Клетки P19 – Изследвания върху ембрионалния карцином с използване на клетки P19
P19 е клетъчна линия от миши ембрионален карцином. Тя се използва широко в биомедицинските изследвания, главно за изучаване на биологията на развитието, биологията на стволовите клетки, клетъчната диференциация и скрининг на лекарства. Тъй като клетките P19 притежават способност за диференциация, те могат да бъдат полезни при изследването на сложни биологични процеси, като образуването на тъкани и ранното ембрионално развитие. В тази статия ще обсъдим основните характеристики на клетките P19, получени от мишки.
- Среда за отглеждане
- Среда DMEM/Ham's F12, съдържаща 5% фетално телешко серум, 3,1 g/L глюкоза, 1,6 mM L-глутамин, 1,0 mM натриев пируват, 15 mM HEPES и 1,2 g/L NaHCO₃ се използва за култивиране на P19 клетки.
- Време за удвояване
- Времето за удвояване, отчетено за клетъчната линия P19, е приблизително 2 до 3 дни.
- Тип растеж
- Клетъчната линия P19 от ембрионален карцином е адхезивна.
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Налична от
- Cytion — Поръчайте P19
- Общи характеристики и произход на клетките P19
- Информация за култивирането на клетки P19
- Клетъчна линия P19: предимства и недостатъци
- Приложения на клетките P19 в научните изследвания
- Закупете клетъчната линия P19 още днес
- Клетки P19: Научни публикации
- Ресурси за клетъчната линия P19: протоколи, видеоклипове и др.
- Запознаване с клетъчната линия P19: Често задавани въпроси
- Източници
- Често задавани въпроси
Общи характеристики и произход на клетките P19
Преди да започнете да работите с дадена клетъчна линия, е от съществено значение да сте запознати с нейните общи характеристики и произход. В тази секция ще бъдат разгледани следните въпроси: Какво представлява клетъчната линия P19? Какъв е размерът на клетката P19? Какъв е произходът на клетките P19?
- P19 е вид плюрипотентни ембрионални карциномни клетки, първоначално получени от тератокарцином, развил се при мишка от линията C3H/He. Клетъчната линия е създадена за първи път през 1982 г. от Макбърни и Роджърс.
- Клетките P19 могат да растат непрекъснато в културална среда, обогатена със серум. Те могат да се диференцират в други видове клетки, когато бъдат изложени на нетоксични лекарства като ретиноева киселина и диметилсулфоксид (DMSO) [1].
- Тези миши карциномни клетки притежават епителиоподобна морфология.
- Клетъчната линия P19 има еуплоиден мъжки кариотип (n=40; XY).
Информация за култивирането на клетки P19
Клетъчната линия P19 се култивира широко в изследователски лаборатории поради своите уникални характеристики. Култивирането ѝ е лесно и управляемо. В тази секция е посочена цялата ключова информация, необходима за поддържане и размножаване на клетъчна култура P19. Ще разберем: Какво е времето за удвояване на клетките P19? Как се култивира клетъчната линия P19? Дали P19 е адхезивна клетъчна линия?
Ключови моменти при култивирането на клетки P19
Време за удвояване:
Отчетеното време за удвояване за клетъчната линия P19 е приблизително 2 до 3 дни.
Адхезивна или в суспензия:
Клетъчната линия P19 от ембрионален карцином е адхезивна.
Съотношение при субкултивиране:
Клетките P19 трябва да се субкултивират на всеки 48 часа, като за тях трябва да се поддържа съотношение на разделяне 1:10. Адхезивните клетки се промиват с 1X фосфатен буферен разтвор и се инкубират с Accutase, докато клетките се дисоциират. Клетките се добавят към културалната среда и се събират чрез центрофугиране. Събраните клетки се ресуспендират внимателно и се разпределят в нови колби.
Среда за растеж:
DMEM/Ham's F12 среда, съдържаща 5% фетално телешко серум, 3,1 g/L глюкоза, 1,6 mM L-глутамин, 1,0 mM натриев пируват, 15 mM HEPES и 1,2 g/L NaHCO3 се използва за култивиране на P19 клетки.
