Buněčná linie BxPC-3
BxPC-3 je buněčná linie karcinomu pankreatu odvozená od člověka. Má široké uplatnění ve studiích nádorových onemocnění. Vědci tyto buňky využívají především ke studiu biologie rakoviny slinivky břišní, identifikaci terapeutických cílů a vývoji protinádorových léčiv.
Tento článek zahrnuje zásadní informace o buněčné linii BxPC-3, které vám mohou významně pomoci při práci s ní. Hlavně se v něm bude diskutovat o:
- Obecné informace a původ buněčné linie BxPC-3
- Kultivaci buněk BxPC-3
- Buněčná linie BxPC-3: Výhody a omezení
- Aplikace buněk BxPC-3 ve výzkumu
- Výzkumné publikace o buňkách BxPC-3
- Zdroje pro buněčnou linii BxPC-3: Protokoly, videa a další zdroje informací
1. obecné informace a původ buněčné linie BxPC-3
Znalost původu buněčné linie je rozhodující pro její použitelnost ve výzkumu. Znalost jejích vlastností, včetně morfologie, velikosti buněk a ploidie, usnadňuje a usnadňuje její použití. Zde se dozvíte o původu a obecných vlastnostech buněk BxPC-3: Co jsou buňky BxPC-3? Co je buněčná linie BxPC-3? Jaký je původ buněčné linie BxPC-3? Jaká je morfologie buněk BxPC-3?
- Buňky BxPC-3, lidského karcinomu slinivky břišní, byly odvozeny od 61leté Evropanky s adenokarcinomem slinivky břišní v roce 1986. Tyto buňky byly potvrzeny jako nádorové i poté, co pacientka podstoupila několik radio- a chemoterapií. Vytvořená buněčná linie je tedy neocenitelným modelem pro studium vývoje a progrese rakoviny.
- Buňky BxPC-3 mají morfologii podobnou epiteliálním buňkám.
- Modální počet chromozomů pro BxPC-3 je 59. Tyto buňky mají homozygotní deleci na chromozomu 18q, který kóduje protein SMAD4/DPC4. Kromě toho tato buněčná linie postrádá mutaci BxPC-3 kras, která je běžná u nádorů slinivky břišní. V těchto buňkách karcinomu pankreatu se také nachází delece BxPC-3 braf.
Jaký je rozdíl mezi BxPC3 a PANC-1?
Buňky BxPC-3 PADC (pankreatický duktální adenokarcinom) a PANC-1 jsou primární buněčné linie karcinomu pankreatu s epiteliální morfologií. V tomto případě mají první buňky více epiteliálních vlastností, zatímco pozdější vykazují více mezenchymálních atributů [1].
2. kultivace buněk BxPC-3
Buněčná linie BxPC-3 se široce používá v laboratořích pro výzkum rakoviny. Pro efektivní kultivaci této buněčné linie karcinomu pankreatu je třeba znát následující klíčové body. Naučíte se: Jaká je doba zdvojení pro bxpc3? Jak se kultivuje buněčná linie BxPC-3?
