Buňky A431 - hloubková analýza buněk epidermoidního karcinomu v dermatologickém výzkumu

A431 je buněčná linie lidského epidermoidního karcinomu. Je široce používána v biomedicínském výzkumu, zejména v biologii rakoviny, imunitně-onkologických a toxikologických studiích. Buňky A431 navíc nadměrně exprimují EGFR (receptor pro epidermální růstový faktor), a používají se tak jako cenný in vitro model pro studium buněčného cyklu a signálních drah souvisejících s rakovinou.

Tento článek vysvětluje základy nádorové buněčné linie A431. Dozvíte se následující informace:

A431: Obecná charakteristika a původ
Buněčná linie A431: Informace o kultivaci
Výhody a nevýhody buněčné linie A431
Výzkumné aplikace buněk A431
Výzkumné publikace s buňkami A431
Zdroje pro buněčnou linii A431: Protokoly, videa a další zdroje informací o vozidle A431

1. A431 cells: Obecná charakteristika a původ

Tato část článku vám pomůže dozvědět se obecné informace o buněčné linii A431, které potřebujete znát před prací s ní. Například jaký je původ Co je buněčná linie A431? Jaké jsou vlastnosti buněčné linie A431? Jaká je morfologie buněk A431? Odkud buňky A431 pocházejí?

A431, lidská buněčná linie rakoviny kůže, byla získána z epidermis 85leté pacientky s epidermoidním karcinomem [1]. Byla založena D. J. Giardem a dalšími, kteří vyvinuli mnoho dalších buněčných linií ze solidních nádorů.
Buňky A-431 mají epiteliální morfologii. Agregují se a vytvářejí buněčné shluky.
Buněčná linie rakoviny kůže a431 je hypertriploidní. Modální počet chromozomů této buněčné linie je 74, což se vyskytuje přibližně u 36 % buněk. Přibližně v 1 % buněčné populace se vyskytují i vyšší ploidie.

Nádor rostoucí pod kůží a infiltrující podkožní tkáně.

2.buněčná linie A431: Informace o kultivaci

Znalost požadavků a postupů kultivace buněčné linie může usnadnit manipulaci s ní. Tato část článku vám pomůže seznámit se s klíčovými body pro kultivaci buněčné linie A431. Dozvíte se například: Jaká je doba zdvojení buněk A431? Je linie nádorových buněk A431 adherentní? Jaké růstové médium se používá pro A431?

Klíčové body pro kultivaci buněk A431

Doba zdvojení:	Doba zdvojení populace buněk A431 se pohybuje od 80 do 100 hodin.
Adherentní nebo v suspenzi:	A431 je adherentní buněčná linie.
Hustota výsevu:	pro buněčnou linii A431 je ideální hustota 1 x¹⁰⁴ ^buněk/cm2. Při této hustotě trvá téměř 4 dny, než se buňky slijí. Adherentní buňky se promyjí PBS (1x) a inkubují s pasážovacím roztokem Accutase. Poté byly buňky resuspendovány v kultivačním médiu a odstředěny. Sklizené buňky byly opět resuspendovány a rozděleny do nových baněk pro růst.
Růstové médium:	Ke kultivaci buněčné linie A431 se používá médium DMEM doplněné 10 % fetálního hovězího séra, 4,5 g/l glukózy, 1,0 mM pyruvátu sodného, 1,5 g/l NaHCO3 a 4 mM L-Glutaminu. Médium by se mělo vyměňovat každé 2 až 3 dny v týdnu.
Růstové podmínky:	Rakovinné buňky A431 se pěstují ve zvlhčeném inkubátoru se zdrojem 5 % CO2 při teplotě 37 °C.
Skladování:	Buněčná linie může být skladována v elektrickém mrazáku nebo v plynné fázi kapalného dusíku při teplotě nižší než -150 °C, protože to pomáhá chránit životaschopnost buněk.
Postup zmrazování a médium:	CM-1 nebo CM-ACF jsou dvě vysoce doporučená média pro zmrazování buněk A431. Buňky se zmrazují pomocí pomalé metody zmrazování, která umožňuje pokles teploty pouze o 1 stupeň za minutu.
Postup rozmrazování:	Zmrazené buňky A431 se rozmrazují ve vodní lázni o teplotě 37 °C obsahující antimikrobiální činidlo po dobu 40 až 60 sekund. Když zůstane jen malý ledový chuchvalec, přidají se buňky s kultivačním médiem a odstředí se. Sklizené buňky se resuspendují a přelijí do kultivačních baněk pro růst.
Úroveň biologické bezpečnosti:	Pro manipulaci s kulturami A431 a jejich udržování se doporučuje úroveň biologické bezpečnosti 1.