Условия за растеж:
За отглеждането и култивирането на клетъчната линия P19 на ембрионален карцином е необходим овлажнен инкубатор, настроен на 37 °C с подаване на 5 % CO₂.
Съхранение:
Замразените епруветки с клетки P19 трябва да се съхраняват при температура под -150 °C във фризер или във фазата на пари на течен азот, за да се поддържа жизнеспособността на клетките в дългосрочен план.
Процес на замразяване и среда:
За замразяването на клетките P19 могат да се използват среди CM-1 или CM-ACF, като се прилага метод на бавно замразяване, който предпазва клетките от шок и запазва тяхната жизнеспособност.
Процес на размразяване:
Замразените клетки P19 могат да се размразяват във водна баня при 37 °C чрез бързо разклащане на епруветката в продължение на 40 до 60 секунди. Към клетките се добавя свежа среда и се центрофугират, за да се отстранят елементите на средата за замразяване. Клетъчната суспензия се ресуспендира отново и клетките се прехвърлят в нова колба за отглеждане.
Ниво на биологична безопасност:
За клетъчната линия P19 са необходими лабораторни условия от ниво 1 на биологична безопасност.
Клетъчна линия P19: Предимства и недостатъци
В тази секция ще бъдат разгледани предимствата и недостатъците на клетъчната линия P19.
Предимства
- Потенциал за диференциация: Клетките P19 могат да се диференцират в различни видове клетки, включително кардиомиоцити, неврони и микроглиални клетки. За диференциацията им са необходими нетоксични вещества, като ретиноева киселина и диметилсулфоксид (DMSO). Ретиноевата киселина индуцира развитието на неврони, микроглиални и астроглиални клетки, докато DMSO инициира развитието на пулсиращи кардиомиоцити и гладкомускулни клетки. По този начин клетките P19 са полезни при изучаването на клетъчната диференциация и процесите на развитие.
- Моделна система: Плурипотентната клетъчна линия P19 от ембрионален карцином е ценен модел за изучаване на ранното ембрионално развитие. Изследователите използват клетки P19, за да изяснят клетъчните сигнални пътища и клетъчните и молекулярните механизми, участващи в тези процеси.
Недостатъци
- Миши произход: P19 е миши клетъчна линия от ембрионален карцином. Следователно резултатите от изследвания, използващи тези клетки, може да не са напълно приложими към човешката биология и процеси.
Приложения на клетките P19 в научните изследвания
Клетките P19 имат няколко приложения в научните изследвания благодарение на способността си за диференциация и значението си за биологията на развитието и изследванията върху стволовите клетки. Някои от важните приложения на ембрионалните карциномни клетки P19 в научните изследвания включват:
- Изследвания на клетъчната диференциация: Както е известно, клетките P19 могат да се диференцират в неврони, микроглиални клетки, гладкомускулни клетки и кардиомиоцити; поради това се използват широко за изучаване на процесите на клетъчна диференциация. Освен това те подпомагат изследванията на неврологичното и сърдечното развитие и свързаните с тях механизми. Проучване, проведено през 2018 г., установи, че реактивните кислородни видове (ROS) насочват диференциацията на P19 клетките в специфични клетъчни типове и предотвратяват индуцирането на други [3]. Друго проучване изследва процеса на невронална диференциация, медииран от ретиноева киселина, и установи участието на сигналния път PI3K/Akt/GSK3β [4].
- Биология на развитието: Клетките P19 са безценен модел за изучаване на ранното ембрионално развитие. Те помагат на изследователите да разберат сложни биологични процеси, като образуването на тъкани по време на ембрионалното развитие. В проучването са използвани клетки P19 и са изследвани молекулярните фактори, допринасящи за образуването на дефект на междукамерната преграда (VSD). Резултатите разкриха, че дългата некодираща РНК SNHG6 допринася за VSD чрез отрицателна регулация на miRNA-101 и активиране на Wnt/β-катенинния път [5].
