalizace APJ a ERK1/2, stat3 a AMPK. Mohlo by se tedy jednat o zásadní adipokin regulující vývoj placenty.

Léky proti záchvatům a výživě plodu: vliv na cholinové transportéry v lidské placentární buněčné linii

Tato studie v časopise Epilepsia (2021) zkoumala účinky fetálních živin a antiseptik na cholinové transportéry v lidské trofoblastické buněčné linii BeWo.

6. Zdroje pro buněčnou linii BeWo: Další zdroje: protokoly, videa a další materiály

Zde jsou k dispozici některé online zdroje o buňkách BeWo:

  • In vitro transfekce: Toto video vám pomůže naučit se protokol in vitro transfekce plazmidové DNA pro adherentní buňky.

Následující odkaz obsahuje informace o buněčných kulturách pro buňky BeWo:

  • BeWo: Tato webová stránka obsahuje základní informace o buněčných kulturách pro buněčnou linii BeWo. Zahrnuje informace týkající se buněčných médií a podmínek kultivace. Obsahuje také protokoly pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferačními kulturami.

Odkazy

  1. Weber, M., et al., Cytogenomika šesti lidských trofoblastických buněčných linií. Placenta, 2021. 103: p. 72-75.
  2. Kolokol'tsova, T., et al., Charakteristika trofoblastů v dlouhodobé kultuře. Bulletin experimentální biologie a medicíny, 2017. 164: p. 259-265.
  3. Leonetti, C.P., C.M. Butt a H.M. Stapleton, Disruption of thyroid hormone sulfotransferase activity by brominated flame retardant chemicals in the human choriocarcinoma placenta cell line, BeWo. Chemosphere, 2018. 197: p. 81-88.
  4. Bralewska, M., T. Pietrucha, and A. Sakowicz, Snížení hladiny CgA-Derived CST proteinu v trofoblastických buněčných liniích HTR-8/SVneo a BeWo způsobené preeklamptickým prostředím. International Journal of Molecular Sciences, 2023. 24(8): p. 7124.
  5. Hu, Y., a další, Srovnávací proteomická analýza přídavku léčiva trichosanthinu do buněčné linie BeWo. Molecules, 2022. 27(5): p. 1603.

Zjistili jsme, že se nacházíte v jiné zemi nebo používáte jiný jazyk prohlížeče, než je aktuálně zvolený. Chcete přijmout navrhované nastavení?

Zavřít