Klíčové body pro kultivaci buněk BxPC-3
|
Doba zdvojení populace: |
Doba zdvojení buněk BxPC-3 se pohybuje mezi 48 a 60 hodinami. |
|
Adherentní nebo v suspenzi: |
BxPC-3 je adherentní buněčná linie. |
|
Poměr rozdělení: |
Buňky BxPC-3 se dělí v poměru 1:2 až 1:4. Buňky se promyjí 1 x PBS a inkubují s pasážovacím roztokem zvaným akutáza. Po 8-10 minutách se k buňkám přidá čerstvé médium a buňky se odstředí. Pelet se opět resuspenduje v médiu a buňky se přelijí do nové kultivační nádoby pro růst. |
|
Růstové médium: |
Pro kultivaci buněčné linie BxPC-3 se používá médium RPMI 1640. Je doplněno 10% fetálním hovězím sérem, 2,1 mM stabilním glutaminem a 2,0 g/l NaHCO3, aby bylo dosaženo ideálního růstu buněk. Médium by se mělo vyměňovat 2 až 3krát týdně. |
|
Růstové podmínky: |
Buněčné kultury BxPC-3 se udržují ve zvlhčeném inkubátoru o teplotě 37 °C, který je napojen na 5% přívod CO2. |
|
Skladování: |
Zmrazené buňky se obvykle skladují při teplotě nižší než -150 °C nebo v plynné fázi kapalného dusíku, aby byla chráněna životaschopnost buněk. |
|
Postup zmrazování a médium: |
Ke zmrazení buněčných kultur BxPC-3 lze použít CM-1 nebo CM-ACF. Následuje pomalý proces zmrazování, který umožňuje pokles teploty pouze o 1 °C, aby se zabránilo šoku buněk. |
|
Postup rozmrazování: |
Zmrazené buňky BxPC-3 se rozmrazují v předem nastavené vodní lázni o teplotě 37 °C po dobu 40 až 60 sekund. Poté, co zůstane malý ledový chuchvalec, se buňky doplní čerstvým kultivačním médiem a odstředí se, aby se odstranily prvky zmrazovacího média. Poté se buněčná peleta resuspenduje a buňky se dávkují do růstové baňky. |
|
Úroveň biologické bezpečnosti: |
Buněčné kultury BxPC-3 jsou udržovány v laboratořích s úrovní biologické bezpečnosti 1. |
3. buněčná linie BxPC-3: Výhody a omezení
BxPC-3 je dobře známá buněčná linie adenokarcinomu pankreatu, která má několik výhod a omezení. Zde jsou uvedeny hlavní výhody a nevýhody této buněčné linie.
Výhody
Hlavní výhody buněk BxPC-3 jsou:
-
In vitro model karcinomu slinivky břišní
Buňky BxPC-3, odvozené od pacientů s adenokarcinomem slinivky břišní, vykazují relevantní vlastnosti, což z nich činí vhodný model pro studium chování rakoviny slinivky břišní in vitro.
-
Nádorová buněčná linie
Buňky BxPC-3 mají tumorigenní vlastnosti a mohou vytvářet nádory po injekčním podání nahým nebo imunokompromitovaným myším. Tyto nádory se velmi podobají primárním nádorům adenokarcinomu slinivky břišní, což činí xenograftový model BxPC-3 ideálním pro studium růstu a progrese rakoviny.
Omezení
Omezení spojená s buněčnou linií BxPC-3 jsou následující:
-
Zkřížená kontaminace
Buněčná linie BxPC-3, stejně jako každá jiná, s sebou nese riziko křížové kontaminace. Výzkumní pracovníci by měli být při manipulaci s těmito buňkami opatrní a dodržovat přísné protokoly pro prevenci kontaminace.
-
Pomalá rychlost růstu
Buňky BxPC-3 vykazují relativně pomalou proliferaci s dobou zdvojení mezi 48 a 60 hodinami. Tato vlastnost může vyžadovat delší inkubační dobu pro specifické experimenty, což může způsobit zpoždění v postupu výzkumu.
4. použití buněk BxPC-3 ve výzkumu
Buňky BxPC-3 mají mnoho možností využití ve výzkumu rakoviny. Mezi nejčastější aplikace patří:
- Výzkum rakoviny slinivky břišní: Buňky BxPC-3 napodobují adenokarcinom slinivky břišní, a proto se používají ke zkoumání genetických a molekulárních mechanismů, které jsou základem vývoje a růstu nádorů. Kromě toho vědci pomocí těchto buněk odhalují nové biomarkery a terapeutické cíle. Buňky BxPC-3 navíc významně exprimují angiogenní faktory, tj. interleukin-8 (IL-8), prostaglandin E2 (PGE2) a vaskulární endoteliální růstový faktor (VEGF), které je činí vhodnými pro studium angiogeneze. Angiogeneze je přitom klíčovým procesem spojeným s růstem a metastazováním rakoviny. Studie publikovaná v roce 2022 studovala, že nadměrná exprese lamininu-5 gama-2 (LAMC2) u BxPC3 PDAC (pankreatický duktální adenokarcinom) zvyšuje jeho tumorigenezi prostřednictvím regulace BxPC3 EGFR /ERK1/2/ AKT/ mTOR signální dráhy [2].