- Тестване на лекарства: Клетъчната линия P19 от ембрионален карцином на мишка се използва и за скрининг на потенциални лекарствени кандидати. В едно проучване са използвани диференцирани неврони от P19 клетки и са изследвани невропротективните ефекти на синтетичния L-Dopa и водния екстракт от семена на Mucuna pruriens като инхибитори на ацетилхолинестеразата. Резултатите показаха, че растителният екстракт дава обещаващи резултати в сравнение с L-Dopa [6].
Купете си клетъчната линия P19 още днес
Клетки P19: Научни публикации
В тази част от статията ще бъдат представени няколко интересни научни публикации, посветени на P19 клетките.
Тази статия беше публикувана в списанието „Oncology Reports“ през 2017 г. Проучването предлага хипотезата, че половите хормони на хипофизата стимулират адхезията, пролиферацията и миграцията на клетъчните линии на тератокарцинома, включително клетките P19.
Дългата некодираща РНК uc.4 влияе върху клетъчната диференциация чрез сигналния път на TGF-бета
В тази публикация в списанието „Experimental & Molecular Medicine“ (2018 г.) са използвани P19 клетки и е проучена функцията на дългата некодираща РНК uc.4. Резултатите разкриват, че uc.4 влияе върху клетъчната диференциация чрез модулиране на TGF-бета сигналния път.
Тази научна статия е публикувана през 2018 г. в списанието „Journal of Tissue Engineering and Regenerative Medicine“. Проучването установи, че естественият екстракт от мозъчна тъкан и триизмерната клетъчна култура могат да ускорят диференциацията на стволовите клетки от ембрионален карцином P19 в неврони.
Това проучване беше публикувано в списанието „Journal of Ethnopharmacology“ през 2020 г. Проучването предложи, че екстрактът от листа на Cichorium intybus L. може да индуцира диференциация на ембрионалните карциномни клетки P19 в инсулин-продуциращи β-клетки на панкреаса.
Това изследване беше публикувано в списанието „Molecules“ (2022 г.). В него бяха проучени невропротективните ефекти и инхибиторните ефекти върху ацетилхолинестеразата на екстракта от семена на Mucuna pruriens върху невроните на клетъчната линия P19.
Ресурси за клетъчната линия P19: протоколи, видеоклипове и др.
По-долу са представени няколко ресурса за клетките P19.
- Протокол за невронална диференциация на клетки P19: Тази статия съдържа протокол за невронална диференциация на клетки P19 и друга полезна информация за диференциацията на клетки P19.
- Трансфекция на клетки P19: Този линк ще ви помогне да се запознаете с протокола за трансфекция на клетки P19.
Следващият линк съдържа протокола за култивиране на клетки P19.
- Клетки P19: Този уебсайт съдържа цялата полезна информация за клетъчната линия P19, включително условията за култивиране, средите за P19 клетки, разделянето на клетките и много други.
Изследване на клетъчната линия P19: Често задавани въпроси
Източници
- McBurney, M.W., Ембрионални карциномни клетки P19. Int J Dev Biol, 1993. 37(1): стр. 135-40.
- Bressler, J. и др., Клетъчна линия на ембрионален карцином P19: модел за изследване на взаимодействията между гени и околната среда. Cell Culture Techniques, 2011: стр. 223–240.
- Пашковская, Н., У. Гей и Г. Рьодел, Митохондриалните ROS направляват диференциацията на миши плюрипотентни P19 клетки. Stem Cell Research, 2018. 30: стр. 180-191.
- Фу, Ф. и др., Все-транс-ретиноидната киселина индуцира диференциацията на P19-клетките в неврони, участващи в сигналния път PI3K/Akt/GSK3β. Journal of Cellular Biochemistry, 2020. 121(11): стр. 4386–4396.
- Jiang, Y., и др., Дългата некодираща РНК SNHG6 допринася за образуването на дефект на междукамерната преграда чрез отрицателна регулация на miR-101 и активиране на Wnt/β-катенинния път. Die Pharmazie – Международно списание по фармацевтични науки, 2019. 74(1): стр. 23–28.
- Камкаен, Н., и др., Водният екстракт от семена на Mucuna pruriens подобрява невропротективните ефекти и инхибирането на ацетилхолинестеразата в сравнение със синтетичната L-допа. Molecules, 2022. 27(10): стр. 3131.