Buňky BEAS-2B – Buňky BEAS-2B ve výzkumu respiračních onemocnění: Komplexní průvodce
BEAS-2B je imortalizovaná a netumorigenní lidská plicní epiteliální buněčná linie. Jedná se o široce používaný in vitro model ke studiu reakce plicních buněk na různé karcinogeny a toxické látky. Kromě toho je cenným výzkumným nástrojem pro studium různých respiračních infekcí a onemocnění, jako je COVID-19 a karcinomy plic.
- Růstové médium
- K kultivaci plicní buněčné linie BEAS-2B se používá médium BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) obsahující 10 % fetálního bovinního séra. Médium by se mělo vyměňovat každé 2 až 3 dny.
- Doba zdvojnásobení
- Doba zdvojnásobení populace BEAS-2B je přibližně 26 hodin.
- Typ růstu
- BEAS-2B je epiteliální adhezivní buněčná linie.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- BSL-1
- K dispozici u
- Cytion — Objednat BEAS-2B
V tomto článku se budeme zabývat téměř všemi aspekty plicní buněčné linie BEAS-2B, včetně jejího původu, informací o buněčné kultuře, výhod, nevýhod a aplikací ve výzkumu. Zejména se budeme zabývat:
- Původ a obecné charakteristiky buněk BEAS-2B
- Buněčná linie BEAS-2B: Informace o kultivaci
- Výhody a nevýhody buněk BEAS-2B
- Využití buněčné linie BEAS-2B ve výzkumu
- Buňky BEAS-2B: Výzkumné publikace
- Protokoly pro kultivaci buněk
1. Původ a obecné charakteristiky buněk BEAS-2B
První věcí, kterou u buněčné linie hledáte, je její původ a obecné charakteristiky. Zde se dozvíte o hlavních vlastnostech a původu lidských bronchiálních epitelových buněk BEAS-2B. Dozvíte se: Co je to buněčná linie plic BEAS-2B? Jaký typ buněk představuje Beas 2B? Jaký je původ buněk BEAS-2B?
- BEAS-2B, buněčná linie bronchiálního epitelu, byla vyvinuta z nenádorové lidské plicní tkáně v roce 1988 skupinou Curtise C. Harrise [1].
- Buňky BEAS-2B mají epiteliální morfologii.
HBEpC vs. BEAS-2B
HBEpC jsou primární buňky lidského bronchiálního epitelu. Podobně jako BEAS-2B se jedná o normální lidské bronchiální epitelové buňky. Ve srovnání s imortalizovanými buňkami BEAS-2B mají však omezenou životnost. Obě buněčné linie lze použít ke studiu plicní biologie, toxikologie a modelování nemocí.
Buněčná linie BEAS-2B: Informace o kultivaci
Informace o kultivaci buněčné linie vám mohou usnadnit práci s ní. V této části článku se dozvíte všechny základní informace o kultivaci plicní buněčné linie BEAS-2B. Zejména se dozvíme: Jaká je doba zdvojnásobení buněk BEAS-2B? Jaké je médium pro BEAS-2B? Je buněčná linie BEAS-2B adhezivní? Jak se kultivují buňky BEAS-2B?
Klíčové body pro kultivaci buněk BEAS-2B
Doba zdvojnásobení:
Doba zdvojnásobení populace BEAS-2B je přibližně 26 hodin.
Adhezivní nebo v suspenzi:
BEAS-2B je epiteliální adhezivní buněčná linie.
Hustota buněk:
Doporučená buněčná hustota pro buněčnou linii BEAS-2B je 1 až 2 × 104 buněk/cm2. Adherentní buňky BEAS-2B se propláchnou fosfátovým pufrem a inkubují se s Accutase při pokojové teplotě po dobu několika minut. Po disociaci buněk se přidá čerstvé médium a buňky se shromáždí odstředěním. Sklizené buňky se opatrně resuspendují a přelijí do nové baňky pro růst.
Růstové médium:
Pro kultivaci plicní buněčné linie BEAS-2B se používá médium BEGM (Bronchial Epithelial Cell Growth Medium) obsahující 10 % fetálního bovinního séra. Médium by se mělo vyměňovat každé 2 až 3 dny.
