Клетки NIH-3T3: Напредък в изследванията на фибробластите и приложенията на NIH-3T3
Клетъчната линия NIH-3T3, създадена през 1962 г. от тъкан на 17-дневен ембрион на швейцарска албиноска мишка от Хауърд Грийн и Джордж Тодаро в Медицинския факултет на Нюйоркския университет, се превърна в основен ресурс в биомедицинските изследвания. Известни с високата си податливост към образуването на огнища на левкемичен и саркомен вирус, клетките NIH-3T3 служат като ключов инструмент за множество научни изследвания, включително проучвания в областта на вирусната онкология, анализ на генната експресия и изследване на динамиката на клетъчния растеж. Наименованието „3T3“ отразява метода на клетъчната култура, обозначавайки интервал от „3-дневен трансфер“ с начална плътност на засяване от 3 × 10^5 клетки, като подчертава стандартизираните условия, при които тези клетки за първи път са били култивирани и размножени.
- Среда за растеж
- Вижте страницата на продукта
- Време за удвояване
- Вижте страницата на продукта
- Тип растеж
- Прилепващ
- Ниво на биологична безопасност
- BSL-1
- Наличен от
- Cytion — Поръчайте NIH-3T3
Разнообразни морфологии и приложения на NIH-3T3 клетки
Една от отличителните характеристики на NIH-3T3 клетките е тяхната морфологична адаптивност, която варира значително в зависимост от степента на конфуентност на културата. При по-ниски плътности тези фибробласти имат форма на вретено и са единични, но с достигането на конфуентност популацията се превръща в гъста, с вихрести форми. С среден диаметър от около 18 μm, клетките NIH-3T3 предлагат универсален модел за задълбочени изследвания в областта на клетъчната биология, вариращи от механизмите на възстановяване на тъканите до сложните пътища на регулация на клетъчния цикъл.
Информация за култивирането
Основни данни за култивирането:
Време за удвояване на популацията: Приблизително 20 часа.
Тип растеж: Адхезивни култури.
Плътност на засяване: Препоръчителна: 3 до 4 x 10^4 клетки/cm^2.
Среда за растеж: DMEM или Ham's F12, допълнена с 5% FBS и 2,5 mM L-глутамин.
Условия за растеж: Поддържайте при 37 °C във влажен инкубатор с 5% CO2.
Съхранение: Съхранявайте при температури под -195 °C във фазата на пари на течен азот.
Метод на замразяване: Използвайте среда CM-1 или CM-ACF; приложете метод на бавно замразяване (спад на температурата с 1 °C).
Протокол за размразяване: бързо затопляне във водна баня при 37 °C, последвано от центрофугиране за отстраняване на средата за замразяване, след което ресуспендиране в среда за отглеждане.
Ниво на биологична безопасност: Култивирането изисква условия на ниво 1 на биологична безопасност.
Швейцарска албиноска мишка в лаборатория.
Предимства и недостатъци при използването на NIH 3T3 клетки
Предимства
Ефективност на трансфекцията: Известни с високите си нива на трансфекция, NIH-3T3 клетките са отлични както за изследвания на преходна, така и на стабилна генна експресия, като поддържат разнообразни техники за трансфекция.
Полезност като поддържащ слой: Тези клетки често служат като поддържащ слой за съвместни култури с клетки като кератиноцити и стволови клетки, благодарение на отделянето на растежни фактори, които стимулират растежа на съвместно култивираните клетки.
Изследвания на стволови клетки: Клетките NIH-3T3 са предпочитан избор в изследванията на стволови клетки за индуциране на плюрипотентност без генетична модификация и осигуряване на благоприятна среда за диференциацията на стволовите клетки.
Стабилност на културата: Клетките NIH-3T3 са известни със своята стабилност и ниската честота на спонтанна трансформация. При определени условия обаче или след излагане на специфични онкогени или мутагени, NIH-3T3 клетките могат да претърпят спонтанна трансформация. Тази трансформация може да доведе до придобиване на ракови свойства, като неконтролиран растеж, загуба на контактна инхибиция и способност за образуване на тумори при инжектиране в податливи приемници.
Недостатъци
Непостоянен размер на клетките: Удължената, вретенообразна морфология на NIH-3T3 клетките може да варира, което затруднява анализа на изображенията при тестовете.
Податливост към инфекции: Тези клетки са податливи на бактериални и микоплазмени инфекции, ако не се поддържат в строги асептични условия, което може да повлияе на целостта на експеримента.
Приложения на NIH-3T3 клетките в научните изследвания
Изследвания за трансфекция на ДНК: Устойчивостта на NIH-3T3 клетките ги прави идеални за въвеждане и изучаване на функцията на различни гени, което е демонстрирано в изследвания, проучващи протеини като NAB2-STAT6 и тяхната роля в клетъчните процеси.
Клетъчни тестове: Надеждността им се простира до различни тестове, включително тестове за жизнеспособност, апоптоза и образуване на фокуси, като предоставя информация за клетъчните реакции при различни експериментални условия.
Изследвания на клетъчния цикъл: Лесната манипулация на клетъчния цикъл на тази клетъчна линия чрез нивата на серум я превръща в мощен модел за изучаване на регулацията на клетъчния цикъл и нейните отклонения в контекста на заболявания.
