Клетъчна линия RAW 264.7 в изследванията върху макрофагите и имунологията

Клетъчната линия RAW 264.7 служи като надежден in vitro модел за миши макрофаги, който е от основно значение в областта на имунологичните изследвания. Произхождащи от мъжка мишка от линията BALB/c, тези клетки са трансформирани от мишия левкемичен вирус на Абелсън, в резултат на което се получава клетъчна линия, подобна на макрофаги. Благодарение на функционалната си стабилност и присъщата им способност да извършват както фагоцитоза, така и пиноцитоза, клетките RAW 264.7 са от съществено значение за изучаването на взаимодействията между гостоприемника и патогена, което ги превръща в крайъгълен камък в имунологичните изследвания [1,2].

📋 Клетъчна линия RAW 264.7 — Кратка информация

Среда за отглеждане: Вижте страницата на продукта
Време за удвояване: Вижте страницата на продукта
Тип растеж: Прилепващ
Ниво на биологична безопасност: BSL-1
Наличен от: Cytion — Поръчайте RAW 264.7

Морфологични характеристики и поведение при растеж

При изследване клетките RAW 264.7 проявяват полуадхезивен растеж със склонност да образуват както вретеновидни адхезивни клетки, така и сферични плаващи жизнеспособни клетки, с клетъчен диаметър, вариращ от 10 до 20 µm. Тази полиморфна природа и адаптивност към културалните условия правят клетките RAW 264.7 универсален инструмент за експериментална манипулация и наблюдение.

Имунологична функция и представяне на антигени

Като антиген-представящи клетки, клетките RAW 264.7 играят решаваща роля в имунната система. Тяхната функция се простира отвъд простото разпознаване на патогени до обработката и представянето на антигени пред Т-клетките, като по този начин координират цялостен имунен отговор. Тази динамика улеснява по-задълбоченото разбиране на това как имунната система идентифицира и неутрализира чужди елементи.

Поляризация на макрофагите: парадигмата M0, M1 и M2

Клетките RAW 264.7, в своето базово състояние като макрофаги M0, притежават забележителната способност да се поляризират към провъзпалителния фенотип M1 или към противовъзпалителния фенотип M2. Тази способност за поляризация предоставя на изследователите модел за изучаване на влиянията и ефектите на различни цитокини и фактори на околната среда върху функцията на макрофагите и имунните реакции [3,4].

Остеокластогенеза и костно преобразуване

Въпреки че не са самите остеокласти, клетките RAW 264.7 са от ключово значение за изучаването на остеокластогенезата – процеса на образуване на остеокласти. Тези клетки улесняват изследването на експресията на остеокластичните гени и тяхната реактивност към активирането на рецепторите. Това изследване има дълбоко значение за разбирането на патофизиологията на състояния като остеопорозата, при която нарушеното костно ремоделиране е характерна черта.

Информация за клетъчната култура RAW 264.7

Преди да започнете експериментите си, трябва да разберете някои основни факти за тази мощна клетъчна линия. Знаете ли колко време отнема удвояването на клетките RAW 264.7? Каква е плътността на засяване за тези клетки и дали са адхезивни? Освен това, какви са оптималните условия за растеж на RAW 264.7? Продължете да четете, за да откриете всички отговори, от които се нуждаете, за да работите с тази невероятна клетъчна линия!

Информация за клетъчната култура: Клетъчна линия RAW 264.7
Време за удвояване на популацията: 11 до 30 часа
Адхезивни или в суспензия: Предимно адхезивна, с някои популации от клетки в суспензия
Плътност на засяване: 4 x 10^4 клетки/cm^2
Препоръчителна среда за отглеждане: RPMI 1640, допълнена с 10% фетално телешко серум и L-глутамин (2,5 mM)
Оптимални условия за отглеждане: Овлажнен инкубатор с 5% CO₂ и температура 37°C
Смяна на средата: 2 до 3 пъти седмично
Съхранение: В парофаза на течен азот
Среда за замразяване: CM-1 или CM-ACF
Процес на замразяване: Бавно замразяване
Процес на размразяване: Бързо разбъркване във водна баня при 37 °C
Ниво на биологична безопасност: Препоръчва се лаборатория от ниво BSL-2

RAW 264.7 cells

Миши макрофаги RAW 264.7 при различна степен на конфуентност.