A-431 při různých hustotách buněk.

3.výhody a nevýhody buněčné linie A431

Buněčná linie A431 má odlišné vlastnosti a nabízí několik výhod a nevýhod. Některé z nich jsme shrnuli níže.

Výhody

Hlavní výhody nádorové buněčné linie A431 jsou:

Nadměrná exprese EGFR	Buňky A431 nadměrně exprimují receptor pro epidermální růstový faktor (EGFR). Slouží jako pozitivní kontrola pro studium signalizace EGFR a jejího vlivu na rakovinu. Používají se také k hodnocení nových terapií rakoviny.
Nádorová aktivita	Buňky A431 jsou tumorigenní a mají schopnost vytvářet nádory. Lze je použít k vývoji xenografických modelů rakoviny, které jsou cenným nástrojem pro studium dynamiky růstu nádorů a hodnocení nových způsobů léčby rakoviny.

Nevýhody

Nevýhodami buněk A431 jsou:

Genetické abnormality	A431 je nádorová buněčná linie obsahující genetické mutace a změny, které ji mohou odlišovat od charakteristik původního nádoru.
Mikrobiální kontaminace	A431 je náchylná k mikrobiální kontaminaci, především bakteriální. Udržování standardních aseptických kultivačních podmínek však může pomoci zabránit takové kontaminaci buněčných kultur A431.

430,00 €*

Obsah: 1.5 milliliter

Ceny bez daní a nákladů na dopravu

cryovial

Číslo výrobku: 300112

4. Výzkumné využití buněk A431

Buněčná linie A431 se hojně používá ve výzkumu rakoviny. Zde je uvedeno několik slibných aplikací této buněčné linie pro rakovinu kůže. Biologie rakoviny: Buněčná linie A431 pro rakovinu kůže je skvělým výzkumným nástrojem pro zkoumání buněčných a molekulárních mechanismů, které řídí růst, vývoj, metastazování a invazi rakoviny.