Podmínky růstu:
Kultura BEAS-2B se udržuje při teplotě 37 °C ve zvlhčeném inkubátoru s nepřetržitým přívodem 5 % CO2.
Skladování:
Zmrazené zkumavky s buňkami BEAS-2B lze skladovat v plynné fázi kapalného dusíku nebo v elektrickém mrazáku při teplotě pod -150 °C.
Proces zmrazování a médium:
K zmrazení plicní buněčné linie BEAS-2B se používají zmrazovací média CM-1 nebo CM-ACF. Buňky se zmrazují tak, že se teplota snižuje pouze o 1 °C za minutu, aby se zachovala životaschopnost buněk. Tento typ metody se nazývá pomalé zmrazování.
Proces rozmrazování:
Zmrazené nebo kryokonzervované kultury BEAS-2B se rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C obsahující antimikrobiální látku po dobu 40 až 60 sekund. Poté se k buňkám přidá médium a mohou se přímo kultivovat v nových baňkách nebo se mohou odstředit, aby se odstranily složky mrazicího média. Poté se odebrané buňky resuspendují a kultivují. V prvním případě se mrazicí médium odstraní po 24 hodinách.
Úroveň biologické bezpečnosti:
Pro manipulaci s kulturami BEAS-2B jsou vyžadovány laboratoře úrovně biologické bezpečnosti 1.
Výhody a nevýhody buněk BEAS-2B
Stejně jako jiné buněčné linie mají i buňky BEAS-2B své klady a zápory. Některé z nich jsou popsány níže.
Výhody
Mezi výhody buněčné linie BEAS-2B patří:
Imortalizovaná buněčná linie
Lidská bronchiální epiteliální buněčná linie BEAS-2B byla imortalizována. Proto pokračuje v růstu, aniž by vstoupila do senescence. Tato vlastnost buněk BEAS-2B eliminuje potřebu opakované extrakce primárních lidských plicních epiteliálních buněk s kratší životností.
Snadná kultivace
Kultury BEAS-2B se snadno udržují. Buňky bez problémů rostou a množí se za standardních kultivačních podmínek. Nejsou kladeny žádné náročné ani složité požadavky na kultivaci buněk.
Lidský původ
Buněčná linie BEAS-2B má lidský původ a relevanci. Je tedy ideálním in vitro modelem pro studium reakcí, chování a procesů lidských epitelových buněk dýchacích cest.
Nevýhody
Nevýhody spojené s plicní buněčnou linií BEAS-2B jsou:
Transformované lidské plicní epitelové buňky
Buňky BEAS-2B jsou transformovány virem Ad12-SV40 2B, což může změnit jejich chování a reakce ve srovnání s původními bronchiálními epitelovými buňkami odvozenými z lidské plicní tkáně.
Aplikace buněčné linie BEAS-2B ve výzkumu
Buněčná linie BEAS-2B nabízí několik aplikací v biomedicínském výzkumu. Mezi běžné aplikace buněk BEAS-2B patří:
- Toxikologie: Buňky BEAS-2B se často používají k výzkumu genotoxicity a cytotoxicity různých toxinů, látek znečišťujících životní prostředí a chemikálií. Vědci využívají tuto bronchiální epiteliální buněčnou linii k hodnocení škodlivých účinků těchto látek na zdraví plic. Kromě toho také studují základní molekulární mechanismy. Například studie provedená v roce 2021 hodnotila toxicitu kovového kadmia v buněčné linii BEAS-2B. Výsledky výzkumu odhalily, že kadmium vyvolalo buněčnou smrt a poškození mitochondrií v plicní buněčné linii BEAS-2B prostřednictvím modulace signální dráhy MAPK [2]. Jiná studie použila buněčnou linii BEAS-2B k hodnocení toxicity nanočástic oxidu zinečnatého za oxidačního stresu [3].