Предимства и недостатъци на клетките RAW 264.7

Предимства

Лесно култивиране: Клетъчната линия RAW 264.7 се отглежда и поддържа лесно в лабораторни условия, без да са необходими сложни изисквания.
Добре охарактеризирана: RAW 264.7 е добре охарактеризирана клетъчна линия, което означава, че притежава стабилни фенотипни и функционални характеристики.
In vitro модел на макрофаги: Тъй като клетките RAW 264.7 са макрофаги, те проявяват основни функции, характерни за макрофагите, като фагоцитоза и пиноцитоза. Поради това те често се използват като in vitro модел на макрофаги.
Диференциация в остеокласти: Клетките RAW 264.7 могат да бъдат диференцирани в остеокласти с помощта на специфични молекулни фактори. Тези диференцирани клетки са способни да извършват костно преобразуване, подобно на остеокластите.

Недостатъци

Недостатъчно точно представяне на първичните макрофаги: Като трансформирана клетъчна линия, RAW 264.7 може да не отразява точно характеристиките на първичните макрофаги и може да има някои разлики в генната експресия, фенотипа и функцията.
Ограничения при скрининга на лекарства: Клетките RAW 264.7 може да не са подходящи за всички видове тестове за скрининг на лекарства, а реакциите им към някои лекарства може да се различават от тези на първичните макрофаги.
Силна клетъчна адхезия: Клетките RAW 264.7 се прилепват силно към повърхността на културалната колба и понякога може да е трудно да бъдат отделени.

Приложения на клетките RAW 264.7 при имитация на макрофаги и имунологични изследвания

Моделиране на клетъчни имунологични реакции

Клетъчната линия RAW 264.7, която отразява функционалностите на автентичните макрофаги, е ключов модел за изследване на клетъчните реакции към патогени и имунологични стимули. Едно проучване, подчертаващо този аспект, оцени имуномодулиращите и антиоксидантните ефекти на млечнокисели бактерии, убити чрез топлинна обработка, върху тези клетки, като предостави значими открития в регулирането на имунната система [5 ].

В допълнение към това, изследване, проведено през 2019 г., разкри имунологичното въздействие на експозицията на RAW 264.7 на полизахариди от растението Polygonatum sibiricum. Проучването стигна до заключението, че тези съединения предизвикват имунен отговор чрез активиране на сигналните пътища NF-κB/MAPK, като предлагат задълбочено молекулярно разбиране [6].

Изследване на остеокластогенезата

Функционирайки като сурогат за изследвания на диференциацията на остеокластите, клетките RAW 264.7 допринасят за изясняването на поведението на остеокластите и пътищата на диференциация. Такива изследвания разширяват знанията ни за механизмите на костната резорбция и патогенезата на остеопорозата. Често се използват съвременни техники за визуализация, за да се наблюдават вътреклетъчните промени и да се анализира метаболизмът на хема в тези клетки.

Получаване на молекулярни познания за остеокластогенезата

Въпреки основната си роля като модел на макрофаги, клетките RAW 264.7 се използват и за изследвания на остеокластогенезата in vitro. Чрез индуциране на остеокластоподобни характеристики в тези клетки изследователите получават по-добро разбиране за процеса на диференциация и поведението на пре-остеокластите, въпреки че при тези изследвания е от решаващо значение да се вземат предвид присъщите характеристики и произходът на клетъчната линия.

Скрининг за биоактивност на природни продукти

Скринингът за биоактивност в природни продукти е друго приложение, в което клетките RAW 264.7 се отличават. Например, използването им в корейско проучване, изследващо имуностимулиращите свойства на билкова смес, демонстрира ефективността на клетъчната линия при идентифицирането на биоактивни съединения в природни вещества [7 ].

Станете пионери в изследванията си с нашите клетки RAW 264.7

430,00 €*

Съдържание: 1.5 milliliter

Цени без данъци и разходи за доставка

cryovial

Номер на продукта: 400319

Научни публикации, в които са използвани клетки от линията RAW 264.7

Налице са много научни публикации относно клетъчната линия на миши макрофаги RAW 264.7:

Полизахаридите от Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute предизвикват имунен отговор в клетъчната линия RAW 264.7 чрез NF-κB/MAPK сигналния път: Това проучване предполага, че полизахаридите, получени от растението Polygonatum sibiricum, могат да предизвикат имунен отговор в клетъчната линия на миши макрофаги RAW 264.7 чрез регулиране на сигналната каскада NF-κB/MAPK.
Имуномодулиращи ефекти на екстракта от Tinospora crispa и основните му съставки върху имунните функции на макрофагите RAW 264.7: Тази статия, публикувана в списанието „International Immunopharmacology“, описва, че екстрактът от растението Tinospora crispa и основните му съставки имат имуномодулиращ и имуностимулиращ ефект върху макрофагната клетъчна линия RAW 264.7.
Термично убитите млечнокисели бактерии инхибират производството на азотен оксид чрез индуцируема азотен оксид синтеза и циклооксигеназа-2 в клетките RAW 264.7: Това проучване предлага, че термично убитите млечнокисели бактерии могат потенциално да бъдат използвани при синтеза на пробиотични продукти, тъй като притежават имуномодулиращи и антиоксидантни свойства. Изследователите са използвали клетки RAW 264.7, за да изследват тези биологични активности.
Ефект на билков препарат върху усилването на имунния отговор в макрофагите RAW 264.7: В това проучване са използвани клетки RAW 264.7 за изследване на имуностимулиращия ефект на билков препарат, наречен KM1608. Проучването посочва KM1608 като потенциален агент за усилване на имунния отговор.
Скрининг на растения, използвани в традиционната колумбийска медицина, разкри противовъзпалителния потенциал на чашелистците на Physalis angulata: Тази статия, публикувана в „Saudi Journal of Biological Sciences“, изследва противовъзпалителния потенциал на 10 често използвани традиционни колумбийски растения, като използва LPS-стимулирани клетки RAW 264.7.

Клетки RAW 264.7: ресурси, протоколи, видеоклипове и др.

Клетките RAW 264.7 често се използват в изследвания по трансфекция. Следните ресурси обясняват различните методи за трансфекция, използвани за клетъчната линия RAW 264.7.

Трансфекция на клетки RAW 264.7: На този уебсайт ще намерите протокол за трансфекция на макрофаги RAW 264.7 с помощта на реагент „Липофектамин“.
Протокол за трансфекция: Тази публикувана статия описва подробен протокол за трансфекция на клетки RAW 264.7.
Ефективен метод за трансфекция на клетки RAW 264.7: Този документ описва друг практичен подход за трансфекция с използване на клетки RAW 264.7.

Видеоклипове, свързани с клетъчната линия RAW 264.7

Култивиране на клетки RAW 264.7: Това видео обяснява протокола за пасажиране на клетки RAW 264.7.
Метод за трансфекция: Това видео е посветено на трансфекцията на клетки RAW 264.7 с репортерния ген.

Основни често задавани въпроси относно клетъчната линия RAW 264.7: Поглед върху изследванията в областта на имитацията на макрофагите и остеокластогенезата

Източници

Taciak, B. и др., Оценка на фенотипната и функционалната стабилност на клетъчната линия RAW 264.7 чрез серийни пасажи. PloS one, 2018. 13(6): стр. e0198943.
Wang, S., и др., Възпалителните макрофаги прекъсват съзряването и минерализацията на остеоцитите чрез регулиране на сигналния път Notch. Molecular Medicine, 2022. 28(1): стр. 102.
Орехов, А.Н. и др., Диференциация на моноцитите и поляризация на макрофагите. Vessel Plus, 2019. 3: стр. 10.
Хабипов, А., и др., Поляризация на макрофагите RAW 264.7 от клетки на рак на панкреаса – модел за изучаване на макрофагите, подпомагащи туморното развитие. Anticancer Research, 2019. 39(6): стр. 2871-2882.
Канг, С.-Х. и др., Убитите чрез нагряване млечнокисели бактерии инхибират производството на азотен оксид чрез индуцируема азотен оксид синтеза и циклооксигеназа-2 в клетки RAW 264.7. Probiotics and Antimicrobial Proteins, 2021. 13(6): стр. 1530–1538.
Zhang, J. и др., Полизахаридите от Polygonatum sibiricum Delar. ex Redoute предизвикват имунен отговор в клетъчната линия RAW264.7 чрез NF-κB/MAPK пътя. RSC Advances, 2019. 9(31): стр. 17988–17994.
Trinh, T.A. и др., Ефект на билков препарат върху усилването на имунния отговор в макрофагите RAW 264.7. Biomolecules, 2020. 10(3): стр. 424.