Vědci tuto buněčnou linii hojně využívají k intenzivnímu studiu buněčných signálních drah zapojených do různých procesů v nádorových buňkách. Například studie provedená v roce 2018 zkoumala, že signální dráha PI3K/AKT/mTOR se podílí na proliferaci nádorových buněk a inhibice této dráhy indukuje apoptózu u buněk kožního nádoru A431 [2]. Kromě toho jiná studie také uvádí podíl dráhy PI3K/AKT/mTOR na metastazování kožních nádorových buněk a přechodu z epitelu na mezenchym (EMT), což naznačuje její klíčovou roli při vývoji a progresi rakoviny [3]. Testování a hodnocení léčiv: Buňky A431 se používají k hodnocení účinnosti a efektivity potenciálních kandidátů na protinádorová léčiva. Vědci zjišťovali účinky léčiv na proliferaci, metastazování, invazi a apoptózu nádorových buněk pomocí několika laboratorních experimentů - výzkum provedl Nurhidayah Ab. Rahim a jeho kolegové využili buňky A431 a hodnotili terapeutický potenciál biogenně syntetizovaných nanočástic stříbra z rostliny Alstonia angustiloba v roce 2022. Výsledky ukázaly, že angustiloba-AgNPs působí antiproliferačně na buňky skvamózního karcinomu kůže [4]. Xenograftové modely nádorů: Buněčná linie A431 je tumorigenní a po inokulaci do myšího modelu může vytvářet nádory. Je tedy užitečným nástrojem pro vývoj myších xenotransplantačních modelů ke zkoumání biologie rakoviny in vivo. Několik studií použilo nádorovou buněčnou linii A431 k vývoji nádorových xenograftových modelů. Například Yu Jin Lim a jeho tým vyvinuli myší model kožního nádorového xenograftu s použitím buněk A431 k posouzení protinádorových a radiosenzitizujících účinků exogenního epidermálního růstového faktoru (EGF) in vivo [5]. 5. V roce 2010 byl na základě výsledků studie vytvořen myší model kožního nádoru s použitím buněk A431. Výzkumné publikace s buňkami A431 Zde jsou uvedeny některé významné výzkumné publikace, v nichž se objevuje buněčná linie karcinomu kůže A431. Účinnost biopolymerních PVA-AuNPs a PCL-Curcumin loaded electrospun nanofibers a jejich protinádorová aktivita proti buněčné linii karcinomu kůže A431 Tento článek byl publikován v Materials Today Communications v roce 2020. Studie hodnotila protinádorový potenciál poly-ε-kaprolaktonu s kurkuminem naložených elektrospunových nanovláken a polyvinylalkoholu-AuNPs proti rakovinným buňkám A431. miRNA-221 podporuje progresi kožního spinocelulárního karcinomu cílením na PTEN Tato studie publikovaná v Cellular & Molecular Biology Letters (2019) navrhuje, že mikroRNA-221 hraje onkogenní roli u kožního spinocelulárního karcinomu cílením na gen PTEN. Houbový vinkristin z Eutypella spp-CrP14 izolovaný z Catharanthus roseus indukuje apoptózu u buněčné linie lidského dlaždicového karcinomu A431 Tento výzkum publikovaný v BMC Complementary Medicine and Therapies (2016) naznačuje, že vinkristin, sekundární metabolit izolovaný z houby Eutypella spp - CrP14, indukuje apoptózu u buněk A431. Nadměrná exprese CDC42SE1 v buňkách A431 snížila proliferaci buněk inhibicí dráhy Akt Tato studie byla publikována v roce 2019 v časopise Cells. Tento výzkum navrhl gen CDC42SE1 jako důležitý biomarker progrese rakoviny kůže, protože jeho downregulace usnadňuje tumorigenezi. Metformin inhibuje proliferaci buněk A431 modulací signální dráhy PI3K/Akt Tento výzkum byl publikován v roce 2015 v časopise Experimental and therapeutic medicine. Navrhoval, že metformin potlačuje proliferaci buněčné linie rakoviny kůže a431 regulací signální dráhy PI3K/Akt. 6. V roce 2015 se objevily výsledky výzkumu. Zdroje pro buněčnou linii A431: Zde je několik online zdrojů, které představují buněčnou linii A431 pro rakovinu kůže: Transfekce buněk A-431: Následující odkaz obsahuje informace o buněčných kulturách pro buňky A431: Tento odkaz obsahuje průvodce transfekcí nádorových buněk A431 krok za krokem. Buněčná linie rakoviny A431: Tento odkaz obsahuje nezbytné informace o buněčné kultuře buněčné linie A431. Zahrnuje kultivační média, hustotu buněk, zacházení s kryokonzervovanými a proliferačními kulturami atd. Kultivace buněk A431: Tato webová stránka obsahuje stručný protokol kultivace buněčné linie A431.

Odkazy:

Quadri, M., et al., Investigating Cutaneous Squamous Cell Carcinoma in vitro and in vivo: Novel 3D Tools and Animal Models (Zkoumání kožního dlaždicobuněčného karcinomu in vitro a in vivo: nové 3D nástroje a zvířecí modely). Front Med (Lausanne), 2022. 9: p. 875517.

Zeng, N., et al., Anticancer activity of caffeic acid n-butyl ester against A431 skin carcinoma cell line occurs via induction of apoptosis and inhibition of the mTOR/PI3K/AKT signaling pathway Retraction in/10.3892/mmr. 2021.12011.

Molecular medicine reports, 2018. 17(4): p. 5652-5657.

Rahaman, A., a další, Eukalyptol se zaměřuje na dráhu PI3K/Akt/mTOR a inhibuje metastazování rakoviny kůže.

Carcinogenesis, 2022. 43(6): p. 571-583. Rahim, N.A., et al., Investigation of antiproliferative mechanisms of Alstonia angustiloba-silver nanoparticles in skin squamous cell carcinoma (A431 cell line).

Journal of Molecular Structure, 2022. 1250: s. 131814. Lim, Y.J., et al., Tumor growth suppression and enhanced radioresponse by an exogenous epidermal growth factor in mouse xenograft models with A431 cells.

Výzkum a léčba rakoviny: Official Journal of Korean Cancer Association, 2015. 47(4): p. 921-930.