Клетки U87MG – Изследвания на глиобластома с използване на U87MG и тяхното значение за проучванията на рака на мозъка
U-87 MG, клетъчната линия от първична човешка глиобластома, се използва широко в биологичните изследвания. По-конкретно, тези клетки се използват в областта на невронауките и имуноонкологията.
- Среда за отглеждане
- Клетъчната линия U-87 MG се култивира в EMEM (минимална есенциална среда на Игъл), обогатена с 1,0 g/L L-глюкоза, 2,0 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM натриев пируват и 10% разтвор на FBS. Средата трябва да се подменя на всеки 2 до 3 дни.
- Време за удвояване
- Клетките U 87 MG имат време за удвояване на популацията в диапазона от 18 до 38 часа.
- Тип растеж
- U 87 MG е адхезивна клетъчна линия. Клетките имат удължена форма и растат като монослоеве.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Налична от
- Cytion — Поръчайте U-87 MG
- Общи характеристики и произход на клетъчната линия U-87 MG
- Информация за култивирането на клетки U-87 MG
- Предимства и недостатъци на клетките U-87 MG
- Изследователски приложения с участието на клетки U-87 MG
- Поръчайте клетъчната линия U-87 MG за глиом още днес
- Клетъчна линия U-87 MG: Научни публикации
- Ресурси за клетките U-87 MG: протоколи, видеоклипове и др.
- По-задълбочен поглед върху изследванията на глиома U-87 MG: често задавани въпроси
- Източници
- Често задавани въпроси
Общи характеристики и произход на клетъчната линия U-87 MG
В тази секция ще разгледаме произхода и общите характеристики на клетъчната линия U87. Ще научите какво представляват клетките U-87 MG, откъде произхождат клетките U87, какво е пълното наименование на U-87 MG, какъв е размерът на клетките U87 и каква е морфологията на клетъчната линия U87.
- Клетъчната линия U87 е клетъчна линия на глиобластома, астроцитом. Тя е създадена през 1966 г. в Университета в Упсала. Клетките са получени от 44-годишен мъж от кавказки произход, страдащ от глиобластома. Тази клетъчна линия официално се нарича U 87 MG, което означава „Uppsala 87 Malignant Glioma“ (злокачествен глиом Упсала 87).
- Клетките U 87 MG имат морфология, подобна на епителните клетки.
- Размерът на клетките U 87 MG варира между 12 и 14 µm в диаметър.
- Тази клетъчна линия от човешка глиобластома е хиподиплоидна и притежава модален брой хромозоми 44 при приблизително 48% от клетъчната популация. Въпреки това, по-високи плоидии също се срещат при 5,9% от клетъчната популация.
Информация за култивирането на клетки U-87 MG
Преди да започнете работа с клетки U 87 MG, трябва да се запознаете със следните ключови моменти при култивирането на тези глиобластомни клетки. По-конкретно, трябва да знаете: Какво е времето за удвояване на популацията на клетките U 87 MG? Какви среди се използват за култивиране на клетки U87? Каква е плътността на засяване на клетъчната линия U-87 MG?
Ключови моменти при култивирането на клетки U-87 MG
Време за удвояване на популацията:
Клетките U 87 MG имат време за удвояване на популацията в диапазона от 18 до 38 часа.
Адхезивни или в суспензия:
U 87 MG е адхезивна клетъчна линия. Клетките имат удължена форма и растат като монослоеве.
Плътност на засяване:
Препоръчва се клетъчната линия на глиобластома U 87 MG да се засява при клетъчна плътност от 1 x 104 клетки/cm2. Адхезивните U87 клетки се промиват с 1 x PBS и се инкубират с разтвор Accutase. След това дисоциираните клетки се центрофугират и се събират. Клетките се ресуспендират внимателно и се добавят в нови колби, съдържащи среда за растеж.
Среда за растеж:
Клетъчната линия U 87 MG се култивира в EMEM (минимална есенциална среда на Игъл), обогатена с 1,0 g/L L-глюкоза, 2,0 mM L-глутамин, 2,2 g/L NaHCO3, 1% NEAA, 1 mM натриев пируват и 10% разтвор на FBS. Средата трябва да се подменя на всеки 2 до 3 дни.
Условия за растеж:
За оптимален растеж клетките U-87 MG изискват овлажнен инкубатор с 5% CO₂ и температура 37°C.
Съхранение:
Клетките U87 се съхраняват или във фазата на пари на течен азот, или при температура под -150 °C, за да се поддържа максималната жизнеспособност на глиобластомните клетки.
Процес на замразяване и среда:
За замразяването на клетките U 87 MG са подходящи средите за замразяване CM-1 или CM-ACF. Препоръчва се бавен процес на замразяване, тъй като той предпазва клетките от шок и запазва тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:
Флаконите с замразена клетъчна линия U-87 MG се размразяват във водна баня при 37 °C. Клетките се добавят към среда за растеж, ресуспендират се и се прехвърлят за култивиране в нови колби. В противовес на това, клетките U87 могат да се центрофугират, за да се отстрани средата за замразяване, и след това да се култивират.