- Objevování a vývoj léčiv: BxPC-3 buněčná linie slouží jako neocenitelný model pro testování protinádorových léčiv. Výzkumníci zkoumají cytotoxické, antimetastatické a apoptotické účinky potenciálních léčiv na BxPC3 PDAC. Studie provedená Alexandrií Turnerovou a jejími kolegy v roce 2020 zkoumala apoptotické vlastnosti extraktů z plodů Elaeocarpus reticulatus u buněk karcinomu pankreatu BxPC-3 [3]. Podobně byl v roce 2020 proveden výzkum, který určil protinádorový potenciál metanolového extraktu rostliny Oxialis obtriangulata u buněk BxPC-3. Kromě toho vědci zkoumali také mechanistickou cestu, kterou rostlinný extrakt na buňky působí terapeuticky [4].
5.výzkumné publikace o buňkách BxPC-3
V této části jsou uvedeny některé nejcitovanější a nejzajímavější publikace týkající se buněčné linie BxPC-3.
Licokumaron indukuje smrt buněk pankreatického adenokarcinomu BxPC-3 inhibicí DYRK1A
Tato publikace v časopise Chemico-Biological Interactions (2020) se zabývala apoptotickými účinky přírodního produktu, likokumaronu, na buňky karcinomu slinivky břišní BxPC-3.
Tento výzkumný článek byl publikován v časopise Anticancer Research (2022). Studie předpokládá, že hydroxychlorochin způsobuje smrt buněk BxPC3 inhibicí genu BCL-XL.
Tento výzkum byl publikován v roce 2020 v časopise Journal of Cellular Biochemistry. Studie uvádí, že přírodní sloučenina salidrosid vykazuje protinádorové účinky u buněk BxPC-3 regulací signalizační kaskády HIF-1α (hypoxií indukovatelný faktor) a LOXL2.
Tento článek v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy naznačuje, že ibrutinib lze použít jako skvělý radiosenzibilizátor u pacientů s karcinomem pankreatu. Studie in vitro na buňkách BxPC-3 ukazuje, že snižuje fosforylaci EGFR a expresi pAKT a downstream genů regulovaných radioterapií.
Tato studie v časopise Integrative Cancer Therapies navrhla, že přírodní produkt, chelidonin, působí apoptoticky v lidských pankreatických buňkách BxPC-3 prostřednictvím regulace signalizace BxPC3 p53 a GADD45a.
6. zdroje pro buněčnou linii BxPC-3: Další zdroje: protokoly, videa a další
Buněčná linie BxPC-3 má mnoho zajímavých předností, které ji činí vhodnou pro výzkumné použití. Mnoho online zdrojů o buněčné linii BxPC-3 zmiňuje její manipulaci, údržbu a transfekční protokols.
- Transfekce BxPC3: Toto video je průvodcem, který krok za krokem seznamuje s transfekčním protokolem pro buňky BxPC-3.
Tato část článku obsahuje několik odkazů vysvětlujících protokoly kultivace buněk BxPC3.
- Buněčná kultura BxPC3: Tato webová stránka vám pomůže naučit se protokoly pro subkultivaci a manipulaci s kryokonzervovanými a proliferačními kulturami BxPC-3.
Odkazy
- Kim, Y., et al., Comparative proteomic profiling of pancreatic ductal adenocarcinoma cell lines (Srovnávací proteomické profilování buněčných linií pankreatického duktálního adenokarcinomu ). Mol Cells, 2014. 37(12): p. 888-98.
- Kirtonia, A., et al., Overexpression of laminin-5 gamma-2 promotes tumorigenesis of pancreatic ductal adenocarcinoma through EGFR/ERK1/2/AKT/mTOR cascade. Cellular and Molecular Life Sciences, 2022. 79(7): p. 362.
- Turner, A., et al., Elaeocarpus reticulatus fruit extracts reduce viability and induce apoptosis in pancreatic cancer cells in vitro. Molecular biology reports, 2020. 47: p. 2073-2084.
- An, E.-J., et al., Anti-cancer potential of Oxialis obtriangulata in pancreatic cancer cell through regulation of ERK/Src/STAT3-mediated pathway. Molecules, 2020. 25(10): p. 2301.