Повишете ефективността на вашите изследвания с NIH-3T3 клетки
Представяне на ключови изследвания, включващи клетъчната линия от фибробласти NIH 3T3
Клетъчната линия NIH-3T3 е играла ключова роля в множество изследователски проекти, обхващащи различни аспекти на клетъчната биология. По-долу са представени някои значими изследвания, в които са използвани тези клетки:
- Изследване на фузионния протеин NAB2-STAT6: Публикувано в списанието „Biochemical and Biophysical Research Communications“, това проучване разглежда как фузионният протеин NAB2-STAT6 въздейства върху клетките NIH-3T3, по-специално ролята му в стимулирането на клетъчния растеж и миграция чрез регулация на EGR-1.
- Изследване на APOBEC3 и мишия левкемичен вирус: Това проучване, публикувано в списанието „Virology“, разглежда хипермутацията на мишия левкемичен вирус AKV в NIH-3T3 клетки, експресиращи мишия ген APOBEC3.
- Оценка на антиметастатичния потенциал на епигенетичните лекарства: Публикувано в списанието „Oncotargets and Therapy“, това проучване оценява антиметастатичните ефекти на хидралазин и валпроева киселина върху RAS-трансформирани NIH-3T3 клетки.
- Влияние на байкалеина върху пролиферацията на NIH-3T3 и синтеза на колаген: Това изследване използва NIH-3T3 клетки, за да проучи как байкалеинът влияе върху клетъчната пролиферация и производството на колаген чрез модулация на оста miR-9/инсулиноподобен растежен фактор-1.
- Изследване на изчерпването на рибофлавин и туморогенезата: Това проучване представя резултати за това как дефицитът на рибофлавин в NIH-3T3 клетките допринася за туморогенезата, като стимулира клетъчната пролиферация и нарушава регулацията на гените на клетъчния цикъл.
Необходими ресурси за изследвания с NIH-3T3 клетки
За изследователи, които проявяват интерес към работата с NIH-3T3 клетки, са налице разнообразни ресурси, които да ги насочат при култивирането и експерименталните протоколи:
- Образуване на сфероиди в NIH-3T3 клетки: Това видео предоставя подробно ръководство за образуването на сфероиди – техника за 3D клетъчна култура, при която NIH-3T3 клетките се агрегират в клъстери, предлагайки по-физиологично релевантен модел за изследвания.
- Наблюдение на растежа на NIH-3T3 клетки: Чрез системата за визуализация на живи клетки JuLI Br това видео заснема динамиката на растежа на NIH-3T3 клетки в продължение на 65 часа, показвайки клетъчната пролиферация в реално време.
Тези ресурси имат за цел да подпомогнат вашите изследователски усилия с NIH-3T3 клетки, като предоставят основа за успешни експерименти и открития.
Често задавани въпроси относно клетките NIH-3T3
Източници
- Rahimi, A.M., M. Cai и S. Hoyer-Fender, „Хетерогенност на клетъчната линия на фибробластите NIH3T3“. Cells, 2022. 11(17): стр. 2677.
- Leibiger, C. и др., Първа молекулярно-цитогенетична характеристика с висока разделителна способност на клетъчната линия NIH 3T3 чрез мултицветно оцветяване на мишки. Journal of Histochemistry & Cytochemistry, 2013. 61(4): стр. 306–312.
- Wang, H.-X., и др., Сравнителен анализ на различни подложки с фибробласти 3T3 за култивиране на лимбални стволови клетки от зайци. International Journal of Ophthalmology, 2017. 10(7): стр. 1021.
- Wang, Z., и др., Диференциация на невронни клетки от NIH/3T3 фибробласти при дефинирани условия. Development, growth & differentiation, 2011. 53(3): стр. 357–365.
- Парк, Й.-С., и др., Фузионният протеин NAB2-STAT6 медиира клетъчната пролиферация и онкогенната прогресия чрез регулация на EGR-1. „Биохимични и биофизични изследвания“, 2020. 526(2): стр. 287–292.
- Матсон, М., Експресия на Sloppymerase™ в NIH/3T3 клетки: изследване на многофункционалността на склонен към грешки фузионен полимераз. 2021 г.
- Сахинтурк, В. и др., Акриламидът проявява своята цитотоксичност в фибробластните клетки NIH/3T3 чрез апоптоза. Toxicology and Industrial Health, 2018. 34(7): стр. 481–489.
- Луси, Е.А. и Ф. Каичи, „Откриване на първия човешки ретро-гигантски вирус: Описание на неговата морфология, ретровирусна киназа и способност да предизвиква тумори при мишки“. bioRxiv, 2019: стр. 851063.
- Ендо, М. и др., Сигналният път E2F1‐Ror2 посредничи координираната транскрипционна регулация, за да стимулира прехода от фаза G1 към фаза S в NIH/3T3 фибробласти, стимулирани с bFGF. The FASEB Journal, 2020. 34(2): стр. 3413–3428.
- Лонг, Л., и др., Изчерпването на рибофлавин стимулира туморогенезата в клетки HEK293T и NIH3T3 чрез поддържане на клетъчната пролиферация и регулиране на транскрипцията на гени, свързани с клетъчния цикъл. The Journal of Nutrition, 2018. 148(6): стр. 834–843.