Ниво на биологична безопасност:
За работа с клетъчни култури U 87 MG се изисква ниво на биологична безопасност 1.
Предимства и недостатъци на клетките U-87 MG
Когато мислим за клетъчна линия, първото нещо, което ни хрумва, е: Какви са предимствата на използването на клетки U-87 MG? Какви са недостатъците на клетките U-87 MG?
Предимства
Клетъчните линии U-87 MG се използват широко в научните изследвания. Някои от предимствата, свързани с тази клетъчна линия, са:
Предимства
- Лесни за отглеждане: Клетките U-87 MG са лесни за поддържане в култура. Те не изискват специфични или сложни условия за отглеждане.
- Хомогенност: U-87 MG е хомогенна клетъчна линия. Повечето клетки в популацията притежават еднакъв генетичен състав и следователно споделят сходни характеристики. Тези клетки се използват за изучаване на клетъчни процеси, скрининг на лекарства и тестване.
- Добре охарактеризирана: Тази клетъчна линия на глиобластома е добре охарактеризирана по отношение на характеристиките на растежа, морфологията и генната експресия, което я превръща в ценен инструмент за научни изследвания.
Недостатъци
- Ограничена приложимост: U-87 MG е клетъчна линия на глиобластома, така че приложенията ѝ са ограничени предимно до изучаване на глиобластоми и свързаните с тях молекулярни механизми. Тя може да не е подходяща за изследване на други видове рак.
Изследователски приложения с клетки U-87 MG
Клетъчната линия на глиобластома U87MG се използва широко в изследванията на рака, особено в изследванията на глиобластомата. Някои от приложенията на клетките U 87 MG в научните изследвания са:
- Изследвания в областта на биологията на рака: Клетъчната линия U87 се използва за изучаване на растежа и развитието на рака, основните молекулярни механизми, сигналните пътища и туморната микросреда. В проучване, публикувано през 2020 г., е използван in vitro модел на глиобластома – клетъчната линия U-87 MG – за изследване на гена BMAL1 (Basic Helix-Loop-Helix ARNT Like 1) като терапевтична мишена. Резултатите показаха, че генът BMAL1 инхибира пролиферацията, миграцията и инвазията на глиобластомните клетки чрез потискане на експресията на гените за циклин B1, металопротеиназа-9 и фосфо-AKT [1]. Друго проучване, проведено през 2019 г., използва клетъчната линия U87 и установи, че понижената експресия на транскрипционния фактор LITAF (Lipopolysaccharide-induced tumour necrosis factor-alpha factor), индуциран от липополизахариди, може да повиши радиочувствителността на глиомните клетки чрез повишаване на експресията на FOXO-1. LITAF е известен също като p53-индуциран ген 7 (PIG7) [2].
- Откриване и разработване на лекарства: Клетките U-87 MG могат да се използват за скрининг и тестване на лекарства, което позволява на изследователите да идентифицират нови потенциални противоракови лекарства и да оценят тяхната ефикасност и токсичност. В едно проучване е използвана клетъчната линия на глиобластома U 87 MG за оценка на противораковия и антиоксидантния потенциал на екстракта от Inula helenium (L.) [3]. По подобен начин в друга публикация се споменава използването на клетъчната линия U87 за тестване на цитотоксичния и апоптотичния ефект на растителни екстракти [4]. Освен това в изследване, публикувано през 2018 г., е проучен цитотоксичният ефект на сесквитерпеновите алкалоиди, извлечени от растения от рода Nuphar, върху чувствителни и лекарствено-устойчиви клетъчни линии U 87 MG [5].
Поръчайте клетъчната линия U87 MG Glioma още днес
Клетъчна линия U-87 MG: Научни публикации
Ето някои от най-известните научни публикации, посветени на клетъчната линия U87 MG.
Тази статия, публикувана в Neuroreport през 2018 г., предлага хипоксията да може да увеличи миграцията и инвазията на човешките глиобластомни клетки чрез регулиране на сигналния път PI3K/Akt/mTOR/HIF-1α.
Това проучване е публикувано в списанието „Frontiers in Pharmacology“ през 2020 г. Резултатите от изследването сочат, че флавоноидът ериодиктиол оказва противоракови ефекти върху клетъчната линия U87 и потиска клетъчната пролиферация и метастазирането. Съединението проявява своите противотуморни свойства чрез модулиране на сигналния път PI3K/Akt/NF-κB.
Това проучване, публикувано в списанието „Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine“ (2018 г.), показва, че китайската билкова формула, наречена хапче „Xihuang“, може да предизвика апоптоза в клетките U87, като въздейства върху активираната от ROS каскада Akt/mTOR/FOXO1.
LITAF повишава радиочувствителността на човешките глиомни клетки чрез FoxO1 пътя
Тази научна статия беше публикувана в списанието „Cellular and Molecular Neurobiology“ през 2019 г. Проучването предполага, че транскрипционният фактор LITAF потиска експресията и повишава радиочувствителността на глиомните клетки чрез регулиране на сигналния път FOXO-1.