- Modelování respiračních onemocnění: Buněčná linie BEAS-2B je vynikajícím výzkumným nástrojem a in vitro modelem pro studium respiračních onemocnění, jako je chronická obstrukční plicní nemoc (CHOPN), astma, rakovina plic a virové infekce, jako je SARS-CoV-2. Výzkumníci mají tendenci vyvolávat stavy související s onemocněním v buněčné linii BEAS-2B a studovat základní buněčné a molekulární mechanismy. To pomáhá identifikovat potenciální cíle pro léky a vyvíjet personalizované terapie. Výzkum provedený v roce 2022 využil buněčnou linii BEAS-2B a studoval roli estrogenu a jeho receptorů při infekci SARS-CoV-2. Výsledky odhalily, že vyšší exprese estrogenového receptoru GPER1 snižuje virovou zátěž BEAS-2B SARS-CoV-2. Může se tedy podílet na virové infekci nebo replikaci SARS-CoV-2 [4].
5. Buňky BEAS-2B: Vědecké publikace
Níže uvádíme několik zajímavých a nejčastěji citovaných výzkumných studií zabývajících se buňkami BEAS-2B.
Toxicita grafenu v normálních lidských plicních buňkách (BEAS-2B)
Tato studie byla publikována v roce 2011 v časopise Journal of Biomedical Nanotechnology. Výzkum naznačil, že oxid grafitu indukuje apoptózu a cytotoxicitu v normální linii bronchiálních epitelových buněk (BEAS-2B).
Tento výzkumný článek byl publikován v časopise Journal of Microbiology and Biotechnology (2014). Tato studie zkoumala terapeutický potenciál naringeninu, flavonoidu, v buněčné linii BEAS-2B. Výsledky naznačují, že naringenin chrání plicní buňky BEAS-2B před toxicitou vyvolanou paraquatem nebo oxidačním poškozením.
Tato studie byla publikována v časopise Inhalation Toxicology (2011). V ní vědci hodnotili toxický účinek magnetických nanočástic s amorfními křemičitými povlaky na buněčnou linii BEAS-2B in vitro.
Tento článek v časopise Biomedicine & Pharmacotherapy (2022) navrhuje, že kyselina ursodeoxycholová může bránit abnormální migraci epitelových buněk dýchacích cest a zabránit poškození způsobenému interakcí spike proteinu SARS-CoV-2 a ACE-2. Může tak pomoci obnovit bazální vrstvu epitelu.
Účinky radonu na apoptózu indukovanou miR-34a v lidských bronchiálních epiteliálních buňkách BEAS-2B
Tato studie byla publikována v roce 2019 v časopise Journal of Toxicology and Environmental Health. Výsledky výzkumu uvádějí, že chronická expozice radonu může podporovat karcinogenezi v lidských bronchiálních epiteliálních buňkách (BEAS-2B) aktivací mikroRNA-34a.
Protokoly pro buněčné kultury
Zde je uveden protokol pro kultivaci buněk BEAS-2B.
- Subkultivace BEAS-2B: Tento dokument vám pomůže seznámit se s médii BEAS-2B a postupy subkultivace.
- Buněčná linie BEAS-2B: Tato webová stránka obsahuje všechny základní informace, které potřebujete k zahájení práce s buněčnou linií BEAS-2B, včetně médií a protokolů pro manipulaci s proliferujícími a kryokonzervovanými kulturami.
Reference
- Han, X., et al., Lidské plicní epiteliální buňky BEAS-2B vykazují charakteristiky mezenchymálních kmenových buněk. PLoS One, 2020. 15(1): s. e0227174.
- Cao, X., et al., Kadmium indukovalo apoptózu buněk BEAS-2B a poškození mitochondrií prostřednictvím signální dráhy MAPK. Chemosphere, 2021. 263: s. 128346.
- Heng, B.C., et al., Toxicita nanočástic oxidu zinečnatého (ZnO) na lidské bronchiální epiteliální buňky (BEAS-2B) je umocněna oxidačním stresem. Food and Chemical Toxicology, 2010. 48(6): s. 1762–1766.
- Costa, A.J., et al., Nadměrná exprese estrogenového receptoru GPER1 a léčba G1 snižuje infekci SARS-CoV-2 v bronchiálních buňkách BEAS-2B. Molecular and Cellular Endocrinology, 2022. 558: s. 111775.