Тази статия беше публикувана в списанието „Biointerface Research in Applied Chemistry“ (2019 г.). Изследователите използваха клетки U87MG, за да изследват цитотоксичния ефект на наночастиците от PLGA, натоварени с куркумин.
Ресурси за клетки U-87 MG: протоколи, видеоклипове и др.
Клетъчната линия U87MG на глиобластома се използва в много лаборатории за изследване на рака. Ето няколко ресурса, посветени на тази клетъчна линия:
- Трансфекция на клетъчната линия U87: Този документ ще ви опише протокол за трансфекция на клетки U87MG.
- Трансфекция на клетъчната линия U 87 MG: Това видео е урок, който обяснява стъпка по стъпка протокола за трансфекция на клетки U87.
Ресурсът за протокола за клетъчна култура на клетки U87 е посочен по-долу:
- Клетки U87 MG: Този линк съдържа основна информация за клетъчната линия U87 MG. Той включва кратки протоколи за разделяне, замразяване и размразяване на клетките.
Прозрения в изследванията на U87 MG глиома: Често задавани въпроси
Глиомни клетъчни линии, като например глиобластомните клетки U87, са култивирани клетки, получени от човешки глиоми, които се използват широко в изследванията на рака за изучаване на биологията на тумора, генетиката и реакциите към лекарствата. Те служат като модели за разбиране на поведението на тумора и за изпитване на терапевтични стратегии.
Изогенната клетъчна линия се отнася до клетки, получени от една-единствена клетка, което осигурява генетична еднородност. В изследванията на глиома изогенните линии осигуряват последователен модел за изучаване на генетичните промени и тяхното въздействие върху растежа на тумора и отговора на лечението.
ДНК профилът на клетъчните линии на глиома е от решаващо значение за идентифициране на генетичните промени, за разбиране на еволюцията на тумора и за разработване на целеви терапии. Той подпомага класификацията на туморите въз основа на генетични маркери като мутации на IDH1.
Серумът в средите за клетъчни култури осигурява важни растежни фактори, хормони и хранителни вещества за глиомните клетки. Съставът му обаче може да повлияе на възпроизводимостта на експериментите, поради което все по-често се използват условия без серум или с дефиниран серум.
Клетъчната цитотоксичност при клетъчните линии на глиома се оценява с помощта на тестове като поточна цитометрия, която измерва състоянието, жизнеспособността и смъртта на клетките след третиране с лекарства или имунни клетки като клетките естествени убийци (NK).
Цитотоксичността на NK клетките играе важна роля в изследванията за лечение на глиома, тъй като NK клетките могат да разпознават и убиват туморни клетки без предварителна сенсибилизация. Изучаването на взаимодействието на NK клетките с глиомни клетки помага за разработването на стратегии за подобряване на туморното изчистване, медиирано от NK клетките.
Туморът, от който произхожда, предоставя информация за първоначалната биологична среда и характеристиките на тумора. Разбирането на това помага да се свържат резултатите от изследванията на клетъчни линии с действителното поведение на тумора и прогнозата на пациента.
Електронната микроскопия предлага подробна визуализация на клетъчните и субклетъчните структури в глиомни клетъчни линии, което е от решаващо значение за изследване на клетъчната морфология, състоянието на органелите и промените след лечение.
NKG2D лигандът се експресира в туморните клетки и се свързва с NKG2D рецептора на NK клетките, като предизвиква цитотоксичен отговор. Изучаването на това взаимодействие помага да се разбере и потенциално да се подобри имунният отговор срещу глиома.
3D моделите на клетъчни култури по-точно имитират туморната микросреда, което дава по-добра представа за растежа, миграцията и резистентността на глиома към лекарства. Тази техника е от решаващо значение за по-подходящи проучвания в областта на транслационната онкология.
Източници
- Gwon, D.H. и др., BMAL1 потиска пролиферацията, миграцията и инвазията на U87MG клетки чрез понижаване на експресията на циклин B1, фосфо-AKT и металопротеиназа-9. Int J Mol Sci, 2020. 21(7).
- Huang, C., и др., LITAF повишава радиочувствителността на човешките глиомни клетки чрез FoxO1 пътя. Cell Mol Neurobiol, 2019. 39(6): стр. 871-882.
- Koc, K. и др., антиоксидантни и противоракови свойства на екстракт от Inula helenium (L.) в човешката клетъчна линия U-87 MG на глиобластома. J Cancer Res Ther, 2018. 14(3): стр. 658–661.
- Rezadoost, M.H., H.H. Kumleh и A. Ghasempour, „Цитотоксичност и индуциране на апоптоза в клетки на рак на гърдата, рак на кожата и глиобластома чрез растителни екстракти“. Mol Biol Rep, 2019. 46(5): стр. 5131–5142.
- Фукая, М. и др., Цитотоксичност на сесквитерпеновите алкалоиди от растенията от род Nuphar спрямо чувствителни и лекарствено-устойчиви клетъчни линии. Food Funct, 2018. 9(12): стр. 6